中华人民共和国出入境检验检疫行业标准�������������番茄环斑病毒检疫鉴定方法�������������������������������������������������������发布����������实施中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布前言本标准按照ＧＢ／Ｔ１．１—２００９给出的规则起草。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中国检验检疫科学研究院、中华人民共和国厦门出入境检验检疫局、中华人民共和国北京出入境检验检疫局。本标准主要起草人：陈红运、邓丛良、陈青、赵文军、黄文胜、廖富荣、林石明、朱水芳。Ⅰ犛犖／犜２６７０—２０１０番茄环斑病毒检疫鉴定方法１范围本标准规定了番茄环斑病毒检疫鉴定方法。本标准适用于可能携带番茄环斑病毒的进境种子、苗木、组培苗等繁殖材料的检疫与鉴定。２规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。ＳＮ／Ｔ１８６０植物病毒免疫电镜检测方法ＳＮ／Ｔ２１２２进出境植物及植物产品检疫抽样３原理３．１学名与分类地位学名：ｔｏｍａｔｏｒｉｎｇｓｐｏｔｖｉｒｕｓ缩写：ＴｏＲＳＶ分类地位：豇豆花叶病毒科（Ｃｏｍｏｖｉｒｉｄａｅ）；线