DB35T 2014-2021 生物检材中毒品及其代谢物分析操作规程.pdf

ICS 13.310 CCS A 92 35 福建省地方标准 DB35/T 20142021 生物检材中毒品及其代谢物分析操作规程 Code of practice for the analysis of drugs and their metabolites in biological samples 2021-09-28 发布 2021-12-28 实施 福建省市场监督管理局 发 布 DB35/T 20142021 I 目次 前言.II 1 范围.1 2 规范性引用文件.1 3 术语和定义.1 4 缩略语.1 5 原理.1 6 试剂.2 7 仪器与设备.2 8 测定步骤.3 9 分析结果评价.4 附录 A（资料性）部分添加样品飞行时间质谱图.5 附录 B（资料性）生物检材中部分毒品及其代谢物的定性判定依据及方法检出限（LOD）.13 参考文献.15 DB35/T 20142021 II 前言 本文件按照GB/T 1.12020标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则的规定起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由福建省禁毒委员会办公室提出并归口。本文件起草单位：福建省禁毒委员会办公室、福建历思司法鉴定所、厦门历思科技服务有限公司、福建省公安厅物证鉴定中心、福州堃晟检测技术有限公司、厦门大学环境与生态学院、集美大学信息工程学院。本文件主要起草人：张宏、朱孔涛、方志山、吴福顺、郭明、李斌、戈文东、罗亨霖、吴辉、曾志胤、曾建晟、宋禹廷、佘雯瑜、赖曙光、许伟坚、薛江华。DB35/T 20142021 1 生物检材中毒品及其代谢物分析操作规程 1 范围 本文件规定了生物检材（血液、尿液、唾液、毛发、血斑和尿斑等）中多种毒品及其代谢物的分析操作规程。本文件适用于生物检材（血液、尿液、唾液、毛发、血斑和尿斑等）中多种毒品及其代谢物的定性分析。也适用于体外样品毒（药）物的定性分析。2 规范性引用文件 下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 GA/T 122 毒物分析名词术语 3 术语和定义 GA/T 122界定的以及下列术语和定义适用于本文件。3.1 毒品 drugs 本文件所称的毒品主要是指鸦片、海洛因、甲基苯丙胺(冰毒)、吗啡、大麻、可卡因以及国家规定管制的其他能够使人形成瘾癖的麻醉药品和精神药品。来源：中华人民共和国刑法第三百五十七条 4 缩略语 下列缩略语适用于本文件。AMP：苯丙胺（Amphetamine）MAMP：甲基苯丙胺（Methylamphetamine）MDA：3，4-亚甲双氧苯丙胺（3,4-Methylenedioxyphenylamine）MDEA：3，4-亚甲双氧乙基苯丙胺（3,4-Methylenedioxyethylamphetamine）MDMA：3，4-亚甲双氧甲基苯丙胺（3,4-Methylenedioxymethamphetamine）5 原理 以基质辅助激光解吸电离源作为离子源，激光照射生物检材中（或经提取净化后的）的毒品及其代谢物，使目标物分子发生电离，利用飞行时间质量分析器检测目标物的特征质荷比离子峰，进行快速分DB35/T 20142021 2 析。以空白样品和添加样品作对照，按平行操作的要求，用飞行时间质谱仪进行快速分析比较，以质谱特征离子峰作为定性判定依据。6 试剂 水：一级水（按照 GB/T 6682 规定）。6.1 甲醇：质谱纯。6.2 丙酮：质谱纯。6.3 三氯甲烷：质谱纯。6.4 异丙醇：质谱纯。6.5 硼砂：质谱纯。