DB61T 1262-2019 反刍动物全混合日粮中碳水化合物平衡指数（CBI）的测定.pdf

ICS 07.100.01 B 20 DB61 陕西省地方标准 DB 61/T 12622019 反刍动物全混合日粮中碳水化合物 平衡指数（CBI）的测定 Determination of carbohydrate balance index(CBI)for（此处改为 ruminal）total mixed rations 2019-08-23 发布 2019-09-23 实施陕西省市场监督管理局 发 布 DB61/T 12622019 I 目 次 前 言.II1 范围.12 规范性引用文件.13 术语和定义.14 试剂.25 仪器设备.26 测定步骤.27 计算.38 精密度.69 试验报告.6 DB61/T 12622019 II 前 言 本标准按照GB/T 1.12009规则起草。本标准由陕西省农业农村厅提出并归口。本标准起草单位：西北农林科技大学、杨凌现代农业产业标准化推广服务中心。本标准主要起草人：曹阳春、姚军虎、蔡传江、徐秀容、龚月生、雷新建、杨静。本标准由西北农林科技大学负责解释。本标准首次发布。联系信息如下：单位：西北农林科技大学 电话：029-87092102 地址：陕西省杨凌农业高新技术产业示范区西农路22号 邮编：712100 DB61/T 12622019 1 反刍动物全混合日粮中碳水化合物平衡指数（CBI）的测定 1 范围 本标准规定了反刍动物全混合日粮中碳水化合物平衡指数测定的术语和定义、试剂和溶液、仪器设备、测定步骤、计算、重复性的要求。本标准适用于反刍动物全混合日粮中碳水化合物平衡指数的测定。2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T 6435 饲料中水分的测定 GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法 GB/T 14699.1 饲料 采样 GB/T 20194 动物饲料中淀粉含量的测定 旋光法 GB/T 20195 动物饲料 试样的制备 GB/T 20806 饲料中中性洗涤纤维（NDF）的测定 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。3.1 中性洗涤纤维 neutral detergent fiber，NDF 用中性洗涤剂去除饲料中的脂肪、淀粉、蛋白质和糖类等成分后，残留的不溶解物质的总称。3.2 物理有效因子 physical effectiveness factor，pef 衡量反刍动物全混合日粮物理有效性的指标。3.3 物理有效中性洗涤纤维 physical effectiveness neutral detergent fiber，peNDF 反刍动物全混合日粮中纤维含量、颗粒大小等物理性质可以影响反刍动物咀嚼活动和瘤胃固液两相内容物分层的那部分中性洗涤纤维。3.4 瘤胃降解淀粉 ruminal degradable starch，RDS 反刍动物全混合日粮在瘤胃中可被降解的淀粉。DB61/T 12622019 2 3.5 宾州颗粒度分级筛 penn state particle separator，PSPS 用于测定粗饲料或全混合日粮粒度大小的专用筛。3.6 碳水化合物平衡指数 carbohydrate balance index，CBI 反刍动物全混合日粮中物理有效中性洗涤纤维与瘤胃降解淀粉的比值。4 试剂 4.1 本标准中所用水应符合 GB/T 6682 中的二级水，化学试剂为分析纯。4.2 十二烷基硫酸钠（C12H25NaSO4）。4.3 乙二胺四乙酸二钠（C10H14N2O8Na22H2O，EDTA 二钠盐）。4.4 四硼酸钠（Na2B4O710H2O）。4.5 无水磷酸氢二钠（Na2HPO4）。4.6 乙二醇乙醚（C4H10O2）。