DB33T 459-2003 饲料添加剂 饲料用复合酶制剂.doc

DB33/T ××××—2003 DB33 浙江省质量技术监督局　 发布 2004-01-01实施 2003-12-09发布 饲料添加剂 饲料用复合酶制剂 Feed additives Complex enzymatic preparation for feed DB33/T 459—2003 浙江省地方标准 ICS 65.120 B 46 备案号：14778-2004 XIX DB33/T 459—2003 目 次 前言 III 引言 IV 1 范围 1 2 规范性引用文件 1 3 术语和定义 1 4 产品分类、酶种范围及安全性 2 5 要求 2 6 试验方法 3 7 检验规则 4 8 标志、标签 5 9 包装、运输、贮存 5 A.1 原理 6 A.2 试剂和溶液 6 A.3 仪器和设备 7 A.4 测定步骤 7 A.5 酶活力计算 8 A.6 精密度 8 附录B 9 B.1 原理 9 B.2 试剂和溶液 9 B.3 仪器和设备 9 B.4 测定步骤 10 B.5 酶活力计算 11 B.6 精密度 11 附录C 12 C.1 原理 12 C.2 试剂和溶液 12 C.3 仪器和设备 12 C.4 测定步骤 13 C.5 酶活力计算 14 C.6 精密度 14 附录D 15 D.1 原理 15 D.2 试剂和溶液 15 D.3 仪器和设备 15 D.4 测定步骤 16 D.5 酶活力计算 17 D.6 精密度 17 附录E 18 E.1 国际酶活力单位 18 E.2 轻工部行业标准酶活力单位 18 E.3 国内其它资料酶活力单位 19 III 前 言 本标准的附录A、附录B、附录C、附录D为规范性附录，附录E为资料性附录。 本标准由浙江省饲料与动物保健品协会提出。 本标准由浙江省饲料工业标准化技术委员会归口。 本标准负责起草单位：浙江省农业科学院植物保护与微生物研究所。 本标准参加起草单位：浙江省饲料监察所、浙江王景宝饲料股份有限公司、长兴蓝鑫生物技术有限公司、长兴大洋生物饲料有限公司。 本标准主要起草人：许尧兴、楼洪兴、方阿庆、苏卫琴、王有良、宣士荣、汪刚。　 引 言 本标准是针对以微生物发酵法生产、含有二种或二种以上主要功效酶成分、经配置而成的饲料用复合酶制剂。 考虑到市场上的饲料用复合酶制剂品种繁多，等级不一，酶活标示方法各不相同，故制定本标准，以统一我省饲料用复合酶制剂中主要酶系的酶活力单位定义，相关酶系的酶活力测定方法的及产品中各种酶的最低酶活指标，便于科研、生产、销售和使用单位的相互交流和使用。 产品分类中，饲料用复合酶制剂根据畜禽种类和日粮类型不同而分为通用、猪用、禽用及水产动物用几种类型。而每种类型又可根据具体的日粮或畜禽生长阶段细分成若干种类型。适用本标准中饲料用复合酶制剂的主要酶种有：酸性蛋白酶、中性蛋白酶、木聚糖酶、β-葡聚糖酶和纤维素酶。本标准特别强调了饲料用复合酶制剂的安全性，指出：由发酵法，特别是固体发酵法生产获得的饲料用复合酶的酶源，需说明相应酶种的产生菌种及安全性。采用的产酶菌种应是我国农业部105号公告公布的允许使用的12种饲料级微生物菌种，或应符合食品添加剂使用的菌株为酶源的发酵菌株。 附录A所述的“蛋白酶活力测定方法”是参照轻工部行业标准QB 1805《工业用蛋白酶制剂》的有关规定执行。附录B、附录C、附录D是通过测定几种非淀粉多糖酶（木聚糖酶、β－葡聚糖酶、纤维素酶）分解相应底物生成的还原糖来反映几种酶的总酶活力。附录E是资料性附录，将本标准中几种非淀粉多糖酶的酶活力与国际酶活力及国内其它单位表示方法所获得的酶活力之间的换算。