SNT 2664-2010 蜂王浆中四环素类抗生素残留量测定方法 放射受体分析法.pdf

书书书中华人民共和国出入境检验检疫行业标准犛 犖犜 蜂王浆中四环素类抗生素残留量测定方法放射受体分析法犇 犲 狋 犲 狉 犿 犻 狀 犪 狋 犻 狅 狀狅 犳 狋 犲 狋 狉 犪 犮 狔 犮 犾 犻 狀 犲 狊 狉 犲 狊 犻 犱 狌 犲 狊 犻 狀狉 狅 狔 犪 犾 犼 犲 犾 犾 狔犳 狅 狉 犻 犿 狆 狅 狉 狋 犪 狀 犱犲 狓 狆 狅 狉 狋犚 犪 犱 犻 狅 狉 犲 犮 犲 狆 狋 狅 狉犪 狊 狊 犪 狔犿 犲 狋 犺 狅 犱 发布 实施中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发 布书书书前言本标准按照 给出的规则起草。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国浙江出入境检验检疫局。本标准主要起草人：张晓峰、陈笑梅、朱振江、施伟良、方莹。犛 犖犜 蜂王浆中四环素类抗生素残留量测定方法放射受体分析法范围本标准规定了蜂王浆中四环素类抗生素残留的放射受体分析（）方法。本标准适用于蜂王浆中四环素、金霉素、土霉素、强力霉素抗生素残留总量的测定。规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。分析实验室用水规格和试验方法方法提要放射受体分析（）方法的基础是药物功能团与微生物受体位点的结合反应，这些位点与某一类种抗生素的共有功能团相关。应用受体的这种特异性可以实现对某一类抗生素的多残留分析。本方法中，样品中残留的四环素类药物经提取、稀释后与 标记的金霉素共同竞争结合特异的受体位点。在一定温度下反应后，离心分离，清除未结合的四环素类药物，最后加入闪烁液，测定 衰变发出的粒子放射性量值，计数 （）。测得的 值与样品中四环素类抗生素残留量成反比。试剂和材料除另有说明外，所用试剂均为分析纯，水为 规定的一级水。四环素类检测试剂盒）：组织阴性对照浓缩干粉：组织阴性对照浓缩干粉储存于。多抗标准品浓缩干粉：浓缩干粉储存于。组织萃取缓冲溶液（萃取缓冲溶液）干粉：储存于。缓冲溶液干粉：用于调节 值，储存于。四环素类受体药片：白色，以下的条件保存。四环素类氚标记药片：橙色，以下的条件保存。组织阴性对照溶液：使用时取组织阴性对照浓缩干粉（）按试剂盒说明书配制成阴性对照溶液。配制好的溶液可在冰箱或冰浴中保存。如长时间不用，可将溶液保存于 以下的冰箱中，使用时将其解冻。再解冻的溶液在冰箱中可保存。多抗标准溶液：使用时取浓缩干粉（）按试剂盒说明书配制成多抗生素标准溶液。溶液的保存方法同。）给出该信息是为了方便本标准的使用者，并不表示对某一产品的认可。如果其他产品具有相同的效果，需经实验评估后使用这些等效产品。犛 犖犜 组织萃取缓冲溶液（萃取缓冲溶液）：使用时取浓缩干粉（）按试剂盒说明书配制成组织萃取缓冲液。可在下保存个月。缓冲溶液：使用时取浓缩干粉（）按试剂盒说明书配制成组织萃取缓冲液。可在下保存个月。闪烁液。