DB34T 2512-2015 羊传染性胸膜肺炎防控技术规程.pdf

ICS 11.220 B 41 DB34 安徽省地方标准 DB 34/T 25122015 羊传染性胸膜肺炎防控技术规程 Technical Specification on Prevention and Control of Infectious Pleuropneumonia of Sheep and Goats 文稿版次选择 2015-11-10 发布 2015-12-10 实施安徽省质量技术监督局 发 布 DB34/T 25122015 I 前 言 本标准按照 GB/T 1.1-2009 给出的规则起草。本标准由安徽省农业科学院畜牧兽医研究所提出。本标准由安徽省农业标准化技术委员会归口。本标准起草单位：安徽省农业科学院畜牧兽医研究所、安徽省天长市周氏羊业有限公司。本标准起草人：侯宏艳、张丹俊、周建军、赵瑞宏、胡哓苗、戴银、潘孝成、周学利、沈学怀、朱传民、惠文巧、李贺侠、张宁、何国荣、周德权、王庆。DB34/T 25122015 1 羊传染性胸膜肺炎防控技术规程 1 范围 本标准规定了羊传染性胸膜肺炎的诊断、预防和控制。本标准适用于羊传染性胸膜肺炎的防控。2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T 16569 畜禽产品消毒规范 NY/T 1167 畜禽场环境质量及卫生控制规范 NY/T 1168 畜禽粪便无害化处理技术规范 NY/T 1468-2007 丝状支原体山羊亚种检测方法 NY 5027 无公害食品 畜禽饮用水水质 NY 5032 无公害食品 畜禽饲料和饲料添加剂使用准则 病死动物无害化处理技术规范 农医发201334号 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。3.1 羊传染性胸膜肺炎（Infectious pleuropneumonia of sheep and goats）又称羊支原体性肺炎（Mycoplasmal pneumonia of sheep and goats），是由多种支原体引起的一种急性或慢性高度接触性传染病。4 诊断 4.1 病原 引起羊传染性胸膜肺炎的病原体主要有山羊支原体山羊肺炎亚种（Mccp）、丝状支原体山羊亚种（Mmc）和绵羊肺炎支原体（Movi），其中，Mccp 和 Mmc 同属于丝状支原体簇，而 Movi 不属于丝状支原体簇。4.2 流行病学 4.2.1 不同品种、年龄、性别的羊均会感染。Mccp 只感染山羊，特别是 3 岁以下的山羊；Mmc 和 Movi对山羊和绵羊均可感染。DB34/T 25122015 2 4.2.2 本病一年四季都可发生和流行，常见于冬春季节。呈地方流行性，接触传染性很强。4.2.3 病羊是主要传染源，其病肺组织和胸腔渗出液中含有大量病原体，主要经呼吸道传播。4.2.4 首次感染羊群发病率可达 80-100，病死率可达 40左右。4.3 临床症状 4.3.1 最急性型 病初体温增高，可达 41-42，食欲废绝，呼吸急促而有痛苦的鸣叫，数小时后出现肺炎症状，呼吸困难，咳嗽，流浆液带血鼻液，肺部叩诊呈浊音，听诊肺泡呼吸音减弱、消失或呈捻发音，黏膜高度充血，发绀，最后窒息死亡。病程一般 4-5 d，短的仅 12-24 h。4.3.2 急性型 最常见。病初体温升高，精神沉郁，采食量逐渐减少，继之出现短而湿的咳嗽，伴有浆液性鼻液。4-5 d 后，咳嗽变干而痛苦，鼻液转为铁锈色的脓性黏液，多在一侧出现胸膜肺炎变化，按压胸壁表现敏感、疼痛，眼有粘液，流泪。