DB32T 1399-2009 氟喹诺酮抗菌药物对鱼类致病菌的药敏检测—倍比稀释法.pdf

DB32/T13992009氟喹诺酮类抗菌药物对鱼类致病菌的药敏检测倍比稀释法1范围本标准规定了氟喹诺酮类抗菌药物对鱼类致病菌的药敏检测一倍比稀释法。本标准适用于氟喹诺酮类抗菌药物（环丙沙星、左氧氟沙星、加替沙星、罗美沙星、诺氟沙星、氧氟沙星、依诺沙星、格帕沙星、氟罗沙星等)对鱼类致病菌的药敏检测。在Mueller Hinton液体培养基中无法生长的致病菌不适用于本标准。2规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标淮的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法。GB/T4789.28-2006食品卫生微生物学检验染色法、培养基和试剂。3术语和定义下列术语和定义适用本标准3.1最低抑菌浓度，MIC(Minimal Inhibitory Concentration,MIC)药物能抑制细菌生长的最低浓度，为细菌药物敏感性重要指标。3.2鱼类致病菌fish disease能引起鱼体疾病的病原菌，如嗜水气单胞菌等。4测定方法4.1方法原理用Mueller-一Hinton肉汤培养液将氟喹诺酮类药物按照倍比稀释的方法稀释成系列浓度梯度，置于812孔聚苯乙烯微量稀释板中，加入经标准化稀释的鱼类致病菌，经培养孵化一定时间后，测定抗菌药物的MIC,了解病原菌对药物的敏感性。4.2仪器设备4.2.1恒温培养箱：361，42，调整水平位置（隔层要求水平）。4.2.2高压灭菌锅。4.2.3培养皿：内径90mm0.5mm,高26mm,皿底平整光滑，厚薄均匀，无凹凸现象。4.2.4移液器(Eppendorf,0.1L2.5L、2L20L、20L200L)。4.2.5812孔聚苯乙烯微量稀释板。4.2.6pH测量仪(METTLER TOLED0).4.2.7超净工作台1