生产者和使用者可根据不同产品酶活力表示方法，进行相互换算，以资比较。 由于饲料用酶制剂基本上采用微生物发酵生产，酶系组成、相关浓度和化学结构的不确定性，以及作用底物（饲料原料）的多样性，各种终产物的不断形成及反馈控制等因素的影响，因此，各实验室严格按照标准规定的底物、pH、反应时间与温度等条件操作是十分重要的。 本标准的卫生指标部分参照了FAO/WHO下属的JECF食品添加剂纲要第一卷中食品工业用酶制剂通则中的“卫生指标”,以及国家轻工部行业标准《工业用酶制剂通用试验方法》中有关食品级酶制剂的卫生指标；本标准酶活力的测定，参考了国家有关行业推荐的方法及国内外、省内外相关企业标准的测定方法和国内外相关资料，通过反复试验，修改而成。 饲料添加剂 饲料用复合酶制剂 1　 范围 本标准规定了饲料添加剂饲料用复合酶制剂的术语和定义、产品分类、要求、试验方法、检验规则和标志、标签、包装、运输、贮存条件。 本标准适用于在浙江省境内生产、销售、使用的饲料用复合酶制剂产品。 2　 规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。 GB/T 191-2000 包装、储运、图示标志 GB/T 5917-1986　配合饲料粉碎粒度测定方法 GB/T 6435-1986　饲料水分的测定方法 GB 10648 饲料标签 GB/T 13079－1999　饲料中总砷的测定 GB/T 13080－1991 饲料中铅的测定方法 GB/T 13082－1991 饲料中镉的测定方法 GB/T 13091-2000 饲料中沙门氏菌的检测方法 GB/T 17480－1998　饲料中黄曲霉毒素B1的测定　酶联免疫吸附法 GB/T 18869-2002 饲料中大肠菌群的测定 QB/T 1803　工业用酶制剂通用试验方法　 国家技术监督局(1995)第43号令《定量包装商品计量监督规定》 3　 术语和定义 下列术语、定义适用于本标准。 3.1　 饲料用酶制剂 Enzymatic Preparation for Feed 饲料用酶制剂是通过产酶微生物发酵工程或含酶动、植物组织提取技术生产加工而成，具有一种或 几种底物清楚的酶催化活性，有助于改善动物对饲料营养成分的消化、吸收等，并有生物学评定依据，符合安全性要求，作饲料添加剂用的酶制剂产品。 3.2　 饲料用复合酶制剂 Complex Enzymatic Preparation for Feed 产品中含有二种或二种以上主要功效酶成分，这些酶是依据饲料原料和动物消化生理不同而特定复 配，对饲料中多种成分具有酶催化作用的饲料用酶制剂。 3.3　 原料酶 Material Enzyme 以微生物为产酶菌种，采用固体发酵工程途径生产，经低温干燥所获得的、未添加任何其它载体的固体酶曲，定义为原料酶。 3.4　 酶活单位 Enzymatic Unite 根据作用底物的不同，对饲料用复合酶中相关酶种的酶活单位作如下定义。 3.4.1　 蛋白酶 Protanase 在（40±0.2）℃、相应的pH条件下(酸性蛋白酶pH3.5,中性蛋白酶pH7.0)，在1min内水解酪蛋白底物，产生相当于1微克酚类化合物（由酪氨酸等同物表示）的酶量，为1个酶活单位，以u/g(u/ml)表示。 3.4.2　 木聚糖酶 Xylanse 在（40±0.2）℃、pH 5.0条件下，在1min内水解木聚糖底物，产生相当于1微克木糖的还原糖的酶量，为1个酶活单位，以u/g(u/ml)表示。 3.4.3　 β-葡聚糖酶 β-glucanase 在（40±0.2）℃、pH 5.0条件下，在1min内水解β-葡聚糖底物，产生相当于1微克葡萄糖的还原糖的酶量，为1个酶活单位，以u/g (u/ml)表示。 