头颈伸直，腰背拱起，孕羊大批（70-80）发生流产。最后病羊极度衰弱，有的发生腹泻，甚至口腔中发生溃疡，濒死前体温降至常温以下。病程多为 7-15 d，有的可达 1 个月，不发生死亡的转为慢性。4.3.3 慢性型 多见于夏季。全身临诊症状轻微，体温升至 40左右。病羊间有咳嗽和腹泻，鼻液时有时无，身体衰弱，被毛粗乱无光，部分患羊有轻度瘤胃臌气、慢性眼结膜炎等症状。可持续数月之久。4.4 病理变化 多局限于胸部，呈浆液性和纤维素性肺炎的变化。肺脏发生严重的浸润和明显的肝变，体积显著膨胀，质硬而没有弹性。肺小叶出现各期病变，多色、呈大理石样；纤维素渗出液的充盈使得肺小叶间组织变宽，小叶界限明显，支气管扩张。胸腔积液增多呈淡黄色，暴露于空气后其中有纤维蛋白凝块；胸膜增厚，有黄白色纤维素样物附着，甚至胸膜与肋膜、心包发生粘连，有的与胸壁粘连。4.5 实验室检查 4.5.1 病原分离培养和培养特征 4.5.1.1 病料采集 按照 NY/T 1468-2007 的 2.2 内容进行。4.5.1.2 病原分离 按照 NY/T 1468-2007 的 2.3 内容进行。4.5.1.3 菌落形态 DB34/T 25122015 3 样品在 20马血清马丁肉汤中培养 3-5 d 后，液体培养基变黄，经 0.45 m 滤器过滤，取滤液进行传代，并接种于 20马血清马丁琼脂平板上进行培养，在平板上生长迟缓，4-5 d 后，生长的菌落与微小的水滴相似。用放大镜观察，可见大小悬殊且不很圆整的圆形或椭圆形菌落，Mccp 和 Mmc 的菌落中央乳头状突起明显（煎蛋状），而 Movi 的菌落没有中心脐，呈桑葚状。4.5.1.4 显微镜检查 按照 NY/T 1468-2007 的 2.4.1.2 内容进行。4.5.2 生化特性 凡对毛地黄皂苷敏感，能分解葡萄糖，菌膜菌斑试验阴性，可液化凝固马血清的纯培养物，即可判断为丝状支原体（Mccp 和 Mmc）；凡对毛地黄皂苷敏感，能分解葡萄糖，不水解精氨酸，菌膜菌斑试验阴性，磷酸酶活性测定阳性，不能液化凝固马血清的纯培养物，即可判断为 Movi。具体操作参照 NY/T 1468-2007 的 2.4.2 内容进行。4.5.3 血清学检查 4.5.3.1 间接血凝试验 具体操作方法参照 NY/T 1468-2007 的 3.1 内容进行。4.5.3.2 间接酶联免疫吸附试验（I-ELISA)具体操作方法参照 NY/T 1468-2007 的 3.2 内容进行。4.5.4 PCR 试验 4.5.4.1 样品 DNA 的提取 按照 NY/T 1468-2007 的 2.4.4.1 内容进行。4.5.4.2 PCR 试验 对所有样品同时用丝状支原体簇通用引物和绵羊肺炎支原体特异引物进行检测，每次检测均设相应阳性对照和阴性对照（反应体系用水）。丝状支原体簇通用引物用来检测 Mccp 和 Mmc，退火温度为 62，目的条带为 548 bp。MmF CGAAAGCGGCTTACTGGCTTGTT MmR TTGAGATTAGCTCCCCTTCACAG 绵羊肺炎支原体特异引物用来检测 Movi，退火温度为 55，目的条带为 361 bp。LmF TGAACGGAATATGTTAGCTT LmR GACTTCATCCTGCACTCTGT 反应体系（25 l），2taqmix 12.5ul，ddH2O 8ul，25 uM 的上下游引物各 1 ul，DNA 模板 2.5 l。