阴性对照液：取组织阴性对照溶液（），加至 组织萃取缓冲溶液（）中制成阴性对照液，在室温下混匀，该对照液可在室温下保持以上。此溶液用于分析仪器和试剂的性能监测。阳性对照液：取 多抗标准溶液（），加至 组织阴性对照溶液中（），混匀；然后从中取 混合溶液加入到 萃取缓冲溶液（）中制成阳性对照液（金霉素浓度 ）；在室温下混合均匀。该对照液可在室温下保持以上。此溶液用于分析仪器和试剂的性能监测。甲醇水溶液（，体积比）：甲醇溶解于 水。氢氧化钠溶液（）：氢氧化钠溶解于 水。试纸：范围。空白基样：选取确认不含有四环素族抗生素的蜂王浆，作为空白基样，用于测定当次批次试剂盒的控制点使用。仪器 分析仪或相当者。孵育器。离心机。均质器。移液器：，和 。涡旋混合器。电子天平：。试样的制备与保存 试样的制备原始样品总量不得少于 ，采用四分法，将样品分成两等份装入洁净容器，加封并做标识。试样的保存将样品于 条件下保存。分析步骤 提取称取 蜂王浆样品置于 离心管中，加 甲醇水溶液（），在涡旋混合器进行混合，离心 ，取上清液置于另一支试管中。用 试纸测试上清液的 值，如果 值小于，以氢氧化钠溶液（）调 直至 ；然后在 条件下离心 ，上清液为待测溶液。犛 犖犜 测定 从试剂盒中取出试剂片，用试剂盒中所附压杆将白色受体药片（）推出到试管中，用移液器取 水至样品试管中，用涡旋混合器混合 将药片打碎。加入 组织萃取缓冲液（）和 样品待测液；阴性和阳性对照管中则直接加入 阴性对照液（）和 阳性对照液（）。将橙色四环素氚标记药片（）推至上述支试管中，用涡旋混合器混合 。将试管置于 的孵育器保温 。取出试管，在 条件下离心 ，立即弃去上清液，用吸水纸将测试管边缘的水渍吸干。加 水，用试管混合器混合 将沉淀物打碎。分别加闪烁液（）至试管中，加盖，混匀，放置 ，在 分析仪上以 频道上进行一分钟计数 。结果判定 控制点的确定 控制点是界定样品阴性与初筛阳性的一个界限值，对于同一批号的试剂盒，正常情况下只需测定一次控制点。控制点（金霉素 ，相对应：四环素 ，土霉素 ，强力霉素 ）设置如下：称取 空白基样（）蜂王浆，加入 多抗生素标准品溶液（）；按照 进行前处理，再按 进行测试。取该个加标样品平行测试的 读数平均值，乘以系数 作为筛选测定的控制点。还可根据所需的筛选水平重新设置相应的控制点。结果判定当样品测定 值大于控制点，可判定为样品“阴性”，即样品中四环素类抗生素残留小于筛选水平；若测定 值小于或等于控制点，应判定为阳性，应使用仪器方法进一步进行确证分析。确证试验如被测样品中四环素类抗生素残留量的值大于限量要求时，应用其他方法进行确证。本标准的方法检出限四环素、金霉素、土霉素和强力霉素残留总量 。犛 犖犜 犉 狅 狉 犲 狑 狅 狉 犱犜 犺 犻 狊狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱 狑 犪 狊狆 狉 狅 狆 狅 狊 犲 犱犫 狔犆 犲 狉 狋 犻 犳 犻 犮 犪 狋 犻 狅 狀犪 狀 犱 犃 犮 犮 狉 犲 犱 犻 狋 犪 狋 犻 狅 狀 犃 犱 犿 犻 狀 犻 狊 狋 狉 犪 狋 犻 狅 狀狅 犳狋 犺 犲犘 犲 狅 狆 犾 犲狊犚 犲 狆 狌 犫 犾 犻 