SNT 2796-2011 进出口食品中氟啶虫酰胺残留量的检测方法.pdf

书书书中华人民共和国出入境检验检疫行业标准犛 犖犜 进出口食品中氟啶虫酰胺残留量的检测方法犇 犲 狋 犲 狉 犿 犻 狀 犪 狋 犻 狅 狀狅 犳 犳 犾 狅 狀 犻 犮 犪 犿 犻 犱狉 犲 狊 犻 犱 狌 犲 狊 犻 狀犳 狅 狅 犱犳 狅 狉 犻 犿 狆 狅 狉 狋 犪 狀 犱犲 狓 狆 狅 狉 狋 发布 实施中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发 布书书书前言本标准按照 给出的规则起草。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国广东出入境检验检疫局。本标准主要起草人：谢建军、王岚、陈捷、焦红、吴映璇、徐娟、叶弘毅、谢玉珊。犛 犖犜 进出口食品中氟啶虫酰胺残留量的检测方法范围本标准规定了食品中氟啶虫酰胺残留量检测的气相色谱法检测和液相色谱 串联质谱确证方法。本标准适用于生菜、胡萝卜、菜心、大米、柑橘、葡萄、板栗、牛肉、羊肝、鸡肉、罗非鱼、番茄酱、茶叶、蜂蜜中氟啶虫酰胺残留量的定量测定和定性确证。方法提要样品经乙酸乙酯提取后，通过凝胶色谱（）和固相萃取柱（）净化，气相色谱外标法定量测定，液相色谱 串联质谱确证。试剂和材料除另有规定外，试剂均为分析纯，水为去离子水。环己烷。乙酸乙酯：色谱纯。甲醇：色谱纯。无水硫酸钠：灼烧，在干燥器内冷却至室温，储于密封瓶中备用。氯化钠。氟 啶 虫 酰 胺（）标 准 物 质：纯 度 大 于 等 于 ，编 号：；分 子 式：。氟啶虫酰胺标准储备液：准确称取适量氟啶虫酰胺，用乙酸乙酯配制成浓度为 的标准储备液。该溶液于 冰箱中保存。氟啶虫酰胺标准中间溶液：准确吸取适量标准储备液，用乙酸乙酯稀释至浓度为 的标准中间溶液。该溶液在 冰箱中保存。氟啶虫酰胺标准工作液：使用前根据需要将标准中间溶液用各种样本的空白基质稀释成适当浓度的标准工作液。氨基固相萃取柱：，和 ，或相当者。临用前用 乙酸乙酯活化次。硅藻土固相萃取柱：，或相当者。微孔滤膜：，有机相。仪器和设备 气相色谱仪：配 检测器。液相色谱 串联质谱仪：配有电喷雾离子源。凝胶渗透色谱仪：配有自动浓缩设备。犛 犖犜 分析天平：感量 ，。高速均质机。高速低温冷冻离心机：。聚四氟乙烯塑料离心管：，带盖。心形瓶：。试管：。旋转蒸发仪。氮气吹干浓缩仪。玻璃刻度试管：、，具塞。样品制备与保存 样品制备 生菜、胡萝卜、菜心、柑橘、葡萄、板栗取有代表性样品约 ，将其可食用部分切碎后，用捣碎机加工成浆状或细颗粒状。混匀，装入洁净容器，密封，标明标记。大米、茶叶取有代表性样品约 ，用粉碎机粉碎并通过孔径 圆孔筛。混匀，装入洁净容器，密封，标明标记。牛肉、鸡肉、羊肝、罗非鱼取有代表性样品约 ，剔骨去皮，用绞肉机绞碎，混匀，装入洁净容器，密封，标明标记。番茄酱取有代表性样品约 ，混匀，装入洁净容器，密封，标明标记。蜂蜜取代表性样品约 ，对无结晶的蜂蜜样品将其搅拌均匀；对有结晶析出的蜂蜜样品，在密闭情况下，将样品瓶置于不超过 的水浴中温热，振荡，待样品全部融化后搅匀，迅速冷却至室温，在融化时应注意防止水分挥发。