3.4.4　 纤维素CMC酶 Cellulase 在（40±0.2）℃、pH 4.2条件下，在1min内水解羧甲基纤维素钠底物，产生相当于1微克葡萄糖的还原糖的酶量，为1个酶活单位，以u/g(u/ml)表示。 4　 饲料用复合酶制剂的分类、酶种范围及安全性 4.1　 饲料用复合酶制剂的分类 饲料用复合酶制剂根据畜禽种类和日粮类型不同而分为通用、猪用、禽用及水产动物用几种类型。而每种类型又可根据具体的日粮或畜禽生长阶段细分成若干种类型(详见表1)。 4.2　 饲料用复合酶制剂的酶种范围 适用本标准中饲料用复合酶制剂的主要酶种有：酸性蛋白酶、中性蛋白酶、木聚糖酶、β-葡聚糖酶和纤维素酶。其它酶种可根据需要适当调整。 4.3　 饲料用复合酶制剂的安全性 由发酵法，特别是固体发酵法生产获得的饲料用复合酶的酶源，需说明相应酶种的产生菌种及安全性。采用的产酶菌种应是我国农业部105号公告公布的允许使用的12种饲料级微生物菌种，或应符合食品添加剂使用的菌株为酶源的发酵菌株。 5　 　要求 5.1　 感官指标 色泽均匀，无发霉变质、结块及异味异嗅。 5.2　 酶活力指标 饲料用复合酶产品中的酶系及酶活力指标应符合表1规定。表中所示酶活力指标为产品中最低酶活力指标（以该酶制剂产品在饲料中添加量0.1%计，若添加量大于或小于0.1%,其产品中的相应酶活可适当降低或增加）。 表1　饲料用复合酶制剂的酶活力指标 产 品 型 号 产 品 成 份 标 签 值(u/g) 通用小麦型复合酶 酸性蛋白酶≥1000 木聚糖酶≥25000 β-葡聚糖酶≥5000 纤维素酶≥2500 通用玉米型复合酶 酸性蛋白酶≥2000 木聚糖酶≥10000 β-葡聚糖酶≥5000 纤维素酶≥1500 通用稻谷型复合酶 酸性蛋白酶≥1000 木聚糖酶≥15000 纤维素酶≥3500 --- 乳仔猪用复合酶 酸性蛋白酶≥2500 木聚糖酶≥10000 中性蛋白酶≥1000 纤维素酶≥1000 猪用玉米型复合酶 酸性蛋白酶≥2000 木聚糖酶≥10000 β-葡聚糖酶≥10000 纤维素酶≥2000 猪用小麦型复合酶 酸性蛋白酶≥1500 木聚糖酶≥25000 β-葡聚糖酶≥10000 纤维素酶≥2500 猪用大麦型复合酶 酸性蛋白酶≥1000 木聚糖酶≥10000 β-葡聚糖酶≥20000 纤维素酶≥2000 禽用玉米型复合酶 酸性蛋白酶≥2000 木聚糖酶≥15000 β-葡聚糖酶≥10000 纤维素酶≥1200 禽用小麦型复合酶 酸性蛋白酶≥1000 木聚糖酶≥20000 β-葡聚糖酶≥10000 纤维素酶≥2000 肉鸡用复合酶 酸性蛋白酶≥1500 木聚糖酶≥15000 β-葡聚糖酶≥10000 纤维素酶≥1500 蛋鸡用复合酶 酸性蛋白酶≥1000 木聚糖酶≥20000 β-葡聚糖酶≥10000 纤维素酶≥1500 水产动物(甲鱼)用复合酶 酸性蛋白酶≥1500 中性蛋白酶≥3000 ---- ---- 注：以上各产品中的酶系及酶活力指标，可按应用原料的不同作适当调整。 5.3　 卫生指标 卫生指标应符合表2的规定。 表2　饲料用复合酶制剂的卫生指标 砷，mg/kg,（以As 计） ≤5.0 铅，mg/kg,（以 Pb计） ≤10.0 镉，mg/kg,（以 Cd计） ≤0.5 沙门氏菌， 不得检出 大肠菌群，MPN/100g ≤3000 黄曲霉毒素B1, mg/kg ≤0.05 　注： 不得检出国家明令禁止的药物和物质。 5.4　 粒度 孔径0.325mm（60目筛）分析筛筛上物，不大于20%。 5.5　 水分 不大于10%。 5.6　 净含量 按国家技术监督局（1995）第