NY 82.13-1988 果汁测定方法 脯氨酸的测定.pdf

NY 82.131988 中华人民共和国农牧渔业部部标准中华人民共和国农牧渔业部部标准 果汁测定方法果汁测定方法 脯氨酸的测定脯氨酸的测定 NY 82.131988 本标准等同采用国际果汁联盟本标准等同采用国际果汁联盟 IFJU 分析法。No.49（1983）脯氨酸的测定。分析法。No.49（1983）脯氨酸的测定。1 原理原理 脯氨酸与水合茚三酮作用，生成有色络合物。用乙酸正丁酯提取，并在波长脯氨酸与水合茚三酮作用，生成有色络合物。用乙酸正丁酯提取，并在波长 509nm 范围内进行比色测定。范围内进行比色测定。2 试剂试剂 2 1 水合茚三酮（水合茚三酮（HG 39841976，分析纯）的乙二醇甲基醚溶液：，分析纯）的乙二醇甲基醚溶液：3g/100mL。22 醋酸正丁酯：分析纯。醋酸正丁酯：分析纯。23 甲酸（甲酸（HB 20931980）：分析纯，）：分析纯，98100%溶液。溶液。24 无水硫酸钠（无水硫酸钠（GB 6391977）：分析纯。）：分析纯。25 L脯氨酸：脯氨酸：100mg/L。3 仪器仪器 31 分光光度计。分光光度计。32 水浴。水浴。33 具塞试管：具塞试管：25mL。34 滤纸。滤纸。35 玻璃漏斗：玻璃漏斗：6.5cm。36 实验室用自动定时器。实验室用自动定时器。4 测定程序测定程序 41 样品的制备样品的制备 脯氨酸含量大于脯氨酸含量大于 50mg/L 的样品应稀释。的样品应稀释。50499mg/L 稀释稀释 10 倍；倍；5001000mg/L 稀释稀释 20 倍；倍；小于小于 50mg/L 稀释稀释 2 倍或倍或 5 倍。倍。42 标准曲线的绘制标准曲线的绘制 将将 100mg/L 的脯氨酸溶液，稀释到浓度为的脯氨酸溶液，稀释到浓度为 3、5、10、25、40、50、60mg/L。取上述溶液各。取上述溶液各 1mL，按，按 4.3 程序测定吸光值。以吸光值为纵坐标，以脯氨酸浓度（程序测定吸光值。以吸光值为纵坐标，以脯氨酸浓度（mg/L）为横坐标，绘制标准曲线。）为横坐标，绘制标准曲线。43 测定测定 431 取取 1.0mL 试液于具塞试管中，加入试液于具塞试管中，加入 1mL 甲酸；甲酸；2mL 水合茚三酮溶液。摇匀。置于沸水浴中水合茚三酮溶液。摇匀。置于沸水浴中 15min（水浴的液面要高于试管中的液面）。放在（水浴的液面要高于试管中的液面）。放在 20水中冷却水中冷却 510min。432 在试管中加入在试管中加入 10mL 乙酸正丁酯，盖好塞子。充分摇动，使有色溶液提取到有机液层。乙酸正丁酯，盖好塞子。充分摇动，使有色溶液提取到有机液层。4 3 3 溶液全部倾入到盛有一满勺无水硫酸钠的滤纸上。溶液全部倾入到盛有一满勺无水硫酸钠的滤纸上。15min 后，在后，在 509nm波长处，用波长处，用 1cm 比色皿，测定滤液的吸光值。比色皿，测定滤液的吸光值。中华人民共和国农牧渔业部 19880127 发布 19880801 实施 中华人民共和国农牧渔业部 19880127 发布 19880801 实施 NY 82.131988 44 空白试验空白试验 空白试验中不加水合茚三酮，其他条件和测定程序与空白试验中不加水合茚三酮，其他条件和测定程序与 4.3 相同。相同。5 结果的表示和计算结果的表示和计算 脯氨酸含量可以直接由标准曲线得到。用脯氨酸含量可以直接由标准曲线得到。用 mg/L 表示，保留两位小数。表示，保留两位小数。原来样品稀释的倍数，在计算中必须考虑。原来样品稀释的倍数，在计算中必须考虑。附加说明：附加说明：本标准由北京农业工程大学负责起草。本标准由北京农业工程大学负责起草。本标准主要起草人：张坤英。本标准主要起草人：张坤英。中华人民共和国农牧渔业部 19880127 发布 19880801 实施 中华人民共和国农牧渔业部 19880127 发布 19880801 实施