装入洁净容器，密封，标明标记。试样保存茶叶、蜂蜜、粮谷及坚果类等试样于保存；水果蔬菜类和动物源性食品等试样于 以下冷冻保存。在抽样及制样的操作过程中，应防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。测定步骤 提取 生菜、胡萝卜、菜心、柑橘、葡萄、板栗、牛肉、羊肝、鸡肉、罗非鱼、番茄酱称取（精确至 ）试样于 离心管中，加 乙酸乙酯，匀质提取 ；另取一个 离心管，加入 乙酸乙酯洗匀质器刀头，合并均质液。加入 无水硫酸钠，盖好，振荡犛 犖犜 。将提取液 离心 ，吸取 上清液，冰箱以下放置，再过 有机滤膜，待凝胶渗透色谱净化。大米称取（精确至 ）试样于 离心管中，加入 水，浸泡 ，加 乙酸乙酯，匀质提取 ，另取一个 离心管，加入 乙酸乙酯洗匀质器刀头，合并均质液。加入 无水硫酸钠，盖好，振荡 。将样本 离心 ，吸取 上清液，冰箱以下放置，再过 有机滤膜，待凝胶渗透色谱净化。茶叶称取（精确至 ）试样于 离心管中，加 水浸泡 ；加无水硫酸钠。加 乙酸乙酯，振荡提取 ，提取次。将样本 离心 ，吸取上清液，定容至 ；取 过 有机相滤膜，待凝胶渗透色谱净化。蜂蜜称取试样（精确至 ）于 离心管中，加 水，氯化钠，振荡混匀，过固相萃取柱（），静置 后，用 乙酸乙酯淋洗，流速控制为 ，收集滤液于 浓缩瓶中，在 以下旋转浓缩至约，待净化。净化 生菜、胡萝卜、菜心、柑橘、葡萄、板栗、大米、牛肉、羊肝、鸡肉、罗非鱼、番茄酱、茶叶将 、和 所得溶液取 过凝胶渗透色谱仪，收集 的流出液，乙酸乙酯定容，作为初净化液。将初净化液过氨基柱（）后，用乙酸乙酯 洗涤次收集瓶，洗液同样过柱，流速控制为 ，收集全部洗脱液于试管中，在 下吹氮浓缩至近干，用乙酸乙酯涡漩振荡溶解残渣，定容 ，待测。蜂蜜活化前在氨基柱（）上填装 无水硫酸钠。将待净化浓缩液过柱后，用 乙酸乙酯洗脱次，流速控制为 ，收集全部洗脱液于试管中，在 下吹氮浓缩至约 ，用乙酸乙酯定容至，待测。仪器测定条件 凝胶色谱净化条件 凝胶净化柱：（内径）；填料：，。浓缩温度：。流动相：环己烷 乙酸乙酯（，体积比）。定容试剂：乙酸乙酯。流速：。进样量：。气相色谱条件 色谱柱：毛细管柱，（内径），或性能相当者。犛 犖犜 升温程序：初始温度 ，保持 ，以每分钟 升到 ，保持 ，以每分钟 升到 ，保持 。进样口温度：。检测器温度：。载气：氮气（纯度 ），流量 。进样模式：不分流进样。进样量：。气相色谱测定根据样液中氟啶虫酰胺含量情况，选定峰面积相近的标准工作溶液。标准工作溶液和样液中氟啶虫酰胺响应值均应在仪器检测线性范围内。标准工作溶液和样液等体积参插进样测定。在上述色谱条件下，氟啶虫酰胺的保留时间约为 。标准品的色谱图参见图 。犔 犆犕 犛 犕 犛质谱条件 液相色谱参考条件 色谱柱：柱，（内径），或性能相当者。柱温：。流动相：甲醇 水（，体积比）。流速：。进样量：。质谱参考条件参见附录。液相色谱质谱法测定乙酸乙酯定容的样液进行溶剂转换为甲醇 水（，体积比）后再进行上机测定。根据样液中氟啶虫酰胺含量情况，选定峰面积相近的标准工作溶液。