DB36T 480-2019 蜂荷花粉.pdf

ICS 65.140 B 47 DB36 江西省地方标准 DB 36/T 4802019 代替 DB36/T 480-2005 蜂荷花粉 Bee pollen of lotus 2019-11-05 发布 2020-05-01 实施 江西省市场监督管理局 发 布 DB36/T 4802019 I 前 言 本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。本标准代替DB36/T 4802005蜂荷花粉，本标准与DB36/T 4802005相比，主要技术变化如下：修改了规范性引用文件；修改和补充了“蜂荷花粉”等术语和定义；修改和增加了部分“感官要求”、“理化要求”，增加了“蜂荷花粉定性鉴别”、“污染物限量要求”，将“卫生安全要求”修改为“微生物指标要求”；修改了部分试验方法；增加了“生产卫生”条目；修改了部分包装、标志、运输、贮存内容；增加了蜂荷花粉率的测定和电子显微镜下蜂荷花粉的形态特征。本标准由江西省农业农村厅提出并归口。本标准起草单位：江西省养蜂研究所。本标准主要起草人：寿青毅、江武军、张串联、夏晓翠、席芳贵、陈桂平、李倩、何红霞、刘锋、骆群、娄文、叶武光。本标准所代替标准的历次版本发布情况为：DB36/T 4802005。DB36/T 4802019 1 蜂荷花粉 1 范围 本标准规定了蜂荷花粉的定义、要求、试验方法、包装、标志、贮存、运输要求。本标准适用于蜜蜂采集荷花（白莲）花粉形成的干燥团粒（颗粒）状蜂荷花粉或碎状蜂荷花粉为原料经干燥筛选的产品，不适用于破壁蜂荷花粉及以蜂荷花粉为原料加工成的产品。2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T 191 包装储运图示标志 GB 2762 食品安全国家标准 食品中污染物限量 GB 4789.2 食品安全国家标准 食品微生物检验 菌落总数测定 GB 4789.3 食品安全国家标准 食品微生物检验 大肠菌群计数 GB 4789.4 食品安全国家标准 食品微生物学检验 沙门氏菌检验 GB 4789.10 食品安全国家标准 食品微生物学检验 金黄色葡萄球菌检验 GB 4789.11 食品安全国家标准 食品微生物学检验 型溶血性链球菌检验 GB 4789.15 食品安全国家标准 食品微生物检验 霉菌和酵母计数 GB 5009.3 食品安全国家标准 食品中水分的测定 GB 5009.4 食品安全国家标准 食品中灰分的测定 GB 5009.5 食品安全国家标准 食品中蛋白质的测定 GB 5009.6 食品安全国家标准 食品中脂肪的测定 GB 5009.7 食品安全国家标准 食品中还原糖的测定 GB 5009.8 食品安全国家标准 食品中果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖的测定 GB 5009.227 食品安全国家标准 食品中过氧化值的测定 GB 7718 食品安全国家标准 预包装食品标签通则 GB 14881 食品安全国家标准 食品生产通用卫生规范 GB 19300 食品安全国家标准 坚果与籽类食品 GB/T 23509 食品包装容器及材料 分类 GB 28050 食品安全国家标准 预包装食品营养标签通则 GB/T 30359 蜂花粉 GB 31636 食品安全国家标准 花粉 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。3.1 DB36/T 4802019 2 花粉 pollen 显花植物雄性生殖细胞。3.2 蜂荷花粉 bee pollen of lotus 工蜂采集荷花花粉，用工蜂分泌物或花蜜混合后形成的物质。3.3 破壁蜂花粉 bee pollen of breaking wall 将纤维素和孢粉素构成的花粉壁打破的蜂花粉。