SNT 2223-2008 进出口动物源性食品中硫粘菌素残留量检测方法 液相色谱-质谱质谱法.pdf

书书书中华人民共和国出入境检验检疫行业标准犛 犖犜 进出口动物源性食品中硫粘菌素残留量检测方法液相色谱 质谱 质谱法犇 犲 狋 犲 狉 犿 犻 狀 犪 狋 犻 狅 狀狅 犳 狋 犻 犪 犿 狌 犾 犻 狀狉 犲 狊 犻 犱 狌 犲 犻 狀犳 狅 狅 犱 狊 狋 狌 犳 犳 狊狅 犳犪 狀 犻 犿 犪 犾 狅 狉 犻 犵 犻 狀犳 狅 狉 犻 犿 狆 狅 狉 狋 犪 狀 犱犲 狓 狆 狅 狉 狋犔 犆 犕 犛犕 犛犿 犲 狋 犺 狅 犱 发布 实施中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发 布版权所有 禁止翻制、电子传阅、发售书书书前言本标准的附录 和附录均为资料性附录。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国辽宁出入境检验检疫局、中华人民共和国江西出入境检验检疫局、大连工业大学。本标准主要起草人：孙兴权、林维宣、温志海、张玉苍。本标准系首次发布的出入境检验检疫行业标准。犛 犖犜 版权所有 禁止翻制、电子传阅、发售进出口动物源性食品中硫粘菌素残留量检测方法液相色谱 质谱 质谱法范围本标准规定了进出口动物组织中硫粘菌素残留量的液相色谱 质谱质谱测定方法。本标准适用于猪肉、猪肝、猪肾中硫粘菌素残留量的检测和确证。规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。分析实验室用水规格和试验方法。（，：，）方法提要试样经乙酸乙酯提取，正己烷脱脂，固相萃取小柱净化后，液相色谱 质谱质谱法测定和确证，外标法定量。试剂和材料除另有说明外，所用试剂均为分析纯，水为 规定的一级水。乙酸乙酯：色谱纯。正己烷：色谱纯。甲醇：色谱纯。乙腈：色谱纯。乙酸铵。乙酸铵：称取 乙酸铵，加水溶解并定容至 。硫粘菌素标准物质（）：，纯度大于等于 。硫粘菌素标准储备溶液（）：称取适量的硫粘菌素标准物质（），用甲醇配成 的标准储备液。储备液置于 避光贮存。硫粘菌素标准工作溶液（）：吸取适量的硫粘菌素标准储备溶液（），用甲醇配成 的标准工作溶液。标准工作溶液置于避光贮存。固相萃取小柱：柱，或相当者。微孔滤膜：，有机相。仪器和设备 液相色谱 串联四极杆质谱仪：配有电喷雾离子源。分析天平：感量分别为 和 。绞肉机。涡旋混合器：。犛 犖犜 版权所有 禁止翻制、电子传阅、发售 离心机：。旋转蒸发器。固相萃取装置。具塞离心管：聚四氟乙烯，和 。试样制备与保存从所取动物肌肉、肝脏、肾脏全部样品组织中取出有代表性样品约 ，用绞肉机充分绞碎混匀均分成两份。制备好的试样置于样品瓶中，密封，并标明标记，于 以下冷冻存放。试样制备与保存过程中应防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。测定步骤 提取称取试样（精确到 ）于 离心管（）中，加入 乙酸乙酯（），涡旋混匀 ，离心 ，收集提取液至浓缩瓶中。残渣再加入 乙酸乙酯，重复上述抽提操作。合并提取液，以下旋转浓缩至近干。