ICS65.020.30B43DB22吉林省地方标准DB22/T2394—2015猪诱导多潜能干细胞（iPSCs）的制备和鉴定Regulationofpreparationandidentificationofinducedpluripotentstemcellsfrompigs2015-12-15发布2016-01-25实施吉林省质量技术监督局发布DB22/T2394—2015I前言本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。本标准由吉林省标准研究院提出。本标准由吉林省畜牧业管理局归口。本标准起草单位：吉林省标准研究院。本标准主要起草人：赵慧明、张学明、李子义、唐博、崔娜娜、王琪、杨磊。DB22/T2394—20151猪诱导多潜能干细胞（iPSCs）的制备和鉴定1范围本标准规定了源于猪胎儿成纤维细胞的猪诱导多潜能干细胞（iPSCs）的工作区条件、主要仪器设备、清洗与消毒、试剂及液体配制、猪iPSCs的制备、警示、标签及其他要求。本标准适用于猪iPSCs在畜牧业生产实践、基础医学研究和临床医疗等方面的应用。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法GB/T15562.2环境保护图形标志固体废物贮存（处置）场GB/T24863畜禽细胞体外培养与冷冻保存技术规程HG/T3935哺乳类动物细胞培养基NY/T1900畜禽细胞与胚胎冷冻保种技术规范SN/T2330化妆品胚胎和发育毒性的小鼠胚胎干细胞试验3术语与定义下列术语和定义适用于本文件。3.1诱导多潜能干细胞inducedpluripotentstemcells(iPSCs)通过转染特定的转录因子（如经典的胚胎特异性转录因子Oct4、Sox2、Klf4、c-Myc4组合），从已分化体细胞（如成纤维细胞）重编程而获得的多潜能干细胞。3.2猪胎儿成纤维细胞porcinefetalfibroblast(PFF)从妊娠25-30天猪胎儿中，去头、尾、四肢、骨骼、内脏后，消化分离获得的有良好增殖能力的细胞。3.3饲养层细胞feederlayercell将动物胎儿成纤维细胞经丝裂霉素C处理后，失去分裂增殖能力的活细胞。3.4拟胚体embryoidbody釆用悬滴法培养，将干细胞或iPSCs克隆消化成单细胞，检测其体外发育分化能力的方法。3.5畸胎瘤teratomaDB22/T2394—20152采用皮下注射法，将干细胞或iPSCs注射到免疫缺陷鼠皮下组织中，在SPF级条件下饲养，被注射细胞在体内形成的含三胚层组织结构的瘤体组织。4工作区条件4.1工作区域一般由准备室、缓冲间、无菌室、细胞保存室、SPF实验动物饲养设施等组成，内部设备条件按照GB/T24863和SN/T2330执行。...