3.4 碎蜂花粉 bee pollen debris 蜂花粉团粒破碎后形成的蜂花粉粉末。3.5 蜂荷花粉率 bee pollen of lotus rate 蜂荷花粉占总量的百分比。4 要求 4.1 感官要求 感官要求应符合表1的规定。表1 感官要求 项目 要求 色泽 金黄色 状态 不规则的扁圆形团粒（颗粒）状或粉末状；无可见外来杂质，无虫蛀、无霉变 气味 具有特有的荷花清香气，无异味 滋味 具有蜂荷花粉特有的滋味，口感回味略甜，无异味 4.2 理化要求 理化要求应符合表2的规定。DB36/T 4802019 3 表2 理化要求 项目 指标 水分 g/100g 8 碎蜂花粉率%5 蜂荷花粉率%90 蛋白质 g/100g 15 脂肪 g/100g 4.07.0 总糖(以还原糖计)g/100g 2550 黄酮类化合物（以无水芦丁计）（mg/100g）400 灰分 g/100g 5 酸度（以 pH 值表示）4.4 过氧化值（以脂肪计）g/100g 0.08 4.3 微生物指标要求 微生物指标要求应符合表3的规定。表3 微生物指标要求 项目 要求 n c m M 菌落总数/（CFU/g）5 2 1000 10000 大肠菌群/（MPN/g）5 2 4.3 46 霉菌计数/（CFU/g）200 型溶血性链球菌 不得检出 沙门氏菌 不得检出 金黄色葡萄球菌 不得检出 注：其中n值表示同一批次产品采取的样品件数，c值表示最大允许超出m值的样品数，m值表示微生物指标可接受水平的限量值，M值表示微生物指标的最高安全限量值。4.4 蜂荷花粉定性鉴别 蜂荷花粉、碎蜂荷花粉定性鉴别应符合附录A的要求。DB36/T 4802019 4 4.5 污染物限量要求 蜂荷花粉、碎蜂荷花粉中的污染物限量应符合GB 2762中的规定。5 试验方法 5.1 感官指标检验 5.1.1 色泽、状态 将样品置于洁净的白瓷盘中，在自然光下用肉眼观察。5.1.2 气味 鼻嗅。5.1.3 滋味 口尝。5.2 理化指标检验 5.2.1 水分测定 按GB 5009.3规定的减压干燥法执行。5.2.2 碎蜂花粉率测定 用天平称取试样约50g，精确到0.1g，用20目筛筛出碎粒及碎粉末并称重。按公式（1）计算。碎蜂花粉率（%）=.(1)5.2.3 蛋白质测定 按GB 5009.5规定的方法执行。5.2.4 黄酮类化合物的测定 按GB/T 30359附录B中规定的方法执行。5.2.5 灰分测定 按GB 5009.4规定的方法执行。5.2.6 脂肪测定 按GB 5009.6规定的酸水解法执行。5.2.7 总糖测定 按GB 5009.8要求处理后，再按GB 5009.7规定的直接滴定法执行。5.2.8 蜂荷花粉率测定 DB36/T 4802019 5 按附录A中的A.3处理样品，在100倍或400倍光学显微镜下镜检，调节显微镜的光线和焦距，使花粉粒清晰，以每视野中花粉粒总数在30100范围为宜，选取5个视野区域并对视野内的所有的花粉粒进行计数，每次试验都应进行平行试验，结果按公式（2）计算。蜂荷花粉率（%）=.（2）5.2.9 酸度的测定 按GB 31636中3.3规定的方法执行。5.2.10 过氧化值的测定 样品的前处理按照GB 19300(坚果与籽类食品卫生标准)中的 B.2，然后按GB 5009.227中的滴定法（第一法）测定。5.3 微生物指标检验 5.3.1 菌落总数 按GB 4789.2规定的方法检验。5.3.2 大肠菌群 按GB 4789.3规定的第一法检验。5.3.3 霉菌计数 按GB 4789.15规定的方法检验。5.3.4 致病菌 型溶血性链球菌按GB 4789.11规定中的方法检验，沙门氏菌按GB 4789.4规定的方法检验，金黄色葡萄球菌按照GB 4789.10规定的方法检验。6 生产卫生 蜂荷花粉在生产、加工中的卫生规范应符合GB 14881标准规定。