DB22T 1583-2012 黑木耳枝条菌种生产技术规程.pdf

ICS 67.080.20 B 31 备案号：35057-2012 DB22 吉林省地方标准 DB 22/T 15832012 黑木耳枝条菌种生产技术规程 Technical regulations of branches strains of Auricularia auricula 2012-09-15 发布 2012-10-31 实施吉林省质量技术监督局 发 布 本标准仅供内部使用 不得翻印本标准仅供内部使用 不得翻印本标准仅供内部使用 不得翻印本标准仅供内部使用 不得翻印本标准仅供内部使用 不得翻印本标准仅供内部使用 不得翻印本标准仅供内部使用 不得翻印本标准仅供内部使用 不得翻印DB22/T 15832012 I 前 言 本标准按照GB/T 1.1-2009 给出的规则起草。本标准由吉林省林业厅提出并归口。本标准起草单位：吉林省林业科学研究院、吉林农业大学、九台市怡景园林绿化公司、吉林省白河林业局。本标准主要起草人：付晓霞、刘晓龙、刘桂英、李继平、姚瑞、王广发。本标准仅供内部使用 不得翻印本标准仅供内部使用 不得翻印本标准仅供内部使用 不得翻印本标准仅供内部使用 不得翻印本标准仅供内部使用 不得翻印本标准仅供内部使用 不得翻印本标准仅供内部使用 不得翻印本标准仅供内部使用 不得翻印DB22/T 15832012 1 黑木耳枝条菌种生产技术规程 1 范围 本标准规定了黑木耳枝条菌种生产场地、厂房设置和布局、设备设施、使用品种、生产工艺流程、技术要求和贮存运输要求。本标准适用于黑木耳原种生产。2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T 191 包装储运图示标志 GB 4789.28 食品卫生微生物学检验 染色法培养基和试剂 GB 9688 食品包装用聚丙烯成型品卫生标准 NY/T 1742-2009 食用菌菌种通用技术要求 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。3.1 枝条菌种 branches strains 利用硬杂木短木条作为原材料，经过处理并添加其它辅料后进行高压灭菌、冷却接种、恒温培养生产的菌种。4 技术要求 4.1 技术人员 菌种厂应有与固体菌种生产所需的相对应专业技术人员，专业技术人员应具有两年以上菌种生产经验。4.2 场地选择 地势平坦、高燥，通风良好，排水畅通，交通便利；周边300 m之内无禽畜舍，无垃圾场，无污水和其他污染源，100 m内无食用菌栽培场。4.3 厂房与设施 有晾晒场、原料库、配料室、灭菌室、冷却室、接种室、培养室、贮藏室、检验室等，厂房建造从结构和功能上能满足黑木耳枝条菌种生产的基本需要。4.3.1 晾晒场 本标准仅供内部使用 不得翻印本标准仅供内部使用 不得翻印本标准仅供内部使用 不得翻印本标准仅供内部使用 不得翻印DB22/T 15832012 2 要求地势平坦高燥、通风良好、光照充足、空旷宽阔。4.3.2 原料库 要求通风干燥、防雨防晒防鼠，并远离火源。4.3.3 配料室 要求在室内，有水源和电源；如在室外还应有天棚，要防雨防晒防鼠。并配有蓄水池、天平、磅秤、搅拌机和分装设备等。4.3.4 灭菌室 要求水电方便，通风良好，并配备高压灭菌设备等。4.3.5 冷却室 清洁、防尘，易散热，并配备排风扇等降温除湿设备。4.3.6 接种室 设置缓冲间，防尘换气性好，墙内壁和屋顶光滑。接种室安装空调设备，并配备接种箱或超净工作台等无菌操作设备及常规接种工具。4.3.7 培养室和贮藏室 培养室安装通风设备，墙内壁和屋顶光滑。培养室和贮藏室利于控温保温。并配备恒温培养箱、培养架和保藏冰箱等设备。4.3.8 菌种检验室 水电方便，检验设备和仪器齐备。4.3.9 厂房布局 按照食用菌固体菌种生产工艺流程合理安排布局。4.4 使用品种 4.4.1 品种 从具有相应技术资质的供种单位引进，种性清楚，并经省级以上农作物品种审定委员会审定的品种。4.4.2 种源质量检验 菌种生产单位每年在种源扩大生产前应进行菌种质量和种性检验，包括纯度、活力、菌丝长势的一致性、菌丝生长速度、菌落外观等，并做出耳试验，验证种性。种源出耳试验方法及种源质量要求应符合NY/T 1742-2009中5.4的规定。4.4.3 移植扩大 母种仅用于移植扩大原种，一支母种移植扩大原种不超过 6瓶（袋）；原种只能用于栽培。