SN 0595-1996 出口粮谷中赤霉烯酮检验方法.pdf

SN中华人民共和国进出口商品检验行业标准s N 0 5 9 5 一 1 9 9 6出口粮谷中赤霉烯酮检验方法Me t h o d f o r t h e d e t e r m i n a t i o n o f z e a r a l e n o n e i n c e r e a l s f o r e x p o r t1 9 9 6 一 1 1 一 1 5 发布1 9 9 7 一 0 5 一 0 1 实施中华人民共和国国家进出口商品检验局发 布S N 059 5一 199 6前言 本标 准是根据G B/T 1.1-1 9 9 3 标准化工作导则 第1 单元:标准的起草与表述规则 第1 部分:标准编写的基本规定 及S N/T 0 0 0 1-1 9 9 5 出口 商品中 农药、兽药残留量及生物毒素检验方法标准编写的基本规定 的要求进行编写的。其中测定方法是参考国内外有关文献，经研究、改进和验证后而制定的。本标准同时制定了抽样和制样方法。测定低限是根据国际上对粮谷中赤霉烯酮残留量的最高限量和测定方法的灵敏度而制定的。本标准的附录 A是提示的附录。本标准由中华人民共和国国家进出口商品检验局提出并归口。本标准起草单位:中华人民共和国辽宁进出口商品检验局和中国科学院大连化学物理研究所。本标准主要起草人:随凯、张军、田苗、林乐明、宋文斌。本标准系首次发布的行业标准。中华人民共和国进出口 商品检验行业标准出口粮谷中赤霉烯酮检验方法S N 0 5 9 5 一 1 9 9 6Me t h o d f o r t h e d e t e r mi n a t i o n o f z e a r a l e n o n e i n c e r e a l s f o r e x p o r t范围本标准规定了出口粮谷中赤霉烯酮检验的抽样、制样和薄层色谱测定方法。本标准适用于出口玉米中赤霉烯酮的检验。抽样和制样2.1 检验批 散积玉米以不超过2 0 0 t 为一 检验批;袋装玉米(每 袋约9 0 k g)以 约2 2 0 0 袋为 一检验批。同一检验批的商品应具有相同的特征，如包装、标 记、产地、规格 和等级等。2.2 抽样数量2.2 门袋装货品 按式(1)计算抽样袋数:a=丫入 厂 (1)式中:N全批袋数;a 抽 样 袋数。注:a值取整数 小数部分向前进位为整数.2.2.2 散积货品 货堆高度不超过2m。按货堆面积划区设点。以 5 0 m 2 为一个取样区，每区设中心及四角(距边线l m处)5 个点。每增加一个取样区，增设 3 个点。2.3 抽样工具2.3.1 金属双套管取样器:全长分1 m,2 m(均包括手柄)两种。内、外管同 部位分段开几个槽口，每个槽口长 1 5 -2 0 c m，口宽 2.0 2.5 c m。内管的内径为 2.5 3.0 c m;取样器的探头长约7 c m,2.3.2 取样铲。2.3.3 分样板。2.3.4 盛样器:筒或袋，可密封。2.3.5 分样布或适用铺垫物。2.4 抽样方法2.4.1 袋装抽样2.4.1.1 倒包抽样:从堆垛的各部位随机抽取 2.2.1规定的应抽样袋数的 1 0 0 0(每批一般不少于 3袋)，将袋口缝线全部拆开，平置于分样布或其他洁净的铺垫物上，双手紧握袋底两角，提起约成 4 5 0 倾角，倒拖约1 m，使袋内货物全部倒出。查 看袋内和袋间品质 是否均匀，确认情况正常后，用取样铲随 机在各部位抽取样品，并立即将样品倒入盛样器内。每袋抽取样品的量应基本一致。2.4.1.2 袋内抽样:按 2.2.1 规定的应抽样袋数(扣除倒包抽样袋数)，在堆垛四周上、中、下各层以曲中华人民共 和国国家 进出口商品 检验局1 9 9 6-1 1 一 1 5 批准1 9 9 7-0 5-0 1 实施 IS N 059 5一 19 96线形走向随机抽取。然后用下述方法进行取样:用1 m长的金属双套管取样器(2.3.1)，关闭槽口，从每袋一角依斜对角 方向插入袋内，然后旋转内 管以开启槽口，待样品流满内 管后，再旋转内管以 关闭槽口。