DB45T 1917-2018 进口水果常见粉蚧快速鉴定方法.pdf

ICS 65.020.01 B 68 DB45 广西壮族自治区地方标准 DB 45/T 19172018 进口水果常见粉蚧快速鉴定方法 Rapid method to indentify the common mealybugs on import fruits 2018-12-20 发布 2018-12-31 实施广西壮族自治区市场监督管理局 发 布 DB45/T 19172018 I 目 次 前言.I 1 范围.1 2 术语和定义.1 3 原理.2 4 器材和试剂.2 5 实验室鉴定.3 6 结果判定.4 附录 A（资料性附录）粉蚧科雌虫的基本信息.5 附录 B（资料性附录）粉蚧科常见属检索表.6 附录 C（资料性附录）进口水果常见粉蚧种类快速鉴定检索表.7 DB45/T 19172018 III 前 言 本标准根据GB/T 1.12009 给出的规则起草。本标准由广西检验检疫标准化技术委员会提出。本标准主要起草单位：南宁海关技术中心。本标准主要起草人：陈展册、杜智欣、赵永锋、陈开生、陈应超、吕春秋、罗兆飞、黄月虹、欧玉玲、梁珍。DB45/T 19172018 1 进口水果常见粉蚧快速鉴定方法 1 范围 本标准规定了进口水果常见粉蚧快速鉴定方法的术语和定义、原理、器材和试剂、实验室鉴定、结果判定。本标准适用于进口水果常见粉蚧的快速鉴定。2 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。2.1 背孔 ostioles 背孔又名背裂。着生在虫体背面的一横裂如嘴唇状的构造，数目常为两对，少数种类只具一对。背孔按着生位置的不同可分为前背孔和后背孔。前背孔生在前胸背板上，后背孔则生在第6腹节背板上。2.2 腹脐 circulus 腹脐又名腹裂。腹脐位于虫体腹部腹面，常以局部地角质化的狭窄的硬化框为界限，其数目和大小在不同的蚧虫种类中变化很大，也有的种类无腹脐。2.3 盘状腺 disk pores 盘状腺又名孔腺，为蚧虫分泌蜡腺的一种类型，包括三格腺、五格腺、多格腺、筛状孔等多种形状的腺体。2.4 三格腺 trilocular pores 盘状腺的一种，各种大小的略呈三角形或圆形的硬化结构，其中部有三个长形的腺孔。2.5 五格腺 quinauelocular pores 盘状腺的一种，具有5个腺孔。2.6 多格腺 multilocular disc pores 盘状腺的一种，不同直径的圆形或卵圆形硬化孔，在中央常有一个小孔和一圈边缘孔，腺孔多于5个。2.7 DB45/T 19172018 2 领状管 oral-collar tubular duct 管腺的一种，圆柱形，管口有一圈硬化环。2.8 蕈状管 oral-rim tubular duct 管腺的一种，圆柱形，管口有一圈突出的角质状、成半球形的突起，形似蘑菇。2.9 拂状管 Ferrisia-like tubular duct 管腺的一种，圆柱形，管口具硬化的截面圆锥突起盘，盘上长有15根小刺，少数则为毛，小刺顶端尖锐或钝圆，或呈须枝状。2.10 尾瓣 anal lobe 粉蚧第 9 腹节在肛环两侧的突出部分。2.11 肛环 nal ring 肛门开口处的硬化环，常为椭圆形，其上具有蜡腺孔和肛环毛。2.12 阴门 vulva 阴门位于身体腹面，在第8至第9节腹节腹板间，为雌性生殖孔的开口，阴门周围常有盘腺分布，有些成群排列。2.13 刺孔群 cerarii 刺孔群一般由两个，少数一个或数个圆锥状刺和聚集在刺附近的三格腺或少数五格腺，并常有一些毛共同组成。刺孔群为粉蚧科中许多种类都具有的特殊泌蜡构造，常着生在虫体背面边缘，少数种类背面中部也有分布。3 原理 粉蚧科（Pseudococcidae）（英文名：Mealybugs）属昆虫纲（Insecta），半翅目（Hemiptera），蚧总科Coccidea。粉蚧科雌虫的基本信息参见附录A。