NYT 1205-2006 大豆水溶性蛋白含量的测定.pdf

NY/T1205-2006(K2S04),混匀，研磨，过0.42mm筛。5仪器设备5.1采用凯氏定氮法为原理的各类型半自动、全自动蛋白质测定仪，或常量直接蒸馏式或半微量水蒸气蒸馏式凯氏蒸馏装置。5.2分析天平，感量0.001g。5.3粉碎机。5.4可控温往复式摇床，频率150次/min,全振幅60mm,(202)温度可控。5.5消煮炉。5.6离心机。5.7快速滤纸。6操作步骤6.1扦样按GB5491扦取大豆样品。6.2试样制备粉碎机粉碎样品，过0.25mm筛。6.3提取6.3.1称取粉碎试样5g,精确至0.01g,于50mL离心管中。6.3.2吸取50L20蒸馏水于离心管中，振摇使试样不结块，均匀分散。6.3.3将离心管固定于摇床，温度控制在(202)，振荡60min。6.3.4取下离心管，以2000r/min离心10min。6.3.5取出离心管，将上清液倒入250mL容量瓶中。6.3.6向离心管残渣中重新加入50mL20蒸馏水，同前再振荡60min,离心10min,将上清液倒入6.3.5容量瓶中。6.3.7重复6.3.6操作2次，将提取液全部收集倒入6.3.5容量瓶中，加蒸馏水定容至250mL。6.4消化6.4.1将容量瓶中溶液混合均匀后，快速滤纸过滤至250mL锥形瓶中，弃去最初的10mL15mL滤液。准确吸取10mL提取液于500mL蒸馏管中，加入2g3g混合催化剂、10mL硫酸，充分混匀。6.4.2将蒸馏管置于通风橱中加热消化。开始用100低温加热0.5h,至黑泡沫消失，控制瓶中泡沫不超过瓶管的23，然后再升温至400430，加热1.5h,至消化液呈透明的蓝绿色时，继续加热0.5ho6.5蒸馏、滴定待消化液冷至室温，上机蒸馏、滴定；或采用常量直接蒸馏式或半微量水蒸气蒸馏式凯氏蒸馏装置蒸馏、滴定。6.6仪器参考条件设定硼酸吸收滴定模式，加20mL水、70L氢氧化钠溶液，加50mL硼酸溶液，蒸馏滴定总时间220s,150s后开始滴定，输入滴定标准盐酸溶液浓度。7结果计算水溶性蛋白含量用质量分数w表示，单位以百分数(%)计，按式(2)计算：2