SNT 2775-2023 商品化食品检测试剂盒评价方法.pdf

以正式出版文本为准I C S6 7.0 5 0C C SX0 4中华人民共和国出入境检验检疫行业标准S N/T2 7 7 52 0 2 3代替S N/T 2 7 7 52 0 1 1 商品化食品检测试剂盒评价方法 E v a l u a t i o n m e t h o d s f o r c o mm e r c i a l k i t s o f f o o d t e s t i n g 2 0 2 3-0 5-0 5发布2 0 2 3-1 2-0 1实施中华人民共和国海关总署发 布以正式出版文本为准以正式出版文本为准前 言本文件按照G B/T 1.12 0 2 0 标准化工作导则 第1部分:标准化文件的结构和起草规则 的规定起草。本文件代替S N/T 2 7 7 52 0 1 1 商品化食品检测试剂盒评价方法,与S N/T 2 7 7 52 0 1 1相比,除结构调整和编辑性修改外,主要技术变化如下:增加了评价参数(见4.3)与评价样品的选择与制备(见4.4);将检测试剂盒根据结果判定方式分为定性检测试剂盒(含半定量检测试剂盒)和定量检测试剂盒两类并分别给出相应的评价方法(见5.2、5.3);增加了对记录和报告的要求(见6);增加了检测试剂盒与参考方法一致性分析的统计学方法与实例(见附录A);增加了对批间(不同生产批号检测试剂盒)差异的要求,并在附录B、附录C中分别给出了定性检测试剂盒、定量检测试剂盒的评价方法与实例。请注意本文件的某些内容可能涉及专利,本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。本文件由中华人民共和国海关总署提出并归口。本文件起草单位:中华人民共和国福州海关、深圳职业技术学院、中华人民共和国广州海关、中国检验检疫科学研究院、福建省粮油质量监测所。本文件主要起草人:杨方、岳振峰、席静、郑晶、柯秋璇、郑香平、郑洁、陈冬东、黄建立、张青龄。本文件及其所代替文件的历次版本发布情况为:2 0 1 1年首次发布为S N/T 2 7 7 52 0 1 1;本次为第一次修订。S N/T2 7 7 52 0 2 3以正式出版文本为准以正式出版文本为准商品化食品检测试剂盒评价方法 1 范围本文件规定了用于食品检测的商品化检测试剂盒的术语与定义、通用要求、评价指标、数据统计和结果评判的方法等。本文件适用于食品检测用试剂盒生产者、采购者及使用者在生产或使用商品化试剂盒时对相关指标进行评价以及检测质量控制。2 规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中,注日期的引用文件,仅该日期对应的版本适用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。G B/T 4 8 8 9 数据的统计处理和解释 正态分布均值和方差的估计与检验G B/T 6 3 7 9.1 测量方法与结果的准确度(正确度与精确度)第1部分:总则与定义G B/T 1 9 4 8 9 实验室生物安全通用要求G B/T 2 7 0 2 5 检测和校准实验室能力的通用要求G B/T 2 7 4 0 3 实验室质量控制规范 食品分子生物学检测G B/T 2 7 4 0 4 实验室质量控制规范 食品理化检测G B/T 2 7 4 0 5 实验室质量控制规范 食品微生物检测J J F 1 0 0 52 0 1 6 标准物质常用术语和定义S N/T 0 0 0 1 出口食品、化妆品理化测定方法标准编写的基本规定S N/T 3 2 6 6 食品微生物检验方法确认技术规范3 术语和定义G B/T 6 3 7 9.1、J J F 1 0 0 52 0 1 6界定的以及下列术语和定义适用于本文件。3.1商品化食品检测试剂盒 c o mm e r c i a l k i t s o f f o o d t e s t i n g 指对一种分析方法的主要或关键组成进行了商品化包装并可供销售的检测体系,用以确定一种或多种食品基体中目标分析物的存在或含量。