犮狅 犳犆 犺 犻 狀 犪 犜 犺 犻 狊狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱 狑 犪 狊犿 犪 犻 狀 犾 狔犱 狉 犪 犳 狋 犲 犱犫 狔犣 犺 犲 犼 犻 犪 狀 犵犈 狀 狋 狉 狔 犈 狓 犻 狋犐 狀 狊 狆 犲 犮 狋 犻 狅 狀犪 狀 犱犙 狌 犪 狉 犪 狀 狋 犻 狀 犲犅 狌 狉 犲 犪 狌狅 犳狋 犺 犲犘 犲 狅 狆 犾 犲狊犚 犲 狆 狌 犫 犾 犻 犮狅 犳犆 犺 犻 狀 犪 犜 犺 犻 狊狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱狑 犪 狊犿 犪 犻 狀 犾 狔犱 犪 犳 狋 犲 犱犫 狔犡 犻 犪 狅 犳 犲 狀 犵犣 犺 犪 狀 犵，犡 犻 犪 狅 犿 犲 犻 犆 犺 犲 狀，犠 犲 犻 犾 犻 犪 狀 犵犛 犺 犻，犣 犺 犲 狀 犼 犻 犪 狀 犵犣 犺 狌，犢 犻 狀 犵犉 犪 狀 犵 犛 犖犜 犇 犲 狋 犲 狉 犿 犻 狀 犪 狋 犻 狅 狀狅 犳 狋 犲 狋 狉 犪 犮 狔 犮 犾 犻 狀 犲 狊狉 犲 狊 犻 犱 狌 犲 狊 犻 狀狉 狅 狔 犪 犾 犼 犲 犾 犾 狔犳 狅 狉犻 犿 狆 狅 狉 狋犪 狀 犱犲 狓 狆 狅 狉 狋犚 犪 犱 犻 狅 狉 犲 犮 犲 狆 狋 狅 狉犪 狊 狊 犪 狔犿 犲 狋 犺 狅 犱犛 犮 狅 狆 犲犜 犺 犻 狊狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱狊 狆 犲 犮 犻 犳 犻 犲 狊狋 犺 犲犿 犲 狋 犺 狅 犱犳 狅 狉 狋 犺 犲犱 犲 狋 犲 狉 犿 犻 狀 犪 狋 犻 狅 狀狅 犳 狋 犲 狋 狉 犪 犮 狔 犮 犾 犻 狀 犲 狊犫 狔犆 犺 犪 狉 犿 犻 狀犚 狅 狔 犪 犾 犼 犲 犾 犾 狔 犜 犺 犻 狊狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱犻 狊犪 狆 狆 犾 犻 犮 犪 犫 犾 犲狋 狅狋 犺 犲犱 犲 狋 犲 狉 犿 犻 狀 犪 狋 犻 狅 狀狅 犳狋 犲 狋 狉 犪 犮 狔 犮 犾 犻 狀 犲 狊，犆 犺 犾 狅 狉 狋 犲 狋 狉 犪 犮 狔 犮 犾 犻 狀 犲，犗 狓 狔 狋 犲 狋 狉 犪 犮 狔 犮 犾 犻 狀 犲，犇 狅 狓 狔 犮 狔 犮 犾 犻 狀 犲犫 狔犆 犺 犪 狉 犿 犻 狀犚 狅 狔 犪 犾 犼 犲 犾 犾 狔 犖 狅 狉 犿 犪 狋 犻 狏 犲狉 犲 犳 犲 狉 犲 狀 犮 犲 狊犜 犺 犲犳 狅 犾 犾 狅 狑 犻 狀 犵 狀 狅 狉 犿 犪 狋 犻 狏 犲 犱 狅 犮 狌 犿 犲 狀 狋 狊犮 狅 狀 狋 犪 犻 狀 狆 狉 狅 狏 犻 狊 犻 狅 狀 狊 狑 犺 犻 犮 犺，狋 犺 狉 狅 狌 犵 犺狉 犲 犳 犲 狉 犲 狀 犮 犲犻 狀狋 犺 犻 狊狋 犲 狓 狋，犮 狅 狀 狊 狋 犻 狋 狌 狋 犲狆 狉 狅 狏 犻 狊 犻 狅 狀 狊狅 犳狋 犺 犻 狊犘 狉 狅 犳 犲 狊 狊 犻 