DB37T 4013-2020 养殖水体中三嗪类、酰胺类、二硝基苯胺类除草剂的测定 气相色谱-质谱法.pdf

ICS 13.060.25 Z 16 DB37 山东省地方标准 DB37/T 40132020 养殖水体中三嗪类、酰胺类、二硝基苯胺类除草剂的测定 气相色谱-质谱法 Determination of triazine,amide,dinitroaniline herbicides in aquaculture water by gas chromatography mass spectrometry 2020-07-09 发布 2020-08-09 实施 山东省市场监督管理局 发 布 DB37/T 40132020 I 前 言 本标准按照GB/T 1.12009给出的规则起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。本标准由山东省农业农村厅提出并组织实施。本标准由山东省农业标准化技术委员会渔业标准化分技术委员会（鲁TC03)归口。本标准起草单位：山东省海洋资源与环境研究院、山东省水产品质量检验中心。本标准主要起草人：张秀珍、徐英江、张华威、宫向红、刘小静、韩典峰、田秀慧、黄会、任传博。DB37/T 40132020 1 养殖水体中三嗪类、酰胺类、二硝基苯胺类除草剂的测定 气相色谱-质谱法 1 范围 本标准规定了养殖水体中16种三嗪类、酰胺类、二硝基苯胺类除草剂的气相色谱-质谱测定方法。本标准适用于养殖海水及养殖淡水中三嗪类、酰胺类、二硝基苯胺类除草剂的测定，其他水体可参照执行。2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 3 原理 过滤后的试样，经固相萃取柱富集净化后，采用气相色谱-质谱法测定，外标法定量。4 试剂和材料 除另有规定外，所有试剂均为分析纯，水为符合GB/T 6682中规定的一级水。4.1 试剂 4.1.1 氯化钠（NaCl）。4.1.2 乙酸乙酯（C4H8O2）：色谱纯。4.1.3 甲醇（CH3OH）：色谱纯。4.1.4 正己烷（C6H14）：色谱纯。4.1.5 丙酮（CH3COCH3）：色谱纯。4.2 溶液配制 正己烷-丙酮溶液：正己烷与丙酮等体积混合。4.3 标准品 标准物质：16种除草剂标准品：纯度98%，标准品信息参照附录A。4.4 标准溶液配制 4.4.1 标准贮备液：称取扑灭津、阿特拉津、特丁津、西玛津、乙草胺、甲草胺、环草津、敌草净、扑草净、莠灭净、异丙甲草胺、西草净、二甲戊乐灵、丁草胺、草净津、丙草胺各 10 mg（精确至 0.01 DB37/T 40132020 2 mg），用乙酸乙酯溶解，分别定容至 10 mL，配制成 1.0 mg/mL 标准贮备液，于 4 下避光保存，有效使用期为 6 个月。4.4.2 混合标准工作液：分别移取扑灭津等 16 种除草剂标准贮备液，用乙酸乙酯稀释成混合标准工作液，使其中扑灭津、阿特拉津、特丁津、西玛津、敌草净、扑草净、莠灭净、异丙甲草胺的浓度均为1.0 g/mL，环草津、西草净、甲草胺、乙草胺、丙草胺、丁草胺的浓度均为 1.5 g/mL，草净津、二甲戊乐灵的浓度均为 2.0 g/mL，于 4 下避光保存，有效使用期为 1 个月。4.5 材料 4.5.1 0.45 m 混合纤维素滤膜。4.5.2 固相萃取柱：HLB，60 mg/3 mL，或相当者。5 仪器和设备 5.1 气相色谱-质谱联用仪：配电子轰击离子源（EI 源）。5.2 电子天平：感量 0.000 01 g。5.3 离心机：转速不低于 4 000 r/min。5.4 抽滤装置。5.5 固相萃取装置。5.6 氮吹仪。5.7 旋涡混合器。5.8 移液管：1 mL。6 试样制备与保存 6.1 养殖海水 将待测养殖海水用抽滤装置经0.45 m混合纤维素滤膜过滤后，备用。采集的样品应于2 8 冷藏、避光保存，2 d内分析或萃取完毕。