4.5 工艺流程 本标准仅供内部使用 不得翻印本标准仅供内部使用 不得翻印本标准仅供内部使用 不得翻印本标准仅供内部使用 不得翻印DB22/T 15832012 3 准备枝条浸泡装袋（瓶）灭菌灭菌效果检查冷却接种菌丝培养检查成品入库 4.6 生产过程中的技术要求 4.6.1 原种容器 每批次菌种容器规格要一致。可以使用850 ml以下、耐 126高温、无色或近无色、瓶口直径小于4 cm的近透明塑料瓶，或（1517）cm（28 33）cm规格、耐126高温的塑料袋，并符合GB 9688的规定。塑料袋应使用棉塞或无棉塑料盖封袋口。4.6.2 培养原料 化学试剂类原料如硫酸镁、磷酸二氢钾等要使用化学纯级试剂；天然材料如枝条，木屑，麦麸、米糠等要新鲜、无虫螨、无霉变，洁净干燥。4.6.3 枝条准备 根据当地原料资源使用适宜的培养基配方（见附录A.1和A.2），严格掌握常规培养基的含水量和pH值。选择适宜黑木耳生长的桦树、柞树、紫穗槐树、桑树等硬杂木枝条做原料，要求枝条直径4 mm 7 mm，并截成15 cm 18 cm长。也可选用这些树种生产的方便筷。4.6.4 枝条处理 先将枝条或方便筷放在营养液中煮1 h，然后在营养液中浸泡12 h，浸泡后捞出沥干。营养液配方为马铃薯200 g、蔗糖20 g、硫酸镁0.5 g、磷酸二氢钾0.5 g。马铃薯煮汁过滤后，添加配方中其它物质后加水至1000 ml。4.6.5 装袋（瓶）先在袋（瓶）底放一层常规培养料（见附录A.3），然后将枝条直立装入袋（瓶）内，要求枝条松紧适度，在最上层再撒一层常规培养料后封好袋（瓶）口。4.6.6 灭菌 装袋（瓶）封好袋（瓶）口后在4 h内必须灭菌，高压灭菌0.12 Mpa 0.15 Mpa保持2 h。灭菌完毕后自然降压，不应强制降压冷却。灭菌时防止棉塞被冷凝水浸湿。4.6.7 效果检查 将原种培养基经无菌操作接种于GB 4789.28中规定的营养肉汤培养基中，在28恒温条件下培养48 h后检查，无微生物长出为灭菌合格。4.6.8 冷却 冷却室使用前要进行清洁、除尘和消毒灭菌处理。将灭菌后的料袋（瓶）放置在冷却室中冷却到28以下。4.6.9 接种 4.6.9.1 接种室（箱）消毒 将接种室（箱）打扫干净，搬入母种和料袋（瓶），再用国家规定的药物进行消毒，同时用紫外灯照射30 min。本标准仅供内部使用 不得翻印本标准仅供内部使用 不得翻印本标准仅供内部使用 不得翻印本标准仅供内部使用 不得翻印DB22/T 15832012 4 4.6.9.2 无菌操作 在无菌室（箱）或超净工作台上严格按无菌操作规程进行接种。接种完成后及时贴好标签。接种室每次使用后，要及时清理干净，通风换气，台面用75酒精擦拭消毒。4.6.10 培养 原种接种后在2426适宜培养温度下进行暗光培养，并保持空气相对湿度在70以下，培养室定期通风；培养后期温度降至2022，并加强通风。菌丝长满瓶（袋）后继续培养15 d 20 d，促进菌丝向枝条内部生长。4.6.11 检查杂菌 菌种培养期间应定期检查，及时拣出被污染的不合格菌种。4.6.12 标签、标志 出售的菌种应贴标签。注明品种、接种日期、生产单位和地址电话，外包装上应有防晒、防潮、防倒立、防高温、防雨、防重压等标志，标志应符合GB/T 191的规定。4.6.13 贮藏运输 完成培养的菌种要及时登记入库，低温冷藏。要求用纸箱包装，不能用塑料袋包装。采用14保温车运输。4.6.14 留样待检 枝条菌种应保留样本备查，每个批号留样数量3袋（瓶），在14条件下贮存，贮藏至使用者在正常生产条件下该批菌种出第一潮耳。本标准仅供内部使用 不得翻印本标准仅供内部使用 不得翻印本标准仅供内部使用 不得翻印本标准仅供内部使用 不得翻印DB22/T 15832012 5 A A 附 录 A（规范性附录）枝条原种培养基配方 A.1 枝条培养基 阔叶树枝条 90%，阔叶树木屑 7.8%，麸皮 2%，葡萄糖 0.1%，石膏粉 0.1%。A.2 方便筷培养基 方便筷 90%，阔叶树木屑 7.8%，麸皮 2%，葡萄糖 0.1，石膏粉 0.1%。A.3 常规木屑培养基 阔叶树木屑 78%，麸皮 20%，葡萄糖 1%，石膏粉 1%，含水量 58%2%，pH 66.5。本标准仅供内部使用 不得翻印本标准仅供内部使用 不得翻印本标准仅供内部使用 不得翻印本标准仅供内部使用 不得翻印