用 正己烷（）和 水依次将残渣转移至 离心管（）中，涡旋混匀 ，离心 ，弃去上层正己烷溶液，再加入 正己烷，重复上述脱脂操作，所得水层提取液待净化。净化分别用甲醇（）和水各 对 固相萃取小柱（）进行活化预处理，然后将测定步骤 所得水层提取液转移至小柱上，控制流出速度小于 。用 水分次洗涤离心管，洗涤液淋洗 小柱后弃去。用 甲醇洗脱，收集全部洗脱液，加水定容至 ，混匀后过 滤膜（），供液相色谱 串联质谱测定。硫粘菌素基质校准标准溶液的配制称取七个基质空白样品（称样量为）于 离心管（）中，其中六个空白样品中分别加入适量硫粘菌素标准工作溶液（），按照样品操作步骤、同步操作，使最终样品溶液中硫粘菌素的浓度分别为 、。所得系列硫粘菌素基质标准校准溶液即配即用，用以制作标准曲线。测定 液相色谱条件）色谱柱：，（内径），或相当者；）进样量：；）流速：；）流动相组成及梯度洗脱程序见表。表液相色谱梯度洗脱程序时间 甲醇 乙酸铵乙腈 质谱条件）离子源：电喷雾离子源；犛 犖犜 版权所有 禁止翻制、电子传阅、发售）扫描方式：正离子扫描；）检测方式：多反应监测；）雾化气、气帘气、辅助气、碰撞气均为高纯氮气；使用前应调节各参数使质谱灵敏度达到检测要求，质谱条件参见附录。液相色谱 质谱质谱测定 定性测定在相同试验条件下，样品中待测物质与同时检测的浓度相近的基质校准标准溶液具有相同的保留时间，并且所选择的离子相对丰度比相一致或在表规定的允许偏差范围内，则可判断样品中存在对应的被测物。在上述实验条件下，硫粘菌素的保留时间约为 ，定性离子对（）为 ；，定量离子对为 ，参考离子相对丰度比（）分别为 ；，相应的谱图参见附录。表定性确证时离子相对丰度比的最大允许偏差相对离子丰度比 允许的相对偏差 定量测定在仪器最佳工作条件下，对硫粘菌素的基质校准标准溶液分别进样，以峰面积为纵坐标，系列基质校准标准溶液浓度为横坐标绘制标准工作曲线，用标准工作曲线对样品进行定量，样品溶液中待测物的响应值均应在仪器测定的线性范围内。空白试验除不加试样外，均按上述步骤操作。结果计算按式（）计算试样中硫粘菌素残留量：犡（犮犮）犞犿（）式中：犡 试样中硫粘菌素残留量，单位为微克每千克（）；犮 从标准曲线中得到的被测组分溶液浓度，单位为纳克每毫升（）；犮 从标准曲线中得到的空白试验中被测组分的溶液浓度，单位为纳克每毫升（）；犞 样品溶液最终定容体积，单位为毫升（）；犿 最终样液所代表试样质量，单位为克（）。测定低限和回收率 测定低限本方法的测定低限为 。回收率不同样品基质，不同添加浓度下的硫粘菌素回收率范围数据见表。表不同基质中不同硫粘菌素添加水平的回收率范围基质添加水平（）回收率猪肉 犛 犖犜 版权所有 禁止翻制、电子传阅、发售表（续）基质添加水平（）回收率猪肝 猪肾 犛 犖犜 版权所有 禁止翻制、电子传阅、发售附录犃（资料性附录）质谱条件）质谱条件：）电喷雾电压（）：；）雾化气压力（）：（）；）气帘气压力（）：（）；）碰撞气压力（）：（）；）辅助气流速（）：；）离子源温度（）：；）、均为单位分辨率（）；）硫粘菌素的定性离子对、定量离子对、采集时间、去簇电压（）、入口电压（）、碰撞能量（）及碰撞室出口电压（）等参数见表 。