SCT 3029-2006 水产品中甲基睾酮残留量的测定 液相色谱法.pdf

SC/T3029-2006前言本标准附录A为资料性附录。本标准由中华人民共和国农业部提出。本标准由全国水产标准化技术委员会水产品加工分技术委员会归口。本标准起草单位：中国海洋大学、国家水产品质量监督检验中心。本标准主要起草人：林洪、江洁、李兆新、曹立民、付晓婷。SC/T3029-20065.9具塞玻璃离心管：10mL。5.10离心管：50mL。5.11聚四氟乙烯膜：孔径0.45m。6操作方法6.1样品处理取水产品可食部分，切为不大于0.5cm0.5cm0.5cm的小块后混匀，充分匀浆，取5.00g(精确到0.01g)于50mL烧杯中。6.2分离纯化6.2.1提取向烧杯中加入15mL乙醚，磁力搅拌15min,转移至50mL离心管中，用5mL乙醚洗净烧杯，合并至离心管，5000r/min离心10min,所得上清液转移至鸡心瓶；残渣用15mL乙醚按上述方法再提取一次，所得上清液合并至鸡心瓶，在40左右水浴条件下减压旋转蒸发至干，残渣中加人5L甲醇溶液清洗瓶壁，溶液转移至10mL具塞玻璃离心管中。6.2.2纯化加人4mL的石油醚至上述离心管中，加塞剧烈振荡1min2min,4000r/min离心10min,用滴管吸弃上层石油醚层；下层加入4mL的石油醚按上述方法再洗涤一次。下层甲醇溶液在40左右水浴条件下减压旋转蒸发至约0.5mL,转移至10mL具塞离心管。加人2mL水清洗瓶壁，合并水溶液，加入4mL的乙醚，震荡1min2min,混匀，4000rmin离心10min,吸取上层乙醚层于鸡心瓶中；下层用4L乙醚再提取一遍，吸取上层，合并至鸡心瓶中。在40左右水浴条件下减压旋转蒸发至干，准确加人1mL流动相溶解残渣。经聚四氟乙烯膜过滤，待上机分析。6.3测定6.3.1测定条件6.3.1.1色谱柱：C18柱，250mm4.6mm,柱填料粒径5m;或相当者。6.3.1.2流动相：甲醇：水=7030：流速：0.8ml/min。6.3.1.3柱温：30。6.3.1.4进样量：20L6.3.1.5检测波长：254nm6.3.2色谱分析分别注入20L浓度为1gL标准工作溶液和样品提取溶液于液相色谱仪中，按上述色谱条件进行色谱分析，记录峰面积，响应值均应在仪器检测的线性范围之内。根据标准样品的保留时间定性，外标法定量。标准品色谱图见附录A。7结果7.1计算样品中甲基睾酮的含量按公式(1)计算。X=AXCsV1000*(1）AsX m式中：X一样品中甲基睾酮含量，单位为微克每千克(gkg);Cs-标准溶液中甲基睾酮含量，单位为微克每毫升(gL);