ICS11.020CCSC0522吉林省地方标准DB22/T3224—2021EGFR基因突变检测PCR技术规范EGFRMutationDetectionPCRTechnologyStandard2021-04–16发布2021-05-01实施吉林省市场监督管理厅发布DB22/T3224—2021I前言本文件按照GB/T1.1—2020《标准化工作导则第1部分：标准化文件的结构和起草规则》的规定起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别专利的责任。本文件由吉林省卫生健康委员会提出并归口。本文件起草单位：吉林大学本文件主要起草人：姜艳芳、何佳雪、张鹏、刘思文、刘勇、邹红雁、胡馨元、胡欣彤。DB22/T3224—20211EGFR基因突变检测PCR技术规范1范围本文件规定了EGFR基因突变检测的样本要求、检测方法、生物安全要求、材料与试剂、数据处理、结果判定、废弃物处理与防止污染的措施。本文件适用于荧光PCR法检测组织样本中EGFR基因特定突变。2规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法GB19489实验室生物安全通用要求SN/T1193基因检验实验室技术要求3术语和定义本文件没有需要界定的术语和定义。4缩略语下列缩略语适用于本文件。EGFR表皮生长因子受体（EpidermalGrowthFactorReceptor）ctDNA循环肿瘤脱氧核糖核酸（CirculatingTumorDeoxyriboNucleicAcid）FFPE福尔马林固定石蜡包埋组织（Formalin-FixedandParrffin-Embedded）NTC无模板对照（NoTemplateControl）5生物安全要求采样及检测过程所涉及的实验操作应按GB19489规定执行。6材料与试剂仪器与耗材6.16.1.1II级生物安全柜。6.1.2涡旋混合仪。6.1.3恒温加热器（56℃～90℃可调）。6.1.4恒温水浴锅（可达60℃）。DB22/T3224—202126.1.5微量移液器：10µL、100µL、200µL、1000µL。6.1.6微量带滤芯吸头：10µL、100µL、200µL、1000µL。6.1.7医用冰箱：2℃～8℃、-20℃、-80℃。6.1.8离心机：10mL转子，转速不低于10000g/min，可低温离心。6.1.9离心机：1.5mL转子，转速不低于13000g/min，可低温离心。6.1.10实时荧光定量PCR仪。6.1.11离心管：200µL、1.5mL、2mL、10mL、15mL。试剂6.26.2.1除另有规定，本方法试验用水应符合GB/T6682规定的二级水，所用化学试剂均为分析纯。6.2.2核酸提取试剂。6.2.3荧光PCR试剂。6.2.4无水乙醇。6.2.5异丙醇。6....