表 犃 硫粘菌素的主要质谱参考条件参数化合物定性离子对（）定量离子对（）采集时间 去簇电压（）入口电压（）碰撞能量（）碰撞室出口电压（）硫粘菌素 ）附录 所列参数是在 质谱仪上完成的，此处列出实验用仪器型号仅供参考，不涉及商业目的，鼓励标准使用者尝试不同厂家和型号的仪器。犛 犖犜 版权所有 禁止翻制、电子传阅、发售附录犅（资料性附录）犡 犐 犆和离子相对丰度比图谱）图犅 硫粘菌素的提取离子流图（犡 犐 犆）以及离子相对丰度比图谱犛 犖犜 版权所有 禁止翻制、电子传阅、发售犉 狅 狉 犲 狑 狅 狉 犱犃 狀 狀 犲 狓犃犪 狀 犱犃 狀 狀 犲 狓犅狅 犳 狋 犺 犻 狊狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱犪 狉 犲 犻 狀 犳 狅 狉 犿 犪 狋 犻 狏 犲犪 狀 狀 犲 狓 犲 狊 犜 犺 犻 狊狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱狑 犪 狊狆 狉 狅 狆 狅 狊 犲 犱犫 狔犪 狀 犱 犻 狊狌 狀 犱 犲 狉 狋 犺 犲犮 犺 犪 狉 犵 犲 犱狅 犳 犮 犲 狉 狋 犻 犳 犻 犮 犪 狋 犻 狅 狀犪 狀 犱犪 犮 犮 狉 犲 犱 犻 狋 犪 狋 犻 狅 狀犪 犱 犿 犻 狀 犻 狊 狋 犪 狋 犻 狅 狀狅 犳 狋 犺 犲犘 犲 狅 狆 犾 犲狊犚 犲 狆 狌 犫 犾 犻 犮狅 犳犆 犺 犻 狀 犪 犜 犺 犻 狊狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱狑 犪 狊犱 狉 犪 犳 狋 犲 犱犫 狔犔 犻 犪 狅 狀 犻 狀 犵犈 狀 狋 狉 狔 犈 狓 犻 狋 犐 狀 狊 狆 犲 犮 狋 犻 狅 狀犪 狀 犱犙 狌 犪 狉 犪 狀 狋 犻 狀 犲犅 狌 狉 犲 犪 狌狅 犳狋 犺 犲犘 犲 狅 狆 犾 犲狊犚 犲 狆 狌 犫 犾 犻 犮狅 犳犆 犺 犻 狀 犪，犑 犻 犪 狀 犵 狓 犻犈 狀 狋 狉 狔 犈 狓 犻 狋 犐 狀 狊 狆 犲 犮 狋 犻 狅 狀犪 狀 犱犙 狌 犪 狉 犪 狀 狋 犻 狀 犲犅 狌 狉 犲 犪 狌狅 犳狋 犺 犲犘 犲 狅 狆 犾 犲狊犚 犲 狆 狌 犫 犾 犻 犮狅 犳犆 犺 犻 狀 犪犪 狀 犱犇 犪 犾 犻 犪 狀犘 狅 犾 狔 狋 犲 犮 犺 狀 犻 犮犝 狀 犻 狏 犲 狉 狊 犻 狋 狔 犜 犺 犲狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱狑 犪 狊犿 犪 犻 狀 犾 狔犱 狉 犪 犳 狋 犲 犱犫 狔犛 狌 狀犡 犻 狀 犵 狇 狌 犪 狀，犔 犻 狀犠 犲 犻 狓 狌 犪 狀，犠 犲 狀犣 犺 犻 犺 犪 犻，犣 犺 犪 狀 犵犢 狌 犮 犪 狀 犵 犜 犺 犻 狊狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱 犻 狊犪狆 狉 狅 犳 犲 狊 狊 犻 狅 狀 犪 犾 狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱犳 狅 狉犲 狀 狋 狉 狔 犲 狓 犻 狋 犻 