4.7 正辛醇（C8H18O，消泡剂）。4.8 丙酮（CH3COCH3）。4.9 乙醇（C2H5OH）。4.10 甲基红。4.11 盐酸（HCl）。4.12 Carrez 澄清溶液，按 GB/T 20194 制备。4.13 蔗糖（C12H22O11）。4.14 中性洗涤剂（3%十二烷基硫酸钠溶液），按 GB/T 20806 制备。5 仪器设备 5.1 植物样品粉碎机。5.2 尼龙袋：35m50m。5.3 电子天平：分度值 0.001g 和 0.0001g。5.4 电热恒温箱。5.5 高温电阻炉。5.6 消煮器：冷凝球 600mL 高型烧杯或冷凝管三角烧瓶。5.7 抽滤装置：抽滤瓶和真空泵。5.8 宾州颗粒度分级筛（4 层）。5.9 pH 计：准确至 0.1pH 单位。5.10 旋光仪:准确至 0.01，适合使用 200mm 长旋光管。6 测定步骤 6.1 样品采集与制备 6.1.1 样品采集按 GB/T 14699.1 执行。DB61/T 12622019 3 6.1.2 试样制备按 GB/T 20195 执行。6.2 样品测定 6.2.1 中性洗涤纤维含量测定 将采集的鲜样用四分法缩分至500g左右。65烘干48h或风干。用植物粉碎机将样品粉碎至过孔径为0.42mm试验筛（40目），封入样品袋，用于测定中性洗涤纤维含量，按GB/T 20806执行。6.2.2 物理有效因子测定 6.2.2.1 宾夕法尼亚筛准备 根据筛网孔径由大至小（19.0mm、8.0mm和4.0mm）自上而下依次排列，底盘位于最底层，组装宾夕法尼亚筛至工作状态。6.2.2.2 取样与测定 将采集的鲜样用四分法缩分至2000g左右。准确称取500g全混合日粮鲜样置于19.0mm筛网上，筛子水平震荡每个方向5次，共40次，震荡频率1.1赫兹，每次水平移动距离大于17cm，水平移动时不应有垂直运动。分别称量19.0mm、8.0mm和4.0mm分级筛筛上和底盘上的饲料质量，并测定各层饲料干物质含量。6.2.3 干物质测定 水分测定按GB/T 6435执行，根据水分含量计算出干物质含量。6.2.4 饲料淀粉含量测定 6.2.4.1 样品制备 将采集的鲜样用四分法缩分至50g左右，65烘干48h，粉碎至通过0.50mm孔筛,备用。6.2.4.2 含量测定 淀粉含量按GB/T 20194执行。6.2.5 瘤胃降解淀粉测定 6.2.5.1 样品制备 将采集的鲜样用四分法缩分至50g左右，65烘干48h，粉碎至通过0.50mm孔筛,混匀装于密封容器；称取2.5g装入网眼直径为35m50m的尼龙袋中。将尼龙袋夹在一根长约12cm的半软性塑料管上，用橡皮筋紧紧缠住，于饲后1h放入安装有永久性瘤胃瘘管的动物瘤胃腹囊处，管的另一端用尼龙绳挂在瘘管塞上。每头动物瘤胃内放数根管,每根管放置时间间隔2h，每时间点至少放入2个平行袋及1个空白袋。24h后取出的尼龙袋连塑料管立即在自来水下冲洗至水无色，然后放入自来水中浸泡55min，再在中等流速的自来水下漂洗1min；水洗后的尼龙袋置于65烘箱中烘干48h，备用。6.2.5.2 含量测定 淀粉含量按GB/T 20194执行。7 计算 DB61/T 12622019 4 7.1 物理有效中性洗涤纤维 4.0（peNDF4.0）的计算 7.1.1?.?等于停留在 19.0mm、8.0mm 和 4.0mm 分级筛上的饲料颗粒干物质质量之和除以分级筛样品总干物质量，计算公式见（1）。?.?.?.?.?.(1)式中：?.?停留在4.0 mm及以上孔径分级筛上的饲料颗粒的物理有效因子；?.?停留在19.0mm分级筛上的饲料颗粒干物质，（g）；?.?停留在8.0mm分级筛上的饲料颗粒干物质，（g）；?.?停留在4.0mm分级筛上的饲料颗粒干物质，（g）；?筛分样品总干物质，（g）。7.1.2?.?等于饲料?含量与?.?的乘积，计算公式见（2）。?.?.?.(2)式中：?.?停留在4.0mm及以上孔径分级筛上的饲料颗粒的物理有效中性洗涤纤维含量，（%）；?