将粉蚧科雌成虫样品制作成玻片标本，用显微镜观察，根据观察到的雌成虫形态特征，参照检索表进行逐项比对，从而快速鉴定出粉蚧种类。4 器材和试剂 4.1 器材：体视显微镜、生物显微镜、数显加热板、小烧杯、比色皿、昆虫解剖针、显微镊、眼科手术刀、小毛笔、表面皿、载玻片、盖玻片等。4.2 试剂：70乙醇、甘油、氢氧化钠（氢氧化钾）、酸性品红（酸性品红 95乙醇饱和溶液）、95乙醇、100乙醇、丁香油、霍氏封片液等。DB45/T 19172018 3 5 实验室鉴定 5.1 玻片标本快速制作方法 5.1.1 标本固定 挑取蚧虫雌成虫置入70乙醇中杀死固定2 h，如需长期保存，则在70乙醇中加入少量甘油（70乙醇甘油=501）作为保存液。5.1.2 脱脂透明 选取经70酒精固定的虫体用眼科手术刀在虫体的背面中央纵向划开一条约占虫体1/2长度的开口。然后将标本移入加有10氢氧化钾或（氢氧化钠）溶液的小烧杯中，置于数显加热板上加热，以不沸腾为度，定时观察，直至体外蜡质和虫体内含物全部融化，将虫体移入盛有热碱液的透明比色皿中，用解剖针、显微镊、小毛笔等轻轻挤压、清理虫体，清除内含物，使虫体变为清洁透明，脱脂净化时间以标本透明为准。5.1.3 漂洗 经氢氧化钾或氢氧化钠处理过的标本，使用加热的清水漂洗。将经碱液脱脂净化处理的标本转移到数显加热板上盛有热清水的小烧杯中继续加热（不沸腾），漂洗5 min10 min（期间不动标本）。漂洗完后将标本转移到70乙醇中清洗干净内含物。5.1.4 染色 染色时以浅的器皿如表面皿等为好，可看得清楚，便于操作。将标本转移到酸性品红（酸性品红 95乙醇饱和溶液）中浸泡染色，染色时间视标本着色情况而定，一般在8 h以上。5.1.5 脱水 用70乙醇洗掉多余染色剂，再依次经过95乙醇、100乙醇脱水各1 min3 min，不能停留太久，以免过分褪色。5.1.6 固色透明 移入丁香油中20 min30 min，使颜色固定。5.1.7 整姿封盖 在载玻片上加一滴霍氏封片液，移入虫体，用显微镊和昆虫解剖针整理姿式，整姿后用盖玻片封片。5.2 鉴定特征快速检索 根据粉蚧科常见属检索表（参见附录B），在显微镜下对制作的粉蚧玻片进行形态鉴定，检索出其属于相应的属（如曼粉蚧属Maconellicoccus等），并根据进口水果常见粉蚧种类快速鉴定检索表（参见附录C）中各属的形态特征描述，进行种类鉴定。DB45/T 19172018 4 6 结果判定 以雌成虫形态特征为依据，符合附录B、附录C中描述的某一粉蚧种类的形态特征，即可鉴定为对应的粉蚧种类。DB45/T 19172018 5 A A 附 录 A（资料性附录）粉蚧科雌虫的基本信息 A.1 粉蚧科雌虫的基本特征 粉蚧科雌虫的特征是无腹气门。除少量种类外，均具发达的肛环。肛环具孔和粗壮的肛环刺。泌蜡腺基本可分为四个类型：三格腺、五格腺、多格腺、管状腺。管状腺又可分领状管、蕈状管、拂状管和瓶状管等腺体。大多数种类体壁膜质柔软，只有少数种类如竹粉蚧属、扁粉蚧属等体壁有不同程度硬化。虫体表面常有白色蜡粉或蜡块，或蜡板，或有的种类体缘具有放射状蜡刺或蜡丝。A.2 粉蚧科雌成虫形态特征模式图 粉蚧科雌成虫形态特征模式图见图A.1。图A.1 粉蚧科模式图（汤祊德图）刺 前背孔 触角 眼 三格腺 前足 喙 前气门 毛 五格腺 爪 附冠毛 爪爪冠毛 领状管 硬化棒 多格腺 刺孔群 拂状管 星状管 双叉管 三叉管 蕈状管 中足 后气门 后足 腹脐 阴门 后背孔 尾瓣毛 筛状孔 瓶状管 DB45/T 19172018 6 B 附 录 B（资料性附录）粉蚧科常见属检索表 1 蕈腺有 2 1 蕈腺无 4 2 刺孔群数量46对（额对缺、腹节I无），触角9节，蕈腺多曼粉蚧属Maconellicoccus 2 刺孔群数量918对3 3 臀瓣无硬化棒，刺孔群1217对，2根锥刺，至少C17、C16有附毛粉蚧属Pseudococcus 3 臀瓣有硬化棒，刺孔群918对，2根锥刺，仅末对刺孔群有附毛秀粉蚧属Paracoccus 4 五格腺有，刺孔群的锥刺顶端平截平刺粉蚧属（垒粉蚧属）Rastrococcus 4 五格腺缺 5 5 有放射状管腺，顶端周围硬化，有14根长毛着生在硬环内或边缘，刺孔群仅末对拂粉蚧属Ferrisia 5 无放射状管腺 6 6 臀瓣腹面硬化，有硬化棒 7 6 臀瓣无硬化棒 8 7 硬化棒与端毛和棒毛不相接，刺孔群1618对，每对刺孔群有多根锥刺。