7 包装、标志、运输、贮存 7.1 包装 7.1.1 包装材料应符合 GB/T 23509 标准规定。7.1.2 包装材料应简单、实用，避免过度包装，并考虑包装材料的回收利用。7.2 标志 7.2.1 图示标志应符合 GB/T 191 标准规定。7.2.2 产品标签应符合 GB 7718 标准规定。DB36/T 4802019 6 7.2.3 产品营养标签应符合 GB 28050 标准规定。7.3 运输 7.3.1 运输工具应清洁卫生。7.3.2 不得与有毒、有害、有腐蚀性、有异味、易污染的货物混装运输。7.3.3 运输过程中，要避免高温，防风沙、防曝晒、防雨淋、防湿。7.4 贮存 7.4.1 用真空充氮包装，在常温下保存。其他包装的应在-5以下保存。7.4.2 短期临时存放，应经过干燥和密闭处理后存于阴凉干燥处。7.4.3 贮存场所应清洁、干燥、无异味，防高温、防风雨、远离污染源。7.4.4 不得与有毒、有害、有腐蚀性、有异味、易挥发的物品同场所贮存。DB36/T 4802019 1 A A 附 录 A（规范性附录）蜂荷花粉率的测定 A.1 仪器 A.1.1 光学显微镜：10 10倍、10 40倍。A.1.2 高速离心机：转速10000r/min。A.2 试剂 A.2.1 硫酸和冰乙酸混合液(体积比为19)。A.2.2 甘油(分析纯)。A.3 样品处理 取蜂荷花粉1g 置于15mL 刻度离心管中，加入硫酸和冰乙酸(19)的混合液2mL，浸没花粉粒。用玻璃棒捣碎花粉，沸水浴5min。冷却后加蒸馏水定容至10mL。离心，弃去上清液，重复离心洗涤步骤3次。沉淀物加甘油数滴搅匀。用玻璃棒蘸取1滴涂布在载玻片上，盖上盖玻片，在显微镜下检视。A.4 计数 取已处理好的玻片，在显微镜100倍或400倍物镜下观察。如发现涂片中花粉颗粒过于密集导致重叠影响计数时，则应重新涂片，每视野中花粉颗粒数量在30个100个范围为宜。选取5个视野区域并对视野内的所有花粉颗粒计数，并与图谱对照鉴别不同的花粉品种。5个视野中蜂荷花粉颗粒数与5个视野中所有花粉颗粒的总数之比即为蜂荷花粉的花粉率。每次试验都应进行平行试验。A.5 蜂荷花粉的定性鉴别 蜂荷花粉细胞呈近似球形。赤道面观椭圆形，极面观为三裂圆形，直径约65m68m。具三沟，沟宽。壁厚4.4m5.2m。表面有颗粒状纹。见图A1。DB36/T 4802019 2 a)蜂荷花粉赤道面观形态（400）b)蜂荷花粉极面观形态（400）图A.1 蜂荷花粉细胞显微镜下的形态 A.6 结果计算结果计算 检测结果按公式(A.1)计算:X=.(A.1)式中：X 蜂荷花粉花粉率，%；a 蜂荷花粉颗粒数，单位为粒；b 试样蜂花粉颗粒总数，单位为粒。DB36/T 4802019 3 B B 附 录 B（规范性附录）电子显微镜下蜂荷花粉的形态特征 B.1 蜂荷花粉品种的鉴别电子显微镜镜析法 B.1.1 仪器 扫描电镜：放大倍数2010000倍；离子溅射仪。B.1.2 步骤 B.1.2.1 样品称取和净化 用四分法均匀选取蜂荷花粉样品，称取0.1g放入2mL指型管中，加入纯净水（25）1.5mL，置于超声波清洗器中超声10min，静止3 min后弃去上层清洗液，重复二次。同法再用丙酮（分析纯）和无水乙醇（分析纯）进行漂洗,然后将样品平摊在中性滤纸上自然风干。B.1.2.2 样品贴台和镀膜 在粘有双面碳导电胶带的扫描电镜样品台上，用取样杆将样品均匀撒落在样品台上并轻轻展开，放入离子溅射仪中，在真空度优于0.1 Torr，电源开关在HV，电压旋钮为5，电流表读数在4mA6 mA时，进行溅射5min，取出后待电镜观察。B.1.2.3 扫描电镜观察 将待观察的样品台放入扫描电镜内，调到最佳的清晰度、亮度、对比度和放大倍数，进行图像扫描拍摄。B.2 蜂荷花粉细胞电镜下的形态 蜂荷花粉细胞电镜下的形态如图B.1。a)蜂荷花粉赤道面观形态（2000）b)蜂荷花粉远极面观形态（2500）图B.1 蜂荷花粉细胞电镜下的形态 _