ICS71.100.70Y42DB37山东省地方标准DB37/T3309—2018化妆品中维生素D2和维生素D3测定高效液相色谱法DeterminationofVitaminD2andVitaminD3inCosmeticbyHighPerformanceLiquidChromatography2018-06-12发布2018-07-12实施山东省质量技术监督局发布DB37/T3309—2018前言本标准按照GB/T1.1-2009给出的规则起草。本标准由山东省质量技术监督局提出。本标准由山东化工标准化技术委员会归口。本标准起草单位：山东省产品质量检验研究院、山东福瑞达生物工程有限公司。本标准主要起草人：朱海荣、焦毅、商姗姗、田静、刘金凤、王灵玺、王东岳、刘鹏飞、赵丽芳、周莉莉、姜金华、张娟、杨素珍。IDB37/T3309—2018化妆品中维生素D2和维生素D3测定高效液相色谱法1范围本标准规定了化妆品中维生素D2、维生素D3的高效液相色谱法。本标准适用于化妆品中维生素D2、维生素D3的检测。本方法取样量为0.5g时，维生素D2检出浓度为3.6mg/kg，最低定量浓度为10mg/kg。维生素D3检出浓度为1.8mg/kg，最低定量浓度为5mg/kg。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法3方法提要3.1维生素D2和维生素D3在265nm处有紫外吸收，可用反相高效液相色谱法分离，并根据保留时间和紫外光谱图定性，外标法定量。3.2试剂和溶液除另有说明外，所用试剂均为色谱纯，水为GB/T6682规定的一级水。4试剂和材料4.1甲醇。4.2乙腈。4.3维生素D2：纯度≥99.0%。4.4维生素D3：纯度≥99.0%。4.5混合标准储备溶液：分别准确称取维生素D20.1000g及维生素D30.2000g，移入100mL容量瓶中，用甲醇（4.1）溶解并定容至刻度，摇匀，作为标准储备溶液。避光保持，保存期不超过2周。5仪器与设备5.1高效液相色谱仪：紫外或二极管阵列检测器。5.2紫外分光光度计。5.3超声波清洗器。5.4分析天平：感量0.0001g。5.5有机相微孔滤膜：0.45μm。6分析步骤1DB37/T3309—20186.1样品预处理称取样品约0.5g（精确至0.0001g）于10mL具塞比色管中，用流动相定容至刻度，摇匀，超声提取30min。经0.45μm有机相微孔滤膜过滤，滤液作为待测样液。6.2色谱参考条件6.2.1色谱柱：C18柱，250mm×4.6mm，5μm。6.2.2检测器：二极管阵列检测器。6.2.3检测波长：265nm。6.2.4流动相：甲醇+乙腈=90+10（HPLC分析前，经0.45μm滤膜过滤及真空脱气）。6.2.5...
