DB22T 1811-2013 食品中亚硫酸盐的测定 离子色谱法.pdf

ICS 67.220.20 X 42 备案号：37469-2013 DB22 吉林省地方标准 DB 22/T 18112013 食品中亚硫酸盐的测定 离子色谱法 Determination of sulphite in foods Ion chromatography method 2013-04-08 发布 2013-07-01 实施吉林省质量技术监督局 发 布 DB22/T 18112013 I 前 言 本标准按照 GB/T 1.1-2009和GB/T 20001.4-2001给出的规则起草。本标准由吉林省食品药品监督管理局提出并归口。本标准起草单位：吉林省食品药品检验所。本标准主要起草人：方玉林、赵雪梅、南劲松、逄焕欢。DB22/T 18112013 1 食品中亚硫酸盐的测定 离子色谱法 警告使用本标准的人员应有正规实验室工作的实践经验。本标准并未指出所有可能的安全问题。使用者有责任采取适当的安全和健康措施，并保证符合国家有关法规规定的条件。1 范围范围 本标准规定了食品中亚硫酸盐的测定方法。本标准适用于食品中亚硫酸盐的测定。2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 3 方法原理 试料经水提取，再经过反相柱净化，以氢氧化钾溶液为淋洗液，经阴离子交换柱分离，离子色谱法（电导检测器）测定，外标法定量。4 试剂与材料 除非另有说明，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T 6682规定的一级水。4.1 超纯水：电阻率18.2 Mcm。4.2 甲醛（CH2O）：分析纯（含量 36%40%，CAS 号：50000）。4.3 甲醛溶液（0.15 g/L）：吸取 0.4 mL 无聚合沉淀的甲醛（4.2）至 1000 mL容量瓶中，加超纯水（4.1）稀释至刻度，混匀。4.4 氢氧化钾（KOH）：分析纯（含量不少于 85.0%，CAS 号：1310-58-3）。4.5 亚硫酸根离子标准储备液（以 SO2计）（1000 mg/L,甲醛溶液（4.3）为基体）：精密称取 1.6260g亚硫酸氢钠NaHSO3，含量（以 SO2计）：58.5-65.0%，CAS 号：7631905于 1000mL容量瓶中，用甲醛溶液（4.3）溶解并定容至刻度，摇匀，4冰箱储藏。临用时用硫代硫酸钠Na2S2SO35H2O，含量99.0%，CAS 号：7772-98-7标准溶液标定亚硫酸根离子（以 SO2计）的含量。4.6 吸取 10.0 mL亚硫酸氢钠溶液于 250 mL碘量瓶中，准确加入 20.00 mL 碘标准滴定溶液（0.050 mol/L），摇匀，放置 5 min。加 20%盐酸溶液 2 mL，用硫代硫酸钠标准滴定溶液（0.100 mol/L）滴定，近终点时，加 10 g/L淀粉指示液 0.5 mL，继续滴定至溶液蓝色消失。按同一方法做试剂空白试验。DB22/T 18112013 2 亚硫酸根离子标准溶液（以 SO2计）的浓度按式（1）进行计算。1003.32)(12=cVVX.(1)式中：X亚硫酸根离子标准溶液（以SO2计）浓度，单位为毫克每毫升（mg/mL）；1V测定用亚硫酸氢钠溶液消耗硫代硫酸钠标准溶液体积，单位为毫升（mL）；2V试剂空白消耗硫代硫酸钠标准溶液体积，单位为毫升（mL）；c硫代硫酸钠标准溶液的摩尔浓度，单位摩尔每升（mol/L）；32.03每毫升硫代硫酸钠标准溶液相当于二氧化硫的质量，单位为毫克（mg）。亚硫酸根离子标准使用液（以SO2计）：准确移取亚硫酸根离子标准溶液（4.5）1 mL于100 mL容量瓶中，用甲醛溶液（4.3）稀释至刻度，此溶液每1 L含亚硫酸根离子（以SO2计）10 mg。5 仪器 5.1 离子色谱仪：包括电导检测器，配有抑制器，阴离子交换柱，200 L定量环。5.2 天平：感量 0.1 mg 和 1 mg。5.3 粉碎机。5.4 自动匀浆机。5.5 超声波清洗器。5.6 离心机：转速10 000 r/min。配有 50 mL 离心管。5.7 净化柱：包括反相（RP）柱，Ag 柱和 Na 柱或等效柱。5.8 滤膜：0.22 m，水相。5.9 注射器，5 mL或 10 mL。注：所有玻璃器皿使用前均需依次使用2 mol/L氢氧化钾溶液和水分别浸泡4 h，然后用超纯水冲洗3次5次，晾干备用。6 试样制备 6.1 试样预处理 6.1.1 新鲜蔬菜、水果及其罐头制品：如有需要，可将样品用干净纱布擦去样本表面的附着物，取可食部切碎混匀，用四分法取适量，用粉碎机制成匀浆备用。如需加水应记录加水量。6.1.2 肉类、水产及其制品：用四分法取适量或取全部，用粉碎机制成匀浆备用。6.1.3 水溶性固体试样（如白砂糖、淀粉等）：将试样装入能容纳两倍试样体积的带盖容器中，通过反复摇晃和颠倒容器使样品充分混匀直到使试样均一化。