抽出取样器，立即将样品倒人盛样器内。每袋所取样品的量应与2.4.1.1 基本一 致。每批所抽取的样品总量应不少于4 k g,2.4.2 散积抽样:按 2.2.2 规定的取祥点，逐点抽取样品。将取样器(2.3.1)槽口关闭，以倾斜 4 5 0 角度插入货堆至相应深度，旋转取样器内管以开启槽口，待样品流满内管后，再旋转内管以关闭槽口。抽出取样器，立即将样品倒入盛样器内。从各点所抽取的样品量应基本一致。每批所抽取的样品总量应不少于4 k g。2.4.3 大样缩分2.4.3.1 袋装样品:合并从袋内和倒包抽样所取全部样品，倒于分样布上，用分样板按四分法缩分样品至不少于2 k g，盛于盛样器内，加封后标明标记，并及时送交实验室。2.4-3.2 散积样品:将抽取的全部样品倒于分样布上，以下按上述袋装样品方法进行。2.5 试样制备 将样品按四分法缩分至1 k g，全部磨碎并通过2 0 目 筛。混匀，均分成两份作为试样，分装入洁净的盛样器内，密封，标明标记。26 试样保存 试样于一5 以下避光保存。注:在抽样和制样的操作过程中，必须防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。测定方法3.1 方法提要 试样中赤霉烯酮用乙睛和氯化钾溶液提取，提取液经用异辛烷脱脂、无水硫酸钠柱脱水、浓缩近干。残渣用三氯甲 烷溶解，溶液经硅胶柱净化，然后进行薄层板分离，用薄层扫描仪测定，外标法定量。3.2 试剂和材料 所用试剂除注明外均为分析纯，水为蒸馏水。3.2.，三氯甲烷。3.2.2 氯化钾。3.2.3 盐酸溶液:。.1 m o l/L,3.2.4 乙睛。3.2.5 异辛烷。3.2.6 丙酮。3.2.7 苯。3.2.8 乙酸。3.2.9 展开剂:三氯甲烷一 丙酮一 苯一 乙酸(1 8+2+a+1),3.2.1 0 无水硫酸钠:6 5 0 灼烧 4 h，冷却后贮于干燥器中备用。3.2.1 1 硅胶:1 0 0-2 0 0目，青岛海洋化工厂产或等效产品。用前在 1 1 0 C烘 1 h，按 2%(m/m)比例加入蒸馏水，密封，振荡 5 h，平衡过夜备用。3.2.1 2 薄层板:薄 层层 析用硅胶G板，1 0 0 m m X 2 0 0 m m，层厚。.2 0-0.2 5 m m，上海信谊仪器厂产或等效产品，用甲 醇展 洗薄层板后，吹干，在 1 2 0 活化1 h 后，置于干燥器内 备用。3.2.1 3 氯化钾溶液:取4 g 氯化 钾加9 6 m L O.1 m o l/L 盐酸溶液，混匀。3.2.1 4 赤霉烯酮标准品:纯度)9 9%.3.2.1 5 赤霉烯酮标准溶液:准确 称取适量的赤 霉烯酮标准品，用三氯甲 烷配制成0.1 3 m g/m L浓度的标准储备液。根据需要再用三氯甲烷配成适当浓度的标准工作液。zs N 0 595 一 199 6 注:避光于一5 以下储存。3.3 仪器与设备3.3.，粉碎机。3.3.2 抽滤漏斗:9 0 m m(内径)。3.3.3 振荡器。3.3.4 旋转蒸发器:配有 2 0 0 mL心形瓶。3.3.5 恒温水浴锅。3.3.6 无水硫酸钠柱:筒形漏斗，2 2 mm(内径)，内装 5 c m高的无水硫酸钠。3.3.7 分液漏 斗:2 5 0 m L.3.3.8 锥形瓶:具塞，5 0 0 m L,3.3.9 抽滤瓶:2 5 0 m L,3.3.1 0 样品管:具磨口塞，棕色，5 m L,3.3.1 1 硅胶净化柱:2 5 0 mm X 1 0 mm(内径)玻璃柱，装入 6 g硅胶。3.3.1 2 刻度移液管:5 0 m L,l m L(精确至0.0 1 m L),3.3.1 3 层析槽:2 5 0 m m X 1 5 0 m m X 5 0 mm(立式，具磨口)。3.3.1 4 自 动点样仪:1-9 9 p L,3.3.1 5 薄层色谱扫描仪:配 有H g 灯光源。