SBT 10315-1999 孢子数测定法.pdf

备案号:2 7 4 2-1 9 9 9中 华 人 民 共 和 国 行 业 标 准抱子数测定法 S B丹 i 代 替Z B X6 6 0 2 8-8 7E n u me r a t i o n o f s p o r e本方法适用于酿造酱油半成品 菌种的抱子数测定。仪器与试剂a.显微镜、血球计数板、盖片b.9 5 写酒精、稀硫酸(1，1 0)c.天平:感量 0.O O l g,2 雄作方法 2.1 样品稀释:精确称取种曲 或二级菌 种1 g(称准至0.0 0 2 g)，倒入盛有玻璃珠的2 5 0 m L 锥形瓶内，加9 5%酒精5 m L，加无菌水2 0 m L，加稀硫酸l O m L，充 分振 摇，使分 生抱子个个分散，然后用多层纱布过滤、冲 洗，务使滤渣不含 抱子，稀释至5 0 0 m L e 2.2 制片:取稀释液1 滴，滴于血球计数板的计算格上，然后将盖 片轻轻由 一边向另一边压下，使盖片与 计数 板完 全密合，液中无气泡，用滤纸吸干多余的溢出悬浮抱子液，静 置数分钟，待抱 子沉降。2.3 观察计数:用低倍镜头或高倍镜头观察。由于稀 释液中的抱子，在血球计数板上处于不同的空间 位置，要在不同 的焦距下才 能看到，因而 计数时必须逐格调动微细螺旋，才能不使遗漏。抱子常位于大格的划线上，应一律取二边计数，而弃另二边，以 减少误差。使用1 6 X 2 5 的 计数 板时，只 计板上四 个角上的4 个大格(即1 0 0 个小格)。如果使用2 5 X 1 6 的 计数 板，除计四个角的4 个大格外，还需要计中央一大格的数目(即8 0 个小格)。每个样品重 复观察计数 不少于2 次，然后取其平均值。即为该样品种曲 的抱子数。3计算3.1 1 6 X2 5 的计数板抱子数(个/克)=揣X 4 0 0 X 1 0 0 0 0 X 答 _ _ _ n V，_、一 4入 土U 关 二:二 二 .“二，二“.”几 11 吸了式中:n-1 0。小 格内 抱子总数，个;V泡子稀释液体积，mL;国家国内贸易局1 9 9 9-0 4-1 5 批准 2 2 6 1 9 9 9-0 4-1 5实施 S B厂 r功肛压 一 1 创拍3.2 G样品重量，9。2 5 X1 6 的计数板抱 子 数(个/克 卜品 X 4 0 0 X 1 0 0 0 0 X 答 一 5 X 1 0 X 弩 (2)式中:n-8 0 小格内饱子总数，个;V-抱子稀释液体积，m L;G样品重量+9。4 注惫事项 4.1 称样要尽量防 止抱子的飞扬。4.2 测定时，如果发现有许多抱子结集成团或成堆，说明 样品稀 释未能符合操 作要求，因 此必须重新称重、振摇、稀释。4.3 生产实践中应用时.种曲以干物质计算。因而需要同时测定种曲 水分，计算时样品重量则改为绝干重量。样品绝干重量=G(1-W)”.，”“.，.”一(3)式中:G 样品重量，9;W样品水分的百分比含量，%。附加说明:本标准由国家 国内 贸易局提出。本标准由上海市酿造科学研究所起草。本标准主要起草人须凤高。2 2 7