NYT 3409-2018 畜禽肉中氯霉素的测定.pdf

I C S 6 7.1 2 0X 0 4备案号:1 4 1 6 7-2 0 0 4S8中华人 民共和 国国 内贸易行 业标 准S B/T 1 0 3 8 6-2 0 0 4畜 禽 肉 中 氯 霉 素 的 测 定D e t e r m i n a t i o n o f c h l o r a m p h e n i c o l i n m e a t o f l i v e s t o c k a n d p o u l t r y2 0 0 4-0 8-0 4发 布2 0 0 4-0 9-0 1实施中华人民共和国商务部发 布S B/T 1 0 3 8 6-2 0 0 4前言 本标准由中华人民共和国商务部提出。本标准由商务部屠宰技术鉴定中心负责起草，中国疾病预防控制中心营养与食品安全所、河北省疾病预防控制中心参加起草。本标准主要起草人:刘文娟、杨祖英、宋书锋、韩会新、张新玲、刘虎成、王贵际。本标准委托商务部屠宰技术鉴定中心负责解释。S B/T 1 0 3 8 6-2 0 0 4畜 禽 肉 中 氯 霉 素 的 测 定范围本标准规定了畜、禽肉中氯霉素的测定方法。本标准适用于畜、禽肉中氯霉素的检验。原理 试样中残留的氯霉素经乙酸乙酷提取后，经减压浓缩，用。.5 mo l/L高抓酸溶解残渣，用正己烷去除脂肪，经微孔滤膜过滤后，滤液供高效液相色谱分析。试 剂和材料 以下所用的试剂，除特别注明者外均为分析纯试剂，水为重蒸水。3，甲醇:色谱纯。3.2 正 己烷。3.3 氛霉素每毫克相当9 9 4单位，含量)9 9%,3.4 乙酸乙酷。3.5 高氯酸。3.6 氯霉素标准储备液:精确称取 0.0 1 0 g抓霉素标准品，置于 1 0 0 mL容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀。此溶液浓度为 0.1 0 mg/mL,置于冰箱中保存，有效期3个月。3.7 氯霉素标准工作液:精确吸取 5.0 M I储备液于 5 0 mL容量瓶中，用甲醇稀释至刻度。此溶液浓度 1 0 p g/mL，置于冰箱保存。有效期半个月。临用前取此液用 0.5 mo l/L高氯酸稀释成适当浓度的标准 工作液。仪器和设备高效液相色谱仪(配紫外检测器)。旋转蒸发仪。涡流混匀器。超声波发生器。旋转蒸发仪。微孔滤膜过滤。44.1424.34.44.54.6测定步骤5.1 提 取 取 2 0 0 g 试样绞碎，称取 2 0 g(精确至。.0 l g)绞碎后的试样，置于 1 0 0 m L具塞三角瓶中，加人4 0 mL 乙酸乙醋，振摇，超声提取 3 0 mi n，过滤，滤液放于另一三角瓶中。再加人 2 0 mL乙酸乙醋于试样中，超声提取1 5 mi n，过滤，滤液合并，滤渣再加 2 0 mL乙酸乙醋超声提取 1 5 m i n，过滤，滤液合并，全部滤液合并转人浓缩瓶中。5.2净化 将合并的滤液于 5 2 C-5 5 水浴旋转蒸发仪上浓缩至干。准确加人 1.0 m L O.5 m o l/L高氯酸溶液洗涤浓缩瓶中残留物，再加人 1 mL正己烷，振摇 1 mi n,将全部溶液转移至 5 m L试管中，静仆分层，S B/T 1 0 3 8 6-2 0 0 4吸弃正己烷层，再加人2 ml正己烷提取脂肪，再吸弃正已烷层，高氯酸溶液过 0.4 5 p m滤膜，滤液供高效液相色谱测定5.3测定5.3.1 液相色谱参考条件 a)色谱柱:H y p e r s i l O D S 2 2 5 0 mm X4.6 mm,粒径 5 p m;b)流动相:甲醇十水=4 5 十5 5;c)流速:l.0 mL/m i n;d)检测波长:2 8 0 n m;e)柱温:室温;f)进样量;2 0 V L o5.3.2 氮尽索标准曲线的制备 依照上述色谱条件，分别注人标准工作液各点。每个标准液进 2 0 p L测定其峰面积，然后以标准液浓度对峰面积作校准曲线，求出回归方程及相关系数。5.3.3 样品的测定 在上述色谱条件下，吸 取已 净化的 样品 溶液2 0 p L，进行H P L C 分析。6结果5.1 计算 将标准曲线各点的浓度与对应的峰面积进行回归分析，然后按式(1)分别计算供试样中氯霉素的含量c XVX 1 0 0 0 m X 1 0 0 0 式中:X 一 样品中氯霉素的含量，单位为毫克每千克(mg/k g);。被测液中氯霉素的含量，单位为微克每毫升(p g/mL);V 被测液体积，单位为毫升(mL);m 样品质量，单位为克(9)。2检 出限 本方法的检测限为0.0 1 p g/m L，当取样量为 2 0 g时，最低检测量为p g/k g.7允许差同一分析者同时或相继两次测定结果之差不得超过均值的1 5%,