眼前部刺孔群（C2）常存在 Exallomochlus属 7 硬化棒与棒毛相接，刺孔群18对，除眼对外一般为2根锥刺，无附毛或仅C18有附毛，触角8节臀纹粉蚧属Planococcus 8 眼旁有大而明显的伴孔，有时与多格腺一样大。刺孔群18对眼粉蚧属Hordeolicoccus 8 眼旁无伴孔，如有伴孔，小而不明显。刺孔群少于18对 9 9 背毛圆锥状或披针状，与刺孔群锥刺大小相似。触角68节。三格腺大小一致堆粉蚧属Nipaecoccus 9 背毛无论是鞭毛状还是圆锥状或披针状，明显比锥刺细长 10 10 刺孔群少于6对，每对刺孔群有2根锥刺。腹脐大，哑铃状。后足基节旁表皮有细孔，无细管。多格腺在背腹面分布多，达体缘蔗粉蚧属Saccharicoccus 10 刺孔群多于6对11 11 后足基节上及其附近有大量细管椰粉蚧属Palmicultor 11 后足基节上及其附近无大量细管 12 12 爪下有齿，刺孔群118对，背毛具短针状毛绵粉蚧属Phenacoccus 12 爪下无齿 13 13 眼有小伴孔。刺孔群817对，至少臀瓣有附毛。无C2刺孔群。臀瓣明显，臀瓣锥刺28根，后足胫节+跗节长于转节+腿节，肛环靠近腹节末端灰粉蚧属Dysmicoccus 13 眼无伴孔。刺孔群518对，如有18对刺孔群，则C2存在。刺孔群不少于2根锥刺。后足胫节+跗节短于转节+腿节，肛环离开腹节末端约一个其直径距离簇粉蚧属Paraputo DB45/T 19172018 7 B C 附 录 C（资料性附录）进口水果常见粉蚧种类快速鉴定检索表 C.1 曼粉蚧属Maconellicoccus 有腹脐，背部有管腺，蕈状腺宽3.75 m5 m，长7.5 m8.5 m木槿曼粉蚧 Maconellicoccus hirsutus(Green)C.2 粉蚧属Pseudococcus 1 腹部第节前无多格腺，多格腺仅在阴门附近，约20个。胸、腹部刺孔群旁常有1大2小为一组的蕈腺，C17硬化区比肛环大，C16硬化区比肛环小，后足基节无透明孔长尾粉蚧Pseudococcus longispinus Targioni Tozzetti 1 腹部第节前有多格腺 2 2 眼周无伴孔 3 2 眼周有伴孔 5 3 横跨腹背体节有管腺，除末对刺孔群C17外其余刺孔群基部呈膜状或锥刺基部周围轻度硬化，腹部背面亚中线有蕈腺，后足基节表面有大量透明孔康氏粉蚧Pseudococcus comstocki(Kuwana)3 头、胸腹面边缘具管腺且成簇，无横跨腹背体节的管腺；刺孔群均有附毛，C17硬化程度强，背蕈腺（带框环）大于多格腺，中胸和腹节I腹面的蕈腺呈单个分布4 4 腹部背面具蕈腺榕树粉蚧Pseudococcus baliteus Lit 4 腹部背面不具蕈腺 橙色粉蚧Pseudococcus aurantiacus sp.n.5 眼周有49个伴孔，着生于硬化框；后足基节无透明孔，后足腿节、胫节具透明孔；额对（C1）后有蕈腺，第VII腹节边侧有蕈腺，腹部蕈腺少于27个；第III腹节多格腺少于15个，头胸部多格腺少于30个；最长背毛短于25m，臀瓣端毛短于肛环毛杰克贝尔氏粉蚧Pseudococcus jackbeardsleyi Gimpel&Miller C.3 秀粉蚧属Paracoccus 刺孔群18对，各2根锥刺。后足基节明显大于前足基节，后足基节、胫节有透明孔，腿节无透明孔，腹部IVVII节多格腺排成12列横带，达边缘。腹脐大。背毛短而硬，第VII腹节背毛最长，长15m截获秀粉蚧（摩氏奥粉蚧）Paracoccus in