6.6 标准物质溶液：6.7 a)06-单乙酰吗啡、吗啡、可待因、MAMP、AMP、MDMA、MDA、MDEA、可卡因、苯甲酰爱康宁、氯胺酮、去甲氯胺酮标准物质储备溶液：分别取 06-单乙酰吗啡、吗啡、可待因、MAMP、AMP、MDMA、MDA、MDEA、可卡因、苯甲酰爱康宁、氯胺酮、去甲氯胺酮标准物质适量，精确称量，用甲醇配制成 1.0 mg/mL 的标准储备溶液。密封，置于冰箱中-18 冷冻保存，保存时间 12个月。b)100 g/mL9-四氢大麻酚、大麻二酚、大麻酚标准溶液：市售9-四氢大麻酚、大麻二酚、大麻酚标准物质溶液。密封，置于冰箱中-18 冷冻保存，保存时间 12 个月。c)06-单乙酰吗啡、吗啡、可待因、MAMP、AMP、MDMA、MDA、MDEA、可卡因、苯甲酰爱康宁、氯胺酮、去甲氯胺酮、9-四氢大麻酚、大麻二酚和大麻酚等 15 种毒品及其代谢物标准物质工作溶液：试验中所用其他浓度的标准工作溶液均由上述标准物质溶液用甲醇稀释而得。密封，置于冰箱中 0 6 冷藏保存，保存时间 3 个月。d)pH9.2 的硼砂缓冲液：精确称量 3.80 g 的 Na2B4O710H2O 溶解于水中，转入 1 L 容量瓶中，混匀，定容。密封，置于冰箱中 0 6 冷藏保存，保存时间 3 个月。内标溶液：氘代内标混合工作溶液。分别移取 0.1 mg/mL 的 06-单乙酰吗啡、吗啡、可待因、MAMP、6.8 AMP、MDMA、MDA、MDEA、可卡因、苯甲酰爱康宁、氯胺酮、去甲氯胺酮、9-四氢大麻酚、大麻二酚和大麻酚等 15 种毒品及其代谢物标准物质的氘代内标溶液，用甲醇配制成 1.0 g/mL 的标准工作溶液。密封，置于冰箱中-18 冷冻保存，保存时间 1 个月。7 仪器与设备 飞行时间质谱仪：配有激光解吸/电离源。7.1 离心机：转速（rpm）5 000。7.2 电子分析天平：感量 0.01 mg。7.3 涡旋混匀仪。7.4 冷冻研磨仪或压片机。7.5 超声波清洗仪。7.6 DB35/T 20142021 3 8 测定步骤 样品前处理 8.1 8.1.1 实际样品 8.1.1.1 体液样品 取体液（尿液、唾液或血液）样品0.1 mL，加入pH9.2的硼砂溶液0.1 mL，加入内标，再加入0.1 mL三氯甲烷：异丙醇（9:1，v/v）溶液后，混旋1 min，离心，取1 L有机相于样品板上，待溶液干燥后上机分析。8.1.1.2 毛发样品 毛发样品的定性分析和分布区域分析操作步骤如下。a)定性分析：采集的毛发样品依次用适量的水和丙酮超声分别洗涤一次后晾干，取约 10 mg（1 mg）毛发于研磨管中，加入 0.5 mL 甲醇，再加入内标，将研磨管置于冷冻研磨机中，待毛发研碎后，混旋 1 min，超声，离心，取 1 L 有机相于样品板上，待溶液干燥后上机分析。b)分布区域分析：取洗涤晾干后的毛发一根，固定于适当的样品板上，进样后从发根到发梢按照程序设定的步长进行测试。8.1.1.3 血（尿）斑样品 将血（尿）斑用剪刀剪下，加入pH9.2的硼砂溶液0.1 mL，加入内标，再加入0.1 mL三氯甲烷：异丙醇（9:1，v/v）溶液后，混旋1 min，离心，取1 L有机相于样品板上，待溶液干燥后上机分析。8.1.2 空白样品 取空白样品一份，按8.1.1进行操作和分析。8.1.3 添加样品 取空白样品一份，添加样品中的目标物，按8.1.1进行操作和分析。样品测定 8.2 8.2.1 飞行时间质谱仪参考条件 以下为参考的仪器条件，可根据不同仪器进行调整：a)进样器：直接进样系统；b)离子源：激光解吸/电离源；c)激光波长：337 nm；d)激光功率：1.9 J；e)质量分析器：飞行时间分析器。8.2.2 进样 进样成功后，按指定条件进行采谱。空白样品与添加样品按相同方法采谱分析。DB35/T 20142021 4 定性判断依据 8.3 以质谱特征离子峰作为定性判断依据。特征离子峰谱图参见附录A，方法检出限参见附录B。