ICS65.120B05DB41河南省地方标准DB41/T1729—2018饲料添加剂葡萄糖氧化酶活力的测定分光光度法2018-11-26发布2019-02-26实施河南省质量技术监督局发布河南省地方标准公共服务平台DB41/T1729—2018前言本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。本标准由河南省畜牧局提出并归口。本标准起草单位:河南海瑞正检测技术有限公司、河南牧业经济学院、河南省粮油饲料产品质量监督检验中心、河南省兽药饲料监察所、河南省粮油科学研究所有限公司。本标准主要起草人:李贤、曹明月、文英会、侯林丛、高海军、魏广辉、谭旭信、刘文杰、周江滨、王莉莉。河南省地方标准公共服务平台DB41/T1729—20181饲料添加剂葡萄糖氧化酶活力的测定分光光度法1范围本标准规定了测定饲料添加剂葡萄糖氧化酶活力的分光光度方法。本标准适用于饲料添加剂、混合型饲料添加剂及其复合酶。本方法的定量限为60U/g。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法3术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1葡萄糖氧化酶活力在30℃、pH为6.0的条件下，每分钟能把1μmol的葡萄糖氧化成β-D-葡萄糖酸和过氧化氢所需的酶量，定义为一个葡萄糖氧化酶活力单位（U）。4原理在葡萄糖氧化酶的作用下，葡萄糖发生氧化反应，生成葡萄糖酸和过氧化氢，过氧化氢与无色的还原型4-氨基安替比林和苯酚在辣根过氧化物酶的催化作用下，生成红色的醌亚胺，生成醌亚胺的量与反应液中葡萄糖氧化酶的活力成正比。通过分光光度计比色测定反应液的吸光度，计算出葡萄糖氧化酶的活力。5试剂或材料5.1磷酸缓冲溶液（pH6.0）:分别称取12.1g一水磷酸二氢钠和2.189g（精确至0.001g）二水磷酸氢二钠，加入约800mL水，完全溶解后调节pH为6.0±0.02，定容至1000mL。5.2葡萄糖溶液（180g/L）:称取18.0g无水葡萄糖，用磷酸缓冲液（5.1）溶解，定容至100mL。5.34-氨基安替比林溶液（50g/L）:称取5g4-氨基安替比林（精确至0.001g），加水溶解，定容至100mL，棕色试剂瓶存放。5.4苯酚溶液（11g/L）:称取1.1g苯酚（精确至0.001g），加水溶解，定容至100mL。5.5辣根过氧化物酶（HRP）液:称取0.0015g（精确至0.0001g）辣根过氧化物酶于5mL离心管中，加入3mL水溶解，备用。注：除非另有说明，试剂均为分析纯，水为GB/T6682中规定的三级水。6仪器设备河...