饲料干物质中中性洗涤纤维的含量，（%）；?.?停留在4.0 mm及以上孔径分级筛上的饲料颗粒的物理有效因子。7.2 物理有效中性洗涤纤维 8.0（?.?）的计算 7.2.1?.?等于停留在 19.0mm 和 8.0mm 分级筛上的饲料颗粒干物质量之和除以分级筛样品总干物质量，计算公式见（3）。?.?.?.?.(3)式中：?.?停留在8.0mm及以上孔径分级筛上的饲料颗粒的物理有效因子。?.?停留在19.0mm分级筛上的饲料颗粒干物质，（g）；?.?停留在8.0mm分级筛上的饲料颗粒干物质，（g）；?筛分样品总干物质，（g）。7.2.2?.?等于饲料?含量与?.?的乘积，计算公式见（4）。?.?.?.(4)式中：?.?停留在8.0mm及以上孔径分级筛上的饲料颗粒的物理有效中性洗涤纤维含量，（%）；?饲料干物质中中性洗涤纤维的含量，（%）；?.?停留在8.0mm及以上孔径分级筛上的饲料颗粒的物理有效因子。7.3 淀粉含量的计算 淀粉含量?计算公式见（5）。?.?.(5)式中:?试样中淀粉含量，（g/kg）；DB61/T 12622019 5?测定的总旋光度值，（）；?测定的乙醇溶解物的旋光度值，（）；?测定总旋光度时样品的质量,（g）；?测定乙醇溶解物旋光度时样品的质量,（g）；?波长为589.3nm（钠光谱D线）处测定纯淀粉比旋度的数值。7.4 瘤胃降解淀粉（RDS）的计算 7.4.1 淀粉在不同时间的降解率?计算公式见?（6）。?100%.(6)式中：?某时间点全混合日粮瘤胃淀粉降解率，（%）；?全混合日粮中淀粉含量，（g/kg）；?某时间点全混合日粮瘤胃降解残渣中淀粉含量，（g/kg）。7.4.2 淀粉降解参数?、?、?计算公式见（7）。?（1?）.(7)式中：?某时间点全混合日粮瘤胃淀粉降解率，（%）；?全混合日粮中淀粉快速降解部分，（%）；?全混合日粮中淀粉慢速降解部分，（%）；?部分的降解速率，（%/h）；?全混合日粮在瘤胃中停留时间，（h）。7.4.3 淀粉有效降解率?计算公式见（8）。?.(8)式中：?全混合日粮淀粉有效降解率，（%）；?全混合日粮中淀粉快速降解部分，（%）；?全混合日粮中淀粉慢速降解部分，（%）；?部分的降解速率，（%/h）；?全混合日粮瘤胃外流速率常数，（%/h）。7.4.4 瘤胃降解淀粉?等于全混合日粮淀粉含量?与淀粉有效降解率?的乘积，计算公式见（9）。?.(9)式中：?全混合日粮中瘤胃降解淀粉，（%）；?全混合日粮中淀粉含量，（g/kg）；?全混合日粮淀粉有效降解率，（%）。7.5 碳水化合物平衡指数4.0（?.?）的计算?.?等于?.?除以?，计算公式见（10）。?.?.?.(10)DB61/T 12622019 6 式中：?.?停留在4.0mm及以上孔径分级筛上的饲料颗粒的碳水化合物平衡指数；?.?停留在4.0mm及以上孔径分级筛上的饲料颗粒的物理有效中性洗涤纤维含量，（%）；?全混合日粮中瘤胃降解淀粉，（%）。7.6 碳水化合物平衡指数8.0（?.?）的计算?.?等于?.?除以?，计算公式见（11）。?.?.?.(11)式中：?.?停留在8.0mm及以上孔径分级筛上的饲料颗粒的碳水化合物平衡指数；?.?停留在8.0mm及以上孔径分级筛上的饲料颗粒的物理有效中性洗涤纤维含量，（%）；?全混合日粮中瘤胃降解淀粉，（%）。8 精密度 8.1 重复性 用相同的方法，对同一试样，在同一实验室内，由同一操作人员用相同的设备，在短时间内得到的两个独立的试验结果误差不超过10%。8.2 再现性 用相同的方法，对同一试样，在不同的实验室内，由不同的操作人员，用不同的设备得到的两个独立的试验结果误差不大于10%。9 试验报告 试验报告应详细说明:鉴别样品所必需的信息；如果已知采样方法，应说明使用的采样方法；采用的测定方法；所有本标准未规定的、或认为是非强制性的、以及可能影响测定结果的全部细节；获得的测定结果，如果检查了重复性则提供两个测定结果。_