3.2基质 m a t r i x指样本中除目标分析物以外的一切组成。3.3参考方法 r e f e r e n c e m e t h o d经过全面研究,清楚而严密地描述所需条件和程序,用于对目标分析物一种或多种特性值进行测量的方法。该方法已经证明具有与预期用途相称的准确度及其他性能,参考方法可以用来评价对同一测量过程所使用的其他方法。1S N/T2 7 7 52 0 2 3以正式出版文本为准3.4特异性 s p e c i f i c i t y指商品化食品检测试剂盒区分目标分析物与其他化合物或基质的能力。3.5检出限 l i m i t o f d e t e c t i o n指在给定的置信水平上,样品中目标分析物能被可靠地与基质干扰区分的最低浓度或含量。3.6定量限 l i m i t o f q u a n t i t a t i o n指样品中目标物在一个可接受的精密度与正确度水平上能被定量检测的最低浓度或含量。3.7假阴性率 f a l s e n e g a t i v e r a t e将阳性结果判断为阴性的比率。3.8假阳性率 f a l s e p o s i t i v e r a t e将阴性结果判断为阳性的比率。3.9耐变性 r o b u s t n e s s指商品化食品检测试剂盒不受环境等条件的微小变化而影响检测结论的能力。3.1 0关注含量水平 l e v e l o f i n t e r e s t判断样品中分析物是否符合法规规定和要求的有决定性意义的含量水平(如:对某一定量特性规定和要求的物质限值,包括最大残留限量或其他最大容许量等)。4 通用要求4.1 商品化食品检测试剂盒检测试剂盒必须包装完整,组成各部分外观符合要求;标签、标识清晰、规范;带有使用说明书或等同指导性文件,文件内容应包括但不限于以下部分:a)明确该检测试剂盒的名称及规格、生产批号、产品主要组成成分。b)检测试剂盒的应用范围:包括检测的目标物和适用的基质范围。c)对检测原理、技术参数及结果的表述与解释。d)操作指南:明确检测所要求的样本缩分、分析物提取等步骤,包括完整的检测操作程序和质控手段。e)有效期:明确检测试剂盒的保存时间与保存条件。f)环境要求:明确使用检测试剂盒时是否有环境温度与湿度、实验操作场所等的要求。g)交叉反应:明确检测试剂盒对目标分析物的类似特征化合物、代谢产物或可能出现在基质里的非目标化合物的响应情况。h)抽样原则:说明实验室检测需要的样本量,明确在进行分析前需进行的采样、处理、混合及二次抽样步骤。i)注意事项:包括安全提示、废弃物处理、可能存在危害的操作步骤。j)技术支持:提供用户可获得技术支持的联系人、电话或传真、邮箱地址。k)质量合格证书。l)其它应告知用户的事项。2S N/T2 7 7 52 0 2 3以正式出版文本为准4.2 评价实验室若评价结果用于商品化食品检测试剂盒的上市流通或需要对此检测试剂盒做出评价结论,则参与评价的实验室至少需要3家,每个结果至少重复测定2次。评价实验室开展检测试剂盒评价工作时,应符合G B/T 1 9 4 8 9和G B/T 2 7 0 2 5 相关实验室的安全规定和操作要求,质量控制参照G B/T 2 7 4 0 3、G B/T 2 7 4 0 4、G B/T 2 7 4 0 5中的有关规定执行。4.3 评价参数评价实验室应根据所评价的检测试剂盒的预期用途选择合适的验证参数,并形成评价方案。对于定性(含半定量)检测试剂盒,典型的评价参数包括方法的检出限、特异性、假阴性率、假阳性率、相对准确度(或与参考方法的一致性)、批间差异;必要时进行耐变性评价。对于定量检测试剂盒,典型的评价参数包括方法的定量限、线性和范围、特异性、准确度(正确度和精密度)、批间差异;必要时进行耐变性评价。4.4 评价样品的选择及制备评价样品包括阴性质控样品与阳性质控样品。