狀 狊 狆 犲 犮 狋 犻 狅 狀犪 狀 犱狇 狌 犪 狉 犪 狀 狋 犻 狀 犲狆 狉 狅 犿 狌 犾 犵 犪 狋 犲 犱犳 狅 狉 狋 犺 犲犳 犻 狉 狊 狋 狋 犻 犿 犲 犛 犖犜 版权所有 禁止翻制、电子传阅、发售犇 犲 狋 犲 狉 犿 犻 狀 犪 狋 犻 狅 狀狅 犳 狋 犻 犪 犿 狌 犾 犻 狀狉 犲 狊 犻 犱 狌 犲 犻 狀犳 狅 狅 犱 狊 狋 狌 犳 犳 狊狅 犳犪 狀 犻 犿 犪 犾 狅 狉 犻 犵 犻 狀犳 狅 狉 犻 犿 狆 狅 狉 狋犪 狀 犱犲 狓 狆 狅 狉 狋犔 犆 犕 犛犕 犛犿 犲 狋 犺 狅 犱犛 犮 狅 狆 犲犜 犺 犲狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱狊 狆 犲 犮 犻 犳 犻 犲 狊 狋 犺 犲犿 犲 狋 犺 狅 犱 狊 犳 狅 狉 犱 犲 狋 犲 狉 犿 犻 狀 犪 狋 犻 狅 狀狅 犳 狋 犻 犪 犿 狌 犾 犻 狀 狉 犲 狊 犻 犱 狌 犲 狊 犻 狀犪 狀 犻 犿 犪 犾 犳 狅 狅 犱犫 狔犺 犻 犵 犺狆 犲 狉 犳 狅 狉 犿 犪 狀 犮 犲 犾 犻 狇 狌 犻 犱犮 犺 狉 狅 犿 犪 狋 狅 犵 狉 犪 狆 犺 狔犪 狀 犱狋 犪 狀 犱 犲 犿 犿 犪 狊 狊狊 狆 犲 犮 狋 狉 狅 犿 犲 狋 狉 狔 犜 犺 犲狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱 犻 狊犪 狆 狆 犾 犻 犮 犪 犫 犾 犲 狋 狅狋 犺 犲犱 犲 狋 犲 狉 犿 犻 狀 犪 狋 犻 狅 狀狅 犳 狋 犻 犪 犿 狌 犾 犻 狀狉 犲 狊 犻 犱 狌 犲 狊 犻 狀犿 狌 狊 犮 犾 犲，犾 犻 狏 犲 狉 犪 狀 犱犽 犻 犱 狀 犲 狔狅 犳狆 犻 犵狊 犪 犿 狆 犾 犲 狊 犚 犲 犳 犲 狉 犲 狀 犮 犲犉 狅 狉 狋 犺 犲犳 犻 犾 犲 狊狑 犻 狋 犺犪 狀 犻 狀 犱 犻 犮 犪 狋 犻 狅 狀狅 犳犱 犪 狋 犲，狋 犺 犲狊 犲 狇 狌 犲 狀 犮 犲 犾 狔犿 狅 犱 犻 犳 犻 犲 犱狏 犲 狉 狊 犻 狅 狀 狊（犱 犻 狊 犻 狀 犮 犾 狌 犱 犻 狀 犵狋 犺 犲犮 狅 狀 狋 犲 狀 狋 狊狅 犳犲 狉 狉 犪 狋 犪）狅 狉狉 犲 狏 犻 狊 犲 犱狏 犲 狉 狊 犻 狅 狀 狊狅 犳狋 犺 犲 犿 狑 狅 狌 犾 犱狀 狅 狋犫 犲犪 狆 狆 犾 犻 犮 犪 犫 犾 犲狋 狅狋 犺 犻 狊狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱 犎 狅 狑 犲 狏 犲 狉，犻 狋 犻 狊犲 狀 犮 狅 狌 狉 犪 犵 犲 犱犳 狅 狉 狋 犺 狅 狊 犲犺 犪 狏 犲 狉 犲 犪 犮 犺 犲 犱犪 狀犪 犵 狉 犲 犲 犿 犲 狀 狋 犪 犮 犮 狅 狉 犱 犻 狀 犵狋 狅狋 犺 犻 狊狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱狋 狅狉 犲 狊 犲 犪 狉 犮 犺狑 犺 犲 狋 犺 犲 狉 狋 狅狌 狊 犲狋 犺 犲 犾 犪