9 分析结果评价 阴性结果评价 9.1 如实际样品中有检出内标的情况下，未检出毒品及其代谢物成分，且空白样品中检出内标，未检出毒品及其代谢物成分，添加样品中同时检出内标和毒品及其代谢物成分，则说明空白样品无干扰，阴性结果可靠；如果实际样品中未检出内标，或空白样品中检出内标和毒品及其代谢物成分，则阴性结果不可靠，应按第8章重新操作。阳性结果评价 9.2 如实际样品中同时检出内标和毒品及其代谢物成分，且空白样品中检出内标，未检出毒品及其代谢物成分，而添加样品中同时检出内标和毒品及其代谢物成分，则说明空白样品无干扰，则阳性结果可靠；如果空白样品和添加样品中均检出内标和毒品及其代谢物成分，则阳性结果不可靠，应按第8章重新操作。若检测实际毛发样品呈阳性，则可按8.1.1.2中的方法b)进行操作，从而获得毒品及其代谢物在毛发中的分布区域信息。DB35/T 20142021 5 附录A （资料性）毒品及其代谢物的飞行时间质谱图 部分添加样品的参考飞行时间质谱图，见图A.1图A.15。图A.1 MAMP 的飞行时间质谱图 图A.2 AMP 的飞行时间质谱图 DB35/T 20142021 6 图A.3 MDMA 的飞行时间质谱图 图A.4 MDA 的飞行时间质谱图 DB35/T 20142021 7 图A.5 MDEA 的飞行时间质谱图 图A.6 氯胺酮的飞行时间质谱图 DB35/T 20142021 8 图A.7 去甲氯胺酮的飞行时间质谱图 图A.8 吗啡的飞行时间质谱图 DB35/T 20142021 9 图A.9 苯甲酰爱康宁的飞行时间质谱图 图A.10 可待因的飞行时间质谱图 DB35/T 20142021 10 图A.11 可卡因的飞行时间质谱图 图A.12 O6-单乙酰吗啡的飞行时间质谱图 DB35/T 20142021 11 图A.13 大麻酚的飞行时间质谱图 图A.14 9-四氢大麻酚的飞行时间质谱图 DB35/T 20142021 12 图A.15 混合标准溶液的飞行时间质谱图 DB35/T 20142021 13 附录B （资料性）生物检材中部分毒品及其代谢物的定性判定依据及方法检出限（LOD）B.1 生物检材中部分毒品及其代谢物的定性判定依据 生物检材中部分毒品及其代谢物的定性判定依据见表B.1。表B.1 生物检材中部分毒品及其代谢物的定性判定依据 序号 名称 定性判定依据(m/z)离子对（m/z）1 O6-单乙酰吗啡 328.1 328.1/211.3 328.1/165.3 2 吗啡 286.1 286.1/201.3 286.1/165.3 3 可待因 300.2 300.2/199.2 300.2/165.3 4 甲基苯丙胺 150.1 150.1/119.1 150.1/91.1 5 苯丙胺 136.1 136.1/119.1 136.1/91.1 6 3，4-亚甲双氧甲基苯丙胺 194.2 194.2/163.4 194.2/105.0 7 3，4-亚甲双氧苯丙胺 180.1 180.1/163.1 180.1/135.1 8 3，4-亚甲双氧乙基苯丙胺 208.2 208.2/163.3 208.2/163.1 9 可卡因 304.1 304.1/182.2 304.1/150.2 10 苯甲酰爱康宁 290.2 290.2/168.3 290.2/105.2 11 氯胺酮 238.1 238.1/179.1 238.1/125.1 12 去甲氯胺酮 224.1 224.1/207.1 224.1/125.1 13 9-四氢大麻酚 315.2 315.2/193.2 315.2/259.1 14 大麻二酚 315.2 315.2/193.2 315.2/259.3 15 大麻酚 311.1 311.1/223.2 311.1/293.3 DB35/T 20142021 14 B.2 生物检材中部分毒品及其代谢物的方法检出限（LOD）血（尿）液中部分毒品及其代谢物的方法检出限见表B.2，毛发中部分毒品及其代谢物的方法检出限见表B.3。表B.2 血（尿）液中部分毒品及其代谢物的方法检出限（LOD）