标准工作溶液和样液中氟啶虫酰胺响应值均应在仪器检测线性范围内。标准工作溶液和样液等体积参插进样测定。在上述色谱条件下，氟啶虫酰胺的保留时间约为 。被测组分选择个母离子，个以上子离子，在相同实验条件下，如果样品中待检测物质与标准溶液中对应的保留时间偏差在 之内；且样品谱图中各组分定性离子的相对丰度与浓度接近的标准溶液谱图中对应的定性离子的相对丰度进行比较，偏差不超过表规定的范围，被确证的样品可判定为氟啶虫酰胺阳性检出。标准品的质谱图参见图、图。表定性确证时相对离子丰度的最大允许偏差相对离子丰度 允许的相对偏差 空白试验除不加试样外，按上述测定步骤进行。犛 犖犜 结果计算和表述用色谱数据处理机或按式（）计算试样中氟啶虫酰胺的残留含量，计算结果需扣除空白值。犡犃犮犞犃犿（）式中：犡 试样中氟啶虫酰胺含量，单位为纳克每克（）；犃 样液中氟啶虫酰胺的色谱峰面积；犮 标准工作溶液中氟啶虫酰胺浓度，单位为纳克每毫升（）；犞 最终样液的定容体积，单位毫升（）；犃 标准工作溶液中氟啶虫酰胺的色谱峰面积；犿 最终样液所代表试样量，单位为克（）。注：计算结果应表示到小数点后两位。测定低限、回收率 测定低限氟啶虫酰胺在生菜、胡萝卜、菜心、柑橘、葡萄、茶叶、牛肉、鸡肉、羊肝、番茄酱中的测定低限为 、在大米、板栗、罗非鱼、蜂蜜中测定的低限为 。回收率氟啶虫酰胺添加浓度及回收率的实验数据见表，氟啶虫酰胺 确证检测低限添加浓度及回收率的实验数据见表。表氟啶虫酰胺添加浓度及回收率样 品 名 称添加浓度 回收率生菜 菜心 胡萝卜 犛 犖犜 表（续）样 品 名 称添加浓度 回收率大米 柑橘 葡萄 板栗 茶叶 牛肉 羊肝 鸡肉 罗非鱼 番茄酱 犛 犖犜 表（续）样 品 名 称添加浓度 回收率蜂蜜 表氟啶虫酰胺添加检测低限的犔 犆犕 犛 犕 犛确证回收率样 品 名 称添加浓度 回收率生菜 菜心 胡萝卜 大米 柑橘 葡萄 板栗 茶叶 牛肉 羊肝 鸡肉 罗非鱼 番茄酱 蜂蜜 犛 犖犜 附录犃（资料性附录）氟啶虫酰胺的标准物质气相色谱图图 犃 氟啶虫酰胺标准物质（犵犽 犵）的气相色谱图（犌 犆 犈 犆 犇）犛 犖犜 附录犅（资料性附录）氟啶虫酰胺质谱测定参考条件）犅 离子源：电喷雾离子源（），温度 。犅 扫描方式：负离子扫描。犅 检测方式：多反应选择离子检测（）。犅 电喷雾电压（）：。犅 雾化气、气帘气、辅助加热气、碰撞气均为高纯氮气及其他合适气体；使用前应调节各气体流量以使质谱灵敏度达到检测要求。犅 辅助气温度（）：。犅 监测离子对、定量离子对、驻留时间、去簇电压及碰撞能量见表。表 犅 氟啶虫酰胺监测离子对、定量离子对、驻留时间、去簇电压及碰撞能量被测物名称监测离子对定量离子对驻留时间 去簇电压碰撞能量氟啶虫酰胺 注：对于不同质谱仪器，仪器参数可能存在差异，测定前应将质谱参数优化到最佳。）非商业性声明：附录所列参考质谱条件是在 型液质联用仪上完成的，此处列出试验用仪器型号仅为提供参考，并不涉及商业目的，鼓励标准使用者尝试不同厂家或型号的仪器。