ICS11.220B41DB21辽宁省地方标准DB21/T2468—2015新城疫免疫抗体监测技术规范TechnicalspecificationformonitoringimmuneantibodyofNewcastledisease2015-04-30发布2015-06-30实施辽宁省质量技术监督局发布DB21/T2468—2015I前言本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。本标准由辽宁省动物疫病预防控制中心提出。本标准由辽宁省畜牧兽医局归口。本标准起草单位：辽宁省动物疫病预防控制中心、辽宁省动物医学研究院。本标准主要起草人：王宏燕、赵晓彤、薛树山、闫海滨、马建山、石霖、李清竹、吴运谱、何欣、王志国、赵鹏、李晓楠。DB21/T2468—20151新城疫免疫抗体监测技术规范1范围本标准规定了新城疫免疫抗体监测技术中的样品采集和制备、血凝试验、血凝抑制试验的操作规程和综合判定。本标准适用于新城疫疫苗免疫抗体监测。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T16550-2008新城疫诊断技术3缩略语下列缩略语适用于本标准。HA：血凝（hemagglutination）HAU：血凝单位（hemagglutinationunit）HI：血凝抑制（hemagglutinationinhibition）4器材与试剂4.1器材：普通天平、分析天平、普通离心机、微型振荡器、冰箱、高压灭菌器、微量移液器、滴头、96孔90度V形血凝反应板。4.2阿氏液(Alsever'sSolution)：配制方法参见附录A中A.1。4.3pH7.20.01mol/L磷酸盐缓冲液（PBS）：配制方法参见附录A中A.2。4.41%鸡红细胞悬液：配制方法参见附录A中A.3。4.5标准新城疫病毒抗原、阳性对照血清和阴性对照血清。5抽样样本量大小的确定5.1无限群抽样样本量n值的计算按照预期新城疫免疫抗体合格率为70%,可接受的最大绝对误差为5%，置信水平为95%，根据公式n=p(1-p)×z2/e2计算出n值，其中z值为95%置信水平对应的标准正态分布1-α/2百分位点，为1.96，将p=0.7、z=1.96、e=0.05计算出n值为323。5.2有限群抽样样本量nα值的计算根据公式nα=n×N/(N+n)，计算出群体实际抽样数量，其中N为群体数量，nα为抽样数量。DB21/T2468—201526样品采集和制备6.1血液采集将鸡侧卧保定后，用酒精棉球消毒翅静脉窝区，在距离翅静脉窝约0.3cm处，使针管与近心端保持45度进针，稍稍将针头轻插进血管，轻拉活塞，当有血液开始被吸出后，保持注射器位置不动，让血液缓缓吸入注射器针管内，达到所需的采血量后，用棉球压迫血管上的伤...