阴性质控样品为经参考方法确认未检出目标分析物的样品。阳性质控样品为具有确定含量目标分析物的样品,包括基质标准样品与采用添加方式制备的样品,也可采用参考方法进行分析从而得到样品中目标分析物的含量。阳性质控样品中目标分析物含量为指定值。采用添加方式制备阳性质控样品时目标分析物或干扰化合物的添加体积应尽可能少,以不影响样品的组成,添加体积应不大于样品体积的1/1 0 0。用于评价准确度的阳性质控样品宜与分析样品一致。进行实验室内评价的实验样品种类应涵盖分析方法的适用范围,实验室间评价的实验样品应至少选择3种代表性样品(不同种类或不同来源)。食品理化项目检测试剂盒评价样品可参考S N/T 0 0 0 1的食品分类进行选择,食品微生物项目检测试剂盒评价样品可参考S N/T 3 2 6 6的食品分类进行选择。当检测试剂盒的适用范围仅为某种样品时,可选择不同来源的样品制备验证样品。4.5 参考方法的选择参考方法优先采用国家标准方法、国际标准化组织标准方法、国际分析家协会方法,若以上方法均不能获得,则可采用行业标准或其他经验证的方法。5 技术指标与评价方法5.1 总则本文件将商品化食品检测试剂盒按检测结果判定方式分为定性检测试剂盒(含半定量检测试剂盒)和定量检测试剂盒两类。定性检测试剂盒仅报告阴性/阳性的判断结果,不报送具体检测数值;半定量检测试剂盒一般用于判断目标分析物含量是否符合关注限量水平,可报告为大于关注含量水平或小于等于关注含量水平;定量检测试剂盒报告定量限(含)以上的检测数值。3S N/T2 7 7 52 0 2 3以正式出版文本为准5.2 定性(含半定量)检测试剂盒的评价指标5.2.1 评价要求采用阴性质控样品添加的方式制备评价样品,添加水平至少包括检测试剂盒标称检出限的0.5倍、1倍及5倍水平。每种空白样品及每个含量水平评价样品不得少于4 0例。对于非法添加等重点项目的检测,可考虑在检出限水平设置8 0例,以便更好地评价假阳性率和假阴性率。若无法获得阴性质控样品,可选择含有可区分水平(不少于3个)目标化合物的样品、采用与参考方法比较的方式进行评价。5.2.2 性能指标及计算5.2.2.1 性能指标对检出限、特异性、假阴性率、假阳性率、相对准确度等参数进行评价时,可根据检测试剂盒使用说明书进行测试并获得测试结果,统计针对每个食品类型和每个含量水平得到的检验结果,将试验数据按表1填入,计算各性能指标。表1 性能指标的计算样品情况a检验结果b阳性阴性总数阳性aba+b阴性cdc+d总数a+cb+da+b+c+d灵敏度(p+)p+=a/(a+b),当p+0.9 5时的含量水平设为检出限特异性(p-)p-=d/(c+d)假阴性率(p f-)p f-=a/(a+c)=1-灵敏度假阳性率(p f+)p f+=d/(b+d)=1-特异性相对准确度(a+d)/(a+b+c+d)a由参考方法检验得到的结果或者样品中实际的公议值结果;b检测试剂盒测定的结果。灵敏度的计算使用阳性质控样品的实际的公议值结果或由参考方法检验得到的结果。5.2.2.2 灵敏度和检出限检测试剂盒测定结果为阳样的样品数量除以实际样品(或参考方法确认)为阳性的样品总数为灵敏度;当灵敏度0.9 5时样品中所含目标分析物的含量水平即为检出限。5.2.2.3 特异性检测试剂盒测定结果为阴性的样品数量除以实际样品(或参考方法确认)为阴性的样品总数。5.2.2.4 假阴性率检测试剂盒测定为阴性而实际样品为阳性(或参考方法确认为阳性)的样品数量除以实际样品为阳4S N/T2 7 7 52 0 2 3以正式出版文本为准性(或参考方法确认为阳性)的样品总数,假阴性率=1 0 0-灵敏度。5.2.2.5 假阳性率检测试剂盒测定为阳性而实际样品为阴性(或参考方法确认为阴性)的数量除以实际样品为阴性(或参考方法确认为阴性)的样品总数,假阳性率=1 0 0-特异性。5.2.2.6 相对准确度(或与参考方法的一致性)检测试剂盒对某个样品的测定结果与样品真实结果或与参考方法测试结果的一致程度。即检测试剂盒检测结果和样品实际结果(或参考