反应条件，95变性 4 min；94 30s，62（55)30 s，72 45 s，共 33 个循环；72延伸 10 min，PCR 产物 4保存。PCR 产物经 1的琼脂糖凝胶电泳，在对照成立的前提下，被检样品出现 548 bp（361 bp）大小的单一条带，判定为阳性。4.6 结果判定 4.6.1 符合 4.2、4.3 和 4.4 的，判定为疑似羊传染性胸膜肺炎。DB34/T 25122015 4 4.6.2 符合 4.2、4.3 和 4.4 的，同时符合 4.5.1 或 4.5.2 或 4.5.3 或 4.5.4 的，确诊为感染了羊传染性胸膜肺炎。5 预防与控制 5.1 预防 5.1.1 养殖环境 羊场环境质量控制参照 NY/T 1167 的规定执行。5.1.2 饲养管理 5.1.2.1 坚持自繁自养，羊群密度要适中，育肥羊每只约占有 1 建筑面积，育成母羊每只约占有 0.7 建筑面积。加强检疫工作，防止引入或迁入病羊和带菌羊。对购入新羊应隔离观察 30 d，确认健康后方可混群。5.1.2.2 保持羊舍通风、干燥、温暖和清洁。注意天气变化，减少应激，冬春季做好防寒保暖，防止冷风侵袭，夏季要预防汗后吹风淋雨。5.1.2.3 采用自由饮水，水质应符合 NY 5027 的要求。5.1.2.4 饲料应符合 NY 5032 的要求，根据羊的生长阶段配制饲料，供给富含蛋白质、矿物质、维生素的饲料。在冬春季节，应储备足够的草料，避免营养不良。5.1.2.5 各饲养场要控制人员、车辆和物资的出入，严格执行清洁和消毒程序，按照 GB/T 16569 执行。5.1.2.6 及时清除粪便、垫草，按照 NY/T 1168 的规定处理。5.1.3 免疫 5.1.3.1 每年 9 月份，对健康羊群进行预防接种。5.1.3.2 山羊传染性胸膜肺炎灭活疫苗，预防由 Mmc 引起的传染性胸膜肺炎，成年山羊每只 5 mL，6月龄以下羔羊每只 3 mL，颈侧皮下或肌肉注射，免疫期 12 个月。5.1.3.3 绵羊肺炎支原体灭活疫苗，预防绵羊、山羊由 Movi 引起的传染性胸膜肺炎，成年绵羊或山羊每只 3 mL，6 月龄以下羔羊每只 2 mL，颈侧皮下或肌肉注射，免疫期 12 个月。5.1.3.4 山羊支原体肺炎灭活疫苗，可同时预防由 Mmc 和 Movi 引起的传染性胸膜肺炎，每只山羊或绵羊颈部皮下注射 3 mL，免疫期 10 个月。5.1.3.5 对身体瘦弱、体温升高或有慢性疾病的羊不宜注射；对怀孕母羊、羔羊和从异地引进的羊应及时补种。5.1.4 药物预防 在冬春时节、气候骤变时，可选用中草药甘草、荆芥、薄荷、枇杷叶等添加饲料中进行预防，或定期肌注广谱抗菌素如恩诺沙星、壮观霉素等，使用方法按照说明书进行。5.2 控制 5.2.1 隔离 发生疫情时，要对全群进行检查，及时隔离病羊。5.2.2 消毒 DB34/T 25122015 5 对羊舍、用具等进行清洗、消毒，可选用生石灰、烧碱、有机氯制剂、络合碘、季铵盐类等消毒药进行消毒，使用方法按照说明书进行。5.2.3 治疗 5.2.3.1 抗菌消炎，可选用如下药物进行肌注，泰妙菌素、强力霉素、氟苯尼考、泰乐菌素、替米考星、氧氟沙星或丁胺卡那等，使用方法按照说明书进行。支原体易产生耐药性，治疗时要注意药物交替使用和按疗程用药。5.2.3.2 辅助治疗可肌注地塞米松、安乃近或柴胡注射液和内服氨茶碱片或复方甘草合剂片，发挥抗炎、解热和止咳平喘作用。具体使用方法按说明书进行。5.2.4 无害化处理 对病死羊、粪便和污染物等应焚烧、深埋或堆积发酵作无害化处理，按照农医发201334号的规定执行。_