SNT 2497.18-2010 进出口危险化学品安全试验方法 第18部分：DNA加合物的检测方法.pdf

书书书中华人民共和国出入境检验检疫行业标准犛 犖犜 进出口危险化学品安全试验方法第 部分：犇 犖 犃加合物的检测方法犜 犲 狊 狋犿 犲 狋 犺 狅 犱狅 犳 犻 犿 狆 狅 狉 狋 犪 狀 犱犲 狓 狆 狅 狉 狋犱 犪 狀 犵 犲 狉 狅 狌 狊 犮 犺 犲 犿 犻 犮 犪 犾 狊犘 犪 狉 狋 ：犇 犲 狋 犲 犮 狋 犻 狅 狀犿 犲 狋 犺 狅 犱狅 犳犇 犖 犃犪 犱 犱 狌 犮 狋 发布 实施中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发 布书书书前言 进出口危险化学品安全试验方法 系列标准共分为 部分：第部分：体内哺乳动物肝细胞程序外 合成（）试验；第部分：空斑形成细胞（）试验；第部分：大型溞繁殖试验；第部分：酿酒酵母有丝分裂重组试验；第部分：睾丸细胞 试验；第部分：哺乳类动物细胞姐妹染色单体互换体外试验；第部分：小鼠耳肿胀试验；第部分：腘窝淋巴结试验；第部分：血清溶血素测定试验；第 部分：淋巴细胞增殖功能测定试验；第 部分：种系突变试验；第 部分：单细胞凝胶电泳分析试验；第 部分：荧光原位杂交试验；第 部分：聚丙烯酰胺凝胶电泳试验；第 部分：实验；第 部分：实验；第 部分：哺乳动物行为毒理学试验；第 部分：加合物的检测方法；第 部分：实验；第 部分：法测定蛋白质含量；第 部分：琼脂糖凝胶电泳试验；第 部分：的 值测定方法；第 部分：细胞器的分离实验方法；第 部分：细胞免疫功能体外检测方法；第 部分：体液免疫功能试验；第 部分：巨噬细胞功能试验；第 部分：流式细胞术检测凋亡；第 部分：穿梭质粒在突变检验中的应用；第 部分：生化需氧量（）测定。本部分为 系列标准的第 部分。本部分由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本部分负责起草单位：中华人民共和国天津出入境检验检疫局，中华人民共和国湖南出入境检验检疫局。本部分主要起草人：于艳军、王利兵、赵好力宝、赵黎华、韩伟、熊中强。本部分系首次发布的出入境检验检疫行业标准。犛 犖犜 进出口危险化学品安全试验方法第 部分：犇 犖 犃加合物的检测方法范围 的本部分规定了进出口危险化学品 加合物检测方法的主要试剂和材料、主要仪器设备、试验步骤和试验结果。本部分适用于 后标记法检测进出口危险化学品引起的 加合物。术语、定义和缩略语 术语和定义下列术语和定义适用于本部分。犇 犖 犃加合物犇 犖 犃犪 犱 犱 狌 犮 狋 加合物就是亲电性的化合物或其代谢产物与 形成共价相联的化合物，是 化学损伤的主要形式之一。缩略语下列缩略语适用于本部分。犇 犖 犃脱氧核糖核酸原理含有加合物的 链在核酸内、外切酶的作用下降解为 单磷酸核苷，用核酸酶（或）处理 单磷酸核苷，正常的 单磷酸核苷被去磷酸化，而具有加合物的 单磷酸核苷可以抵抗这一作用。在特异的 多核苷酸激酶的作用下，的磷酸根基团转移到具有加合物的核苷酸的 羟基末端，形成 二磷酸核苷，通过检测 的量对 损伤产生的加合物进行定量。主要试剂和材料除另有规定外，所有试剂均为分析纯，实验用水为灭菌蒸馏水或超纯水。内切酶。外切酶。核酸酶。多核苷酸激酶。多核苷酸激酶缓冲液：，二硫化苏糖醇，精脒，值。板（反相吸附薄层色谱板）。板（阴离子交换薄层色谱板）。主要仪器设备 紫外分光光度计。犛 犖犜 液闪计数仪。试验步骤 犇 犖 犃的消化取（）溶解液，加入适当内切酶、外切酶和缓冲液，置于 水浴（），然后加入适量 核酸酶，继续孵育 。同位素标记在 多核苷酸激酶催化下加约 左右的 ，在 多核苷酸激酶缓冲液存在下 反应 ，然后加入腺苷三磷酸双酶继续孵育 ，以水解多余的 。加合物的分离利用 加合物和 水解物色谱性能的差异，将样品点在 板上，分离加合物和正常核酸，还可选用 板分离不同的加合物。犇 犖 犃加合物的定量根据放射自显影 加合物的位置，将 纤维薄膜上有放射活性斑块的纤维素用小刀刮下，并放有 闪烁液的闪烁瓶中，在液闪计数仪上测定放射性。试验结果 加合物相对标记值 按式（）计算：（狀 ）（）式中：加合物斑点数；的比活度（）；狀 试验用 样品量；。犛 犖犜 书书书犜犖犛中华人民共和国出入境检验检疫行业标准进出口危险化学品安全试验方法第 部分：犇 犖 犃加合物的检测方法 中 国 标 准 出 版 社 出 版北京复兴门外三里河北街 号邮政编码：网址 电话：中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷开本 印张 字数千字 年月第一版 年月第一次印刷印数 书号：定价 元