NYT 2638-2014 稻米及制品中抗性淀粉的测定 分光光度法.pdf

NY/T2638-2014前言本标准按照GB/T1.1一2009给出的规则起草。本标准由中华人民共和国农业部提出并归口。本标准起草单位：中国水稻研究所、农业部稻米及制品质量监督检验测试中心。本标准主要起草人：方长云、徐霞、朱智伟、段彬伍、陈能。NY/T2638-20145.11水浴锅。5.12磨粉机。5.13温度计(37士0.1)；(50士0.1)。5.14具螺旋盖塑料离心试管(16mm125mm)。5.15玻璃试管(16mm100mm).6分析步骤6.1试样制备干试样：取代表性干样约50g,粉碎，过1.0mm筛，混匀后储于广口瓶中。湿试样：取有代表性湿样于组织捣碎机中捣成匀浆备用。6.2试液制备做2份平行试液。准确称取干样100mg(士5mg)样品，湿样样品约0.500g于螺旋帽试管中，轻轻拍打试管使样品集中在底部，加人4.0L-胰腺淀粉酶悬浮液，旋紧试管盖，置于涡旋振荡器混匀，卧式放人水浴摇床（与运动方向平行），于37准确振荡16h。取出试管，擦去外表水分，开启试管盖，加入4.0mL无水乙醇，涡旋，1500g离心10min(不加盖)。倾出上清液，加入2.0mL乙醇溶液，重悬浮，涡旋振荡，再加人6.0mL乙醇溶液，混合后，1500g离心10min。弃去上清液，重复上述重悬浮和离心步骤。弃去上清液，翻转试管，用滤纸吸除多余的液体。将试管置于冰水中，在各试管中放人磁力搅拌棒并加入2.0mL氢氧化钾溶液(4.19)，在冰水状态搅拌20min后，边搅拌边向各试管中顺序加入8.0mL的乙酸钠缓冲液(4.23)和0.1 mL AMG(4.26),混匀。取出试管，于50水浴30min,期间2次取出试管涡旋振荡后迅速放回水浴中。对于抗性淀粉含量10%的样品，用水全部转移试管里的样品至100L容量瓶（当用洗瓶洗涤试管中的溶液时用外磁铁保持试管中的磁力棒），定容，备用。对于抗性淀粉含量10%的样品，直接离心。6.3D-葡萄糖标准比色溶液将0.1mLD-葡萄糖标准储备液(4.32)和3.0mL的GOPOD一氨基安替比林混合液(4.31)混合。6.4空白溶液制备在玻璃试管中加人0.1mL的乙酸钠缓冲液(4.24)和3.0mL的GOPOD一氨基安替比林混合液(4.31)混合。6.5试液的测定将上述待测液(6.2)1500g离心10min。吸取上清液0.10mL置于玻璃试管，加入3.0mLGOPOD一氨基安替比林混合液(4.31)，50水浴20min后取出，以空白溶液凋零点，在510nm处测定试液(6.2)和D-葡萄糖标准比色液(6.3)的吸光度值。7结果计算试样中抗性淀粉含量以质量分数w(g/100g,以干重计)，计算按式(1)、式(2)进行计算。抗性淀粉(g/100g样品)（含量10%）w=AXFX100X100X1624”(10.1m1801000抗性淀粉(g/100g样品)（含量10%）w=4XF10.31001620.1m1801000(2)式中：A一相对于空白试剂的吸光度值；