SNT 2497.9-2010 进出口危险化学品安全试验方法 第9部分：血清溶血素测定试验.pdf

书书书中华人民共和国出入境检验检疫行业标准犛 犖犜 进出口危险化学品安全试验方法第部分：血清溶血素测定试验犜 犲 狊 狋犿 犲 狋 犺 狅 犱狅 犳 犻 犿 狆 狅 狉 狋 犪 狀 犱犲 狓 狆 狅 狉 狋犱 犪 狀 犵 犲 狉 狅 狌 狊 犮 犺 犲 犿 犻 犮 犪 犾 狊犘 犪 狉 狋：犇 犲 狋 犲 狉 犿 犻 狀 犪 狋 犻 狅 狀狅 犳 狊 犲 狉 狌 犿犺 犲 犿 狅 犾 狔 狊 犻 狀 发布 实施中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发 布书书书前言 进出口危险化学品安全试验方法 系列标准共分为 部分：第部分：体内哺乳动物肝细胞程序外 合成（）试验；第部分：空斑形成细胞（）试验；第部分：大型溞繁殖试验；第部分：酿酒酵母有丝分裂重组试验；第部分：睾丸细胞 试验；第部分：哺乳类动物细胞姐妹染色单体互换体外试验；第部分：小鼠耳肿胀试验；第部分：腘窝淋巴结试验；第部分：血清溶血素测定试验；第 部分：淋巴细胞增殖功能测定试验；第 部分：种系突变试验；第 部分：单细胞凝胶电泳分析试验；第 部分：荧光原位杂交试验；第 部分：聚丙烯酰胺凝胶电泳试验；第 部分：实验；第 部分：实验；第 部分：哺乳动物行为毒理学试验；第 部分：加合物的检测方法；第 部分：实验；第 部分：法测定蛋白质含量；第 部分：琼脂糖凝胶电泳试验；第 部分：的 值测定方法；第 部分：细胞器的分离实验方法；第 部分：细胞免疫功能体外检测方法；第 部分：体液免疫功能试验；第 部分：巨噬细胞功能试验；第 部分：流式细胞术检测凋亡；第 部分：穿梭质粒在突变检验中的应用；第 部分：生化需氧量（）测定。本部分为 的第部分。本部分修改采用 毒理学实验方法与技术 中的免疫毒理学研究方法，其有关技术内容与上述方法完全一致，在标准文本格式上按 做了编辑性修改。本部分由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本部分负责起草单位：中华人民共和国天津出入境检验检疫局、中华人民共和国湖南出入境检验检疫局。本部分主要起草人：张园、王利兵、王华、赵琢、于智睿、熊中强。本部分系首次发布的出入境检验检疫行业标准。犛 犖犜 进出口危险化学品安全试验方法第部分：血清溶血素测定试验范围 的本部分规定了血清溶血素测定试验的术语和定义、试验原理、试验方法和试验结果。本部分适用于半数溶血值测定法检测进出口危险化学品对绵羊红细胞所致小鼠溶血素生成的影响。规范性引用文件下列文件中的条款通过 的本部分的引用而成为本部分的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本部分，然而，鼓励根据本部分达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本部分。实验动物配合饲料通用质量标准 实验动物环境及设施术语、定义和缩略语 术语和定义下列术语和定义适用于本部分。溶血素犺 犲 犿 狅 犾 狔 狊 犻 狀经绵羊红细胞免疫动物后产生的抗体。缩略语下列缩略语适用于本部分。犛 犚 犅 犆绵羊红细胞 狊 犺 犲 犲 狆狉 犲 犱犫 犾 狅 狅 犱犮 犲 犾 犾。试验原理用绵羊红细胞（）免疫小鼠，然后将免疫活性细胞（小鼠脾脏 淋巴细胞）、和补体在液相介质中进行反应。与抗体形成细胞所产生的 结合形成抗原抗体复合物，激活补体系统，裂解 而释放出血红蛋白，以分光光度计定量测定。所测值反映了抗体形成细胞产生抗体的功能。试验方法 试验动物小鼠，体重 。试验动物饲养条件应符合 和 有关规定。主要试剂和材料 犛 犚 犅 犆的制备脱纤维防凝处理的 ，以 洗涤次，每次 离心 。弃上清液，制成 悬犛 犖犜 液，然后用血细胞计数板计数细胞，最后稀释成 溶液 。免疫小鼠脾细胞的制备取上述稀释的 ，经尾静脉或腹腔内注射免疫小鼠（鼠龄周 周），每只 。后拉颈处死，取出脾脏用含小牛血清的 液清洗，去除脂肪和结缔组织。在 目铜网上研磨，制备单个脾细胞悬液，取滤液至试管内。加入含小牛血清的冷 液，离心 ，弃上清液，沉淀中加入 蒸馏水，反复吹打约 以破坏红细胞，然后加入 恢复等渗状态。用含有小牛血清的 液洗涤一次，计数，用 液调整细胞浓度为 。补体的制备新鲜豚鼠血清，用前经 吸收后，用 稀释。吸收处理的目的是为了减少补体介质中非特异性溶血及不同豚鼠间的补体反应差别，因此使用前需要把豚鼠的血清进行处理。在新鲜的豚鼠血清中加入经洗涤次的压积 ，按血清液与 体积比为加入。吸收 后，离心 ，吸出的上清液即为 吸收的豚鼠血清。临用前 稀释。试验步骤在实验管中加入 脾细胞 ；对照管中加入 的 液。两管中同时加入制备好的 ，稀释的补体，充分混匀，置 水浴。取出，离心 。试验结果以 分光光度计 波长，测上清液中红细胞裂解释放出的 量（以 表示）。犛 犖犜 书书书犜犖犛中华人民共和国出入境检验检疫行业标准进出口危险化学品安全试验方法第部分：血清溶血素测定试验 中 国 标 准 出 版 社 出 版北京复兴门外三里河北街 号邮政编码：网址 电话：中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷开本 印张 字数千字 年月第一版 年月第一次印刷印数 书号：定价 元