犛 犖犜 附录犆（资料性附录）氟啶虫酰胺标准品犔 犆犕 犛 犕 犛质谱图图犆 氟啶虫酰胺标准品子离子全扫描质谱图犪）犫）图犆 氟啶虫酰胺标准品多反应监测（犕犚 犞）色谱图（犵犔）犛 犖犜 犉 狅 狉 犲 狑 狅 狉 犱犜 犺 犻 狊狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱狑 犪 狊犱 狉 犪 犳 狋 犲 犱 犻 狀犪 犮 犮 狅 狉 犱 犪 狀 犮 犲狑 犻 狋 犺狋 犺 犲犌 犅犜 犜 犺 犻 狊狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱狑 犪 狊狆 狉 狅 狆 狅 狊 犲 犱犫 狔犪 狀 犱狑 犪 狊狌 狀 犱 犲 狉 狋 犺 犲犮 犺 犪 狉 犵 犲 犱狅 犳 狋 犺 犲犆 犲 狉 狋 犻 犳 犻 犮 犪 狋 犻 狅 狀犪 狀 犱犃 犮 犮 狉 犲 犱 犻 狋 犪 狋 犻 狅 狀犃 犱 犿 犻 狀 犻 狊 狋 狉 犪 狋 犻 狅 狀狅 犳 狋 犺 犲犘 犲 狅 狆 犾 犲狊犚 犲 狆 狌 犫 犾 犻 犮狅 犳犆 犺 犻 狀 犪 犜 犺 犻 狊狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱狑 犪 狊犱 狉 犪 犳 狋 犲 犱犫 狔犌 狌 犪 狀 犵 犱 狅 狀 犵犈 狀 狋 狉 狔 犈 狓 犻 狋 犐 狀 狊 狆 犲 犮 狋 犻 狅 狀犪 狀 犱犙 狌 犪 狉 犪 狀 狋 犻 狀 犲犅 狌 狉 犲 犪 狌狅 犳 狋 犺 犲犘 犲 狅 狆 犾 犲狊犚 犲 狆 狌 犫 犾 犻 犮狅 犳犆 犺 犻 狀 犪 犜 犺 犲犿 犪 犻 狀犱 狉 犪 犳 狋 犲 狉 狊狅 犳 狋 犺 犻 狊狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱狑 犲 狉 犲犡 犻 犲犑 犻 犪 狀 犼 狌 狀，犠 犪 狀 犵犔 犪 狀，犆 犺 犲 狀犑 犻 犲，犑 犻 犪 狅犎 狅 狀 犵，犠狌犢 犻 狀 犵 狓 狌 犪 狀，犡 狌犑 狌 犪 狀，犢 犲犎 狅 狀 犵 狔 犻 犪 狀 犱犡 犻 犲犢 狌 狊 犺 犪 狀 犛 犖犜 犇 犲 狋 犲 狉 犿 犻 狀 犪 狋 犻 狅 狀狅 犳 犳 犾 狅 狀 犻 犮 犪 犿 犻 犱狉 犲 狊 犻 犱 狌 犲 狊犻 狀犳 狅 狅 犱犳 狅 狉 犻 犿 狆 狅 狉 狋犪 狀 犱犲 狓 狆 狅 狉 狋犛 犮 狅 狆 犲犜 犺 犲狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱狊 狆 犲 犮 犻 犳 犻 犲 狊狋 犺 犲犱 犲 狋 犲 狉 犿 犻 狀 犪 狋 犻 狅 狀犪 狀 犱犮 狅 狀 犳 犻 狉 犿 犪 狋 犻 狅 狀狅 犳犳 犾 狅 狀 犻 犮 犪 犿 犻 犱狉 犲 狊 犻 犱 狌 犲 狊犻 狀犳 狅 狅 犱犫 狔犌 犪 狊犮 犺 狉 狅 犿 犪 狋 狅 犵 狉 犪 狆 犺 狔犪 狀 犱 犾 犻 狇 狌 犻 犱犿 犪 狊 狊狊 狆 犲 犮 狋 狉 狅 犿 犲 狋 狉 狔 犜 犺 犻 狊狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱 犻 狊犪 狆 狆 犾 犻 犮 犪 犫 犾 犲狋