3.4 测定步骤3.4.1 提取 称取约5 0 g 试样(精确至。.1 g),置于锥形瓶中，加1 8 0 m L乙睛和2 0 m L氯化钾溶液(3.2.1 3),振荡 3 0 min后，用抽滤漏斗过滤，经 3 X2 0 mL乙睛洗涤残渣，合并滤液于 2 5 0 mL容量瓶，定容至2 5 0 m L，取滤液 5 0 mL,置 2 5 0 mL分液漏斗中，加 7 0 mL异辛烷。振摇 2 m i n后，静置 1 5 m i n使分层。弃去异辛烷层。用 2 X6 0 mL异辛烷重复两次。收集乙睛层，过无水硫酸钠柱(3.2.6)到心形瓶中，于5 0 水浴中浓缩近干。用 1 ml，三氯甲烷溶解残留物。3.4.2 净化 将 3.4.1 中提取所得溶液置于硅胶净化柱(3.3.1 1)中，用 2 X0.5 m L三氯甲烷洗涤心形瓶并倒入上述柱中。注入 5 0 6 0 ml三氯甲烷一 丙酮(8+2)混合液进行洗脱(流速为每秒 1-2 滴)，收集前 3 0 mL洗脱液于心形瓶中。于 5 0 水浴中浓缩至约 2 m L，定量转移至样品管中，继续浓缩至干。准确加入。5 0 mL 三氯甲烷使溶液供测定。3.4.3 测定3.4.3.1 薄层扫描条件 a)光源:高压汞 灯;b)激发波长:3 1 3 n m;发 射波长:4 0 0 n m;c)激发狭缝与发射狭缝:可根据斑点大小进行调节;d)检测方式:反射荧光;e)扫描速度:2 0 mm/mi n;f)扫描方式:直线式。3.4-3.2 薄层色谱测定 根据样液中赤霉烯酮含量情况，选定峰面积相近的标准工作溶液。标准工作溶液和样液中赤霉烯酮响应值均应在仪器检测线性范围内。取等体积的标准工作溶液和样液在薄层板距下端 1.5-2 c m基线上，用薄层色谱点样仪参插点样，每点间隔可根据点样范围来确定。将薄层板放入用三氯甲烷一 丙酮一 苯一 乙酸(1 8+2+8+1)预饱和的层析槽中展开，至前沿达约s x 05 95 一 1 9961 8 0 m m时，取出吹干。按薄层扫描条件进行测定。标准品薄层色谱扫描图，见附录 A中图A1,3.4.4 空白试验 除不加试样外，按上述测定步骤进行。3.4.5 结果计算和表述 用色谱数据处理器或按式(2)计算。A,.m(z)式中:X 试样中 赤霉烯酮的含量，m g/k g;A样液斑点峰面积的积分单位;人标准工作液斑点峰面积的积分单位;c 标准工作溶液中 赤霉烯酮的浓度，p g/m L;V 最终样液的体积,mL;m 最终样液所相当 的试样量+g=注:计算结果需扣除空白值4 方法的测定低限、回收率4.1 测定低限 本方法的 测定低限为。.1 m g/k g,4.2 回收率 回收率的实验数据:赤霉 烯酮添加 浓度在。.1 m g/k g 时，回 收率为9 3.9 0 0;赤霉 烯酮添加 浓度在1.0 m g/k g 时，回 收率为9 3.8%;赤霉烯酮添加浓度在2.0 m g/k g 时，回 收率为9 3.9%.s N 0 5 9 5 一 1 9 9 6 附录A (提示的附录)标准品薄层色谱扫描图V1 002 00图 A 1 赤霉烯酮标准品薄层色谱扫描图S N 0 5 9 5 一1 9 9 6Fo r e wo r d T h i s s t a r d a r d w a s d r a f t e d i n a c c o r d a n c e w i t h t h e r e q u i r e m e n t s o f G B/T 1.1-1 9 9 3 D i r e c t i v e s f o rt h e wo r k o f s t a n d a r d i z a t i o n-Un i t 1:D r a f t i n g a n d p r e s e n t a t i o n o f s t a n d a r d s-P a r t 1:G e n e r a l r u l e s f o rd r a f t i n g s t a n d a r