DB22/T 18112013 3 6.1.4 水不溶性固体试样（坚果、果脯、干制蔬菜、肉类等）：用四分法取适量或取全部，用粉碎机粉碎、混匀后备用。6.2 提取 6.2.1 液体试样（如葡萄酒、饮料等）：称取约 2.5 g 试料，精确至 0.01 g，置于 50 mL 容量瓶中，加甲醛溶液（4.3）混匀并定容至刻度。超声提取 30 min，上清液备用。6.2.2 水溶性固体试样（如白砂糖、淀粉等）：称取约 2.5 g 试料，精确至 0.01 g，置于 50 mL 容量瓶中，加甲醛溶液（4.3）适量，振荡溶解后，加甲醛溶液定容至刻度。超声提取 30 min，溶液经滤纸过滤，上清液备用。6.2.3 蔬菜、水果及其罐头制品、肉类、水产及其制品：称取试样匀浆约 2.5 g，精确至 0.01 g，置于50 mL 容量瓶中，加甲醛溶液（4.3）适量，振荡后定容至刻度。超声提取 30 min，溶液经滤纸过滤，取部分溶液于 10 000 r/min 离心 10 min，上清液备用。6.2.4 水不溶性固体试样（坚果、果脯、干制蔬菜、肉类等）：称取粉碎后试样约 2.5 g，精确至 0.01 g，置于 100 mL 锥形瓶中，精确加入甲醛溶液（4.3）50 mL，超声提取 30 min，每 5 min 振摇一次，保持固相完全分散。溶液经滤纸过滤，取部分溶液于 10 000 r/min 离心 10 min，上清液备用。6.3 净化 取上述备用的上清液约 15 mL，通过 0.22 m 水性滤膜、RP 柱，弃去前面的 5 mL(如果样品中氯离子大于 100 mg/L，则需要依次通过 0.22 m 水性滤膜、RP 柱、Ag 柱和 Na 柱，弃去前面 7 mL)，收集后面洗脱液待测。注：固相萃取柱使用前需进行活化，如使用RP柱（1.0 mL）、Ag柱（1.0 mL）和Na柱（1.0 mL），其活化过程为：RP柱（1.0 mL）使用前依次用10 mL甲醇、15 mL水通过，静置活化30 min。柱（1.0 mL）和Na柱（1.0 mL）使用前用10 mL水通过，静置活化30 min。7 分析步骤 7.1 色谱参考条件 7.1.1 色谱柱：氢氧化物选择性，可兼容梯度洗脱的阴离子交换柱，如 AS 11-HC 阴离子交换色谱柱4250 mm（带 AG 11-HC 阴离子交换保护柱 450 mm）；柱温 30。7.1.2 淋洗液：氢氧化钾溶液，浓度为 11 mmol/L-50 mmol/L；洗脱梯度为 11 mmol/L 25 min，50 mmol/L15 min，11 mmol/L 10 min；流速：1 mL/min。7.1.3 抑制器：阴离子抑制器，抑制电流 100 mA。7.1.4 检测器：电导检测器，检测池温度 35。7.1.5 进样体积：200 L（可根据试样中被测离子含量进行调整）。7.2 测定 7.2.1 标准系列溶液的配制 DB22/T 18112013 4 精密移取亚硫酸根离子（以SO2计）标准使用液0 mL、2.5 mL、5.0 mL、10.0 mL、20.0 mL、50.0 mL于100 mL容量瓶中，加甲醛溶液（4.3）稀释，制成系列标准溶液，含亚硫酸根离子（以SO2计）浓度为0.00 mg/L、0.25 mg/L、0.50 mg/L、1.00 mg/L、2.00 mg/L、5.00 mg/L的标准溶液；从低到高浓度依次进样。得到上述浓度标准溶液的色谱图。以亚硫酸根离子（以SO2计）的浓度（mg/L）为横坐标，以峰高（S）或峰面积为纵坐标，绘制标准曲线或计算线性回归方程。7.2.2 试样的测定 吸取试样溶液，注入离子色谱仪中，记录色谱图，测定。7.2.3 平行试验 按以上步骤，对同一试样进行平行试验测定。7.2.4 空白试验 除不称取试样外，均按上述步骤进行。8 结果的计算与表述 结果按式(2)计算：mfVCCX=)0(.(2)式中：X试样中亚硫酸根离子的含量（以SO2计），单位为毫克每千克（mg/kg）；C测定用试样溶液中亚硫酸根离子的浓度（以SO2计），单位为毫克每升（mg/L）；0C试剂空白溶液中亚硫酸根离子的浓度（以SO2计），单位为毫克每升（mg/L）；V试样定容体积，单位为毫升（mL）；f试样溶液稀释倍数；m样品称取量，单位为克（g）。以重复条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示，结果保留2位有效数字。9 精密度 在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不得超过算术平均值的10%。10 线性范围和定量限 本方法线性范围为0.25 mg/L至5.0 mg/L。取样量2.5 g，定量限为5 mg/kg。DB22/T 18112013 5 A A 附 录 A（资料性附录）亚硫酸根离子的色谱图 A.1 亚硫酸根离子的色谱图 图A.1 亚硫酸根离子的色谱图 注：图中亚硫酸根离子（以SO2计）浓度为5 mg/L，保留时间为22.88 min。_