SBT 10319-1999 熟料消化率测定法.pdf

备窦号:2 7 4 6-1 9 9 9中 华 人 民 共 和 国 行 业 标 准熟料消化率测定法 默羔器8 7D e t e r m i n a t i o n o f d i g e s t i b i l i t y o f s t e a me d m a t e r i a l 本方法适用于酿造酱油时在制品熟料的消化率测定。消化率系指原料经蒸煮后，其中蛋白质可被酶分解为水溶性肤类或氨基酸的百分比，以此来衡量蒸煮的质量。试荆与仪 器 所用试剂都为分析纯。1.1 酶液(1 0%种曲浸出液)取约2 0 g 新 鲜 种 曲，放 入 锥 形 瓶中，加2 0 m L 5 0 肠 酒 精(酒 精:水=1，1)混 匀，加1 8 0 m L 水 搅拌均匀，置于4 0 水浴中 浸泡1 h，频频摇动，用慢速滤纸或离心机分离(1 5 0 0 -2 0 0 0 r/m i n)5 m i n，上清液或滤液用福林法测定蛋白酶活力在 1 0 0单位/m L以上;但酶液的全氮含量须在 0.0 6%以下，如不在此范围内，则须加以调节。酶液不必每次都在测定前进行制备。在几天内可根据需要量，一次制备好，调整好酶活力范围以后置冰箱中备用，但也不宜超过三天。1.2 p H 7.2 磷酸盐缓冲液 甲 液:称磷酸二氢钠(N a H 2 P O,2 H 2 0)3 1.2 g，用 蒸馏水定容至1 0 0 0 m L,乙 液:称磷酸氢二钠(N a 2 H P O,7 1-1 2 0)5 3.7 g，用 蒸馏水定容至1 0 0 0 m L,取甲 液2 8 m L，乙液7 2 m L混合即成p H 7.2 的磷酸盐缓冲液。1.3 高 速组织捣碎 机，型号D S-1(上海标本模型厂制造)功率2 0 O W，转速1 0 0 0 0 -1 2 0 0 0 r/m in,1.4水 浴 锅 I-S 离心机 1.6 测 定 酶 活 力、全 氮 所 用 试 剂、仪 器 见有 关 标准(S B/T 1 0 3 1 7-1 9 9 气G B/T 5 0 0 9.5-8 5),2 操作方法 2.1 熟 料浆制备 取1 0 0 g 熟料放入高 速组织捣碎机中，加蒸馏水3 0 0 m L。盖好盖子，合上开关，捣 搅l m i n 后停机，将飞溅在容器壁上的熟料颗粒用角 匙刮下，再继续开机捣碎2 m i n，使熟料捣成均匀的料浆。停机、开盖，将料浆倒入烧杯内。用四层湿纱布盖好备用。国家国内贸易局1 9 9 9-0 4-1 5 批准1 9 9 9-0 4-1 5实施2 3 7S B/T 1 0 3 1 8-1 9 8 2.2 测定步骤 2.2.1 精确称取熟料浆 6 g左右(精确到。.2 m g)于 1 5 0 m L锥形瓶内，加入7 5 mL酶液，再加入p H 7.2缓冲液 2 0 mL摇匀，在瓶口塞上橡皮塞后，置于水浴锅中。5 5 保持2 h取出，拔下塞子，放在已 煮沸的沸水浴中再煮沸1 O m i n。取出冷却，转人l 0 0 m L容量瓶，定容至1 0 0 m L。用慢速滤纸过滤，或离心分离 1 0 m in(1 5 0 0 -2 0 0 0 r 加in)。弃去开始滤出 的滤液5 m L 左右。用移液管精确吸取滤液或上清液 1 0 m L，严格按照全氮测定法测定水解液的全氮(T N水)。2.2.2 精确吸取酶液 l O m L，并测定其全氮含量(T N酶)。2.2.3 精确称取熟料奖 2 a 左右(精确到0.2 ma),测出料浆的全氮含量(T N料)。3计算消化率(%)-TN水X 1 0 0-T N酶X7 5TN料 X6X 1 0 0式中:T N水X 1 0 0-1 0 0 m L 水解液所含总氮量，9;T N酶X 7 5所加7 5 m L酶液所含的总氮量，g;T N料X 6 6 g 熟料浆 所含总氮 量，9.4 注意事项 4.1 料浆要尽量捣碎均匀，捣碎后 要及时称量。水解用料浆和测定全氮用料浆要紧接在一起称量，以免水分蒸发而引起误差。4.2 酶液可预先制备好。捣碎称量、测定酶液全氮、测定料浆全氮可在酶液浸出过程中和水解过程中交叉进行，以便压缩总的测定时间。4.3 为使浓 度呈梯度分布的上清液混合 均匀，离心结束后须把上清液倾出摇均后再吸取，为防止 倾出时把沉淀带出，可把上清液再用快速滤纸过滤一次，减少测定误差。附加说明:本标准由国 家国 内贸 易，局 提出。本标准由上海市酿造科学研究所起草。本标准主要起草人须凤高。2 3 9