萃取液应于2 8 冷藏、避光保存，8 d内分析完毕。6.2 养殖淡水 在待测养殖淡水中加入氯化钠，使之浓度达到3%，用抽滤装置经0.45 m混合纤维素滤膜过滤后，备用。采集的样品应于2 8 冷藏、避光保存，2 d内分析或萃取完毕。萃取液应于2 8 冷藏、避光保存，8 d内分析完毕。7 测定步骤 7.1 提取与净化 准确量取500 mL处理后的养殖用水样品于1 000 mL三角瓶中，加入20 mL甲醇，混匀。依次用甲醇（4.1.3）3 mL、水3 mL活化HLB固相萃取小柱（4.5.2），将水样品全部通过固相萃取小柱后，用水3 mL淋洗，抽干5 min，加正己烷-丙酮溶液（4.2.1）6 mL洗脱。收集洗脱液，40 氮吹至近干，用乙酸乙酯（4.1.2）定容至1 mL，供气相色谱-质谱联用仪分析。7.2 标准曲线的绘制 DB37/T 40132020 3 准确移取适量的混合标准使用液（4.4.2），用乙酸乙酯稀释成一系列的混合标准工作液，使其中扑灭津、阿特拉津、特丁津、西玛津、敌草净、扑草净、莠灭净、异丙甲草胺浓度分别为5.00 g/L、10.0 g/L、20.0 g/L、50.0 g/L、100 g/L，环草津、西草净、甲草胺、乙草胺、丙草胺、丁草胺浓度分别为7.50 g/L、15.0 g/L、30.0 g/L、75.0 g/L、150 g/L，草净津、二甲戊乐灵浓度分别为10.0 g/L、20.0 g/L、40.0 g/L、100 g/L、200 g/L，临用时配制。以定量离子峰面积为纵坐标，对应的浓度为横坐标，绘制标准工作曲线。7.3 测定 7.3.1 气相色谱参考条件：a)色谱柱：DB-17ms 毛细管柱，30 m0.25 mm0.25 m，或相当者；b)载气：高纯氦气，纯度99.999%，流速 1.0 mL/min；c)进样方式：无分流进样；d)进样量：1 L；e)进样口温度：260；f)柱温：起始温度 50，保持 1 min；以 20/min 升温至 200，保持 10 min，以 10/min升温至 240，以 30/min 升温至 300，保持 3 min。7.3.2 质谱参考条件：a)离子源：EI 源；b)接口温度：280；c)离子源温度：230；d)四级杆温度：150；e)溶剂延迟：4.0 min；f)测定方式：选择离子（SIM）监测模式，定量离子和定性离子见表 1。表1 待测物定量离子和定性离子 化合物名称 定量离子 m/z 定性离子 1 m/z 定性离子 2 m/z 扑灭津 214 229 172 阿特拉津 200 215 173 特丁津 214 173 229 西玛津 201 186 173 乙草胺 162 223 174 甲草胺 160 188 217 环草津 212 227 170 敌草净 213 198 171 扑草净 241 184 226 莠灭净 227 170 185 异丙甲草胺 162 238 146 西草净 213 170 185 DB37/T 40132020 4 表 1 待测物定量离子和定性离子（续）化合物名称 定量离子 m/z 定性离子 1 m/z 定性离子 2 m/z 二甲戊乐灵 252 281 162 丁草胺 176 160 188 草净津 225 198 240 丙草胺 162 238 176 7.3.3 测定方法 7.3.3.1 定性方法 在同样测试条件下，试样液中待测物的保留时间与标准工作液中待测物的保留时间偏差在0.10 min以内，在扣除背景后的样品质谱图中，所选择的特征离子均应出现，且检测到的离子的相对丰度，应与浓度相当的校正标准溶液相对丰度一致。其允许偏差应符合表2要求。表2 定性确证时相对离子丰度的允许偏差 相对离子丰度%允许偏差%50 10 2050 15 1020 20 10 50 7.3.3.2 定量方法 按7.3.1和7.3.2设定仪器条件，待仪器稳定后，根据表1中的定量离子分别对16种除草剂进行测定，记录保留时间和峰面积，以峰面积按外标法进行单点或多点校准定量，标准工作液和试样液中待测物的响应值均应在仪器检测线性范围内。