狅 狀 犪 犾犛 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱 犉 狅 狉犱 犪 狋 犲 犱狉 犲 犳 犲 狉 犲 狀 犮 犲 狊，狊 狌 犫 狊 犲 狇 狌 犲 狀 狋犪 犿 犲 狀 犱 犿 犲 狀 狋 狊狋 狅，狅 狉 狉 犲 狏 犻 狊 犻 狅 狀 狊狅 犳，犪 狀 狔狅 犳 狋 犺 犲 狊 犲狆 狌 犫 犾 犻 犮 犪 狋 犻 狅 狀 狊犱 狅狀 狅 狋犪 狆 狆 犾 狔 犎 狅 狑 犲 狏 犲 狉，狆 犪 狉 狋 犻 犲 狊狋 狅犪 犵 狉 犲 犲 犿 犲 狀 狋 狊犫 犪 狊 犲 犱犻 狀狋 犺 犻 狊犘 狉 狅 犳 犲 狊 狊 犻 狅 狀 犪 犾犛 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱犪 狉 犲犲 狀 犮 狅 狌 狉 犪 犵 犲 犱狋 狅犻 狀 狏 犲 狊 狋 犻 犵 犪 狋 犲狋 犺 犲狆 狅 狊 狊 犻 犫 犻 犾 犻 狋 狔狅 犳犪 狆 狆 犾 狔 犻 狀 犵狋 犺 犲犿 狅 狊 狋 狉 犲 犮 犲 狀 狋犲 犱 犻 狋 犻 狅 狀 狊狅 犳 狋 犺 犲狀 狅 狉 犿 犪 狋 犻 狏 犲犱 狅 犮 狌 犿 犲 狀 狋 狊 犻 狀 犱 犻 犮 犪 狋 犲 犱犫 犲 犾 狅 狑 犉 狅 狉狌 狀 犱 犪 狋 犲 犱狉 犲 犳 犲 狉 犲 狀 犮 犲 狊，狋 犺 犲犾 犪 狋 犲 狊 狋犲 犱 犻 狋 犻 狅 狀狅 犳狋 犺 犲狀 狅 狉 犿 犪 狋 犻 狏 犲犱 狅 犮 狌 犿 犲 狀 狋 狉 犲 犳 犲 狉 狉 犲 犱狋 狅犪 狆 狆 犾 犻 犲 狊 犌 犅犜 犠 犪 狋 犲 狉 犳 狅 狉犪 狀 犪 犾 狔 狋 犻 犮 犪 犾 犾 犪 犫 狅 狉 犪 狋 狅 狉 狔狌 狊 犲犛 狆 犲 犮 犻 犳 犻 犮 犪 狋 犻 狅 狀犪 狀 犱狋 犲 狊 狋犿 犲 狋 犺 狅 犱 狊犘 狉 犻 狀 犮 犻 狆 犾 犲犚 犪 犱 犻 狅 狉 犲 犮 犲 狆 狋 狅 狉犪 狊 狊 犪 狔（犆 犺 犪 狉 犿）犫 犪 狊 犲 狊狅 狀犫 犪 犮 狋 犲 狉 犻 犪狊狊 狆 犲 犮 犻 犳 犻 犮狉 犲 犮 犲 狆 狋 狅 狉狊 犻 狋 犲狋 犺 犪 狋犫 犻 狀 犱犳 狌 狀 犮 狋 犻 狅 狀犵 狉 狅 狌 狆狅 犳犪 狀 狋 犻 犫 犻 狅 狋 犻 犮 狊 犐 狋犺 犪 狊犪犮 狅 狉 狉 犲 犾 犪 狋 犻 狅 狀犫 犲 狋 狑 犲 犲 狀狋 犺 犻 狊狉 犲 犮 犲 狆 狋 狅 狉狊 犻 狋 犲 狊犪 狀 犱犳 狌 狀 犮 狋 犻 狅 狀犵 狉 狅 狌 狆狅 犳狅 狀 犲犽 犻 狀 犱犪 狀 狋 犻 犫 犻 狅 狋 犻 犮 狊 犛 狅狋 犺 犲狊 狆 犲 犮 犻 犳 犻 犮 犻 狋 狔狅 犳 狋 犺 犲狉 犲 犮 犲 狆 狋 狅 狉犮 犪 狀狉 犲 犪 犾 犻 狕 犲狋 犺 犲犱 犲 狋 犲 狉 犿 犻 狀 犪 狋 犻 狅 狀犪 狀 狋 犻 犫 犻 狅 狋 犻 犮狉 犲 狊 犻 犱 狌 犲 狊 犜 犺 犲狋 犲 狋 狉 犪 犮 狔 犮 犾 犻 狀 犲犪 狀 狋 犻 犫 犻 狅 狋 犻