标准溶液、空白加标样品的选择离子流图参见附录B。7.4 空白试验 除不加试样外，均按上述步骤进行。8 结果计算和表述 按式（1）分别计算试样中16种除草剂的含量（ng/L计算结果需扣除空白值，测定结果用两次平行测定的算术平均值表示，保留三位有效数字。.(1)式中：X 试样中被测组分的含量，单位为纳克每升（ng/L）；ci 试样溶液中对应的被测组分浓度，单位为微克每升（g/L）；V1 试样溶液定容体积，单位为毫升（mL）；DB37/T 40132020 5 V 供试试样总体积，单位为毫升（mL）。9 检测方法的灵敏度、准确度和精密度 9.1 灵敏度 扑灭津、阿特拉津、特丁津、西玛津、敌草净、扑草净、莠灭净、异丙甲草胺检出限分别为5.0 ng/L、定量限分别为10 ng/L；环草津、西草净、甲草胺、乙草胺、丙草胺、丁草胺检出限分别为7.5 ng/L、定量限分别为15 ng/L；草净津、二甲戊乐灵检出限分别为10 ng/L、定量限分别为20 ng/L。9.2 准确度 扑灭津、阿特拉津、特丁津、西玛津、敌草净、扑草净、莠灭净、异丙甲草胺在添加浓度10 ng/L100 ng/L时，回收率均为70%120%；环草津、西草净、甲草胺、乙草胺、丙草胺、丁草胺在添加浓度15 ng/L150 ng/L时，回收率均为70%120%；草净津、二甲戊乐灵在添加浓度20 ng/L200 ng/L时，回收率均为70%120%。9.3 精密度 本方法的批内相对标准偏差小于15%，批间相对标准偏差小于15%。DB37/T 40132020 6 A A 附 录 A（资料性附录）16 种除草剂标准品信息 表A.1 16 种除草剂中、英文名称、分子式、分子量及 CAS 号 中文名称 英文名称 分子式 分子量 CAS 号 扑灭津 Propazine C9H16ClN5 229 139-40-2 阿特拉津 Atrazine C8H14ClN5 215 1912-24-9 特丁津 Terbuthylazine C9H16ClN5 229 5915-41-3 西玛津 Simazine C7H12ClN5 201 122-34-9 乙草胺 Acetochlor C14H20ClNO2 269 34256-82-1 甲草胺 Alachlor C14H20ClNO2 269 15972-60-8 环草津 Cyprazine C9H14ClN5 227 22936-86-3 敌草净 Desmetryn C8H15N5S 213 1014-69-3 扑草净 Prometryn C10H19N5S 241 7287-19-6 莠灭净 Ametryn C9H17N5S 227 834-12-8 异丙甲草胺 Metolachlor C15H22ClNO2 283 51218-45-2 西草净 Simetryn C8H15N5S 213 1014-70-6 二甲戊乐灵 Pendimethalin C13H19N3O4 281 40487-42-1 丁草胺 Butachlor C17H26ClNO2 311 23184-66-9 草净津 Cyanazine C9H16ClN5 240 21725-46-2 丙草胺 Pretilachlor C17H26ClNO2 311 51218-49-6 DB37/T 40132020 7 B B 附 录 B（资料性附录）16 种除草剂标准溶液、空白海水加标样品、空白淡水加标样品色谱图 1.扑灭津；2.阿特拉津；3.特丁津；4.西玛津；5.乙草胺；6.甲草胺；7.环草津；8.敌草净；9.扑草净；10.莠灭净；11.异丙甲草胺；12.西草净；13.二甲戊乐灵；14.丁草胺；15.草净津；16.丙草胺 图B.1 16 种除草剂标准溶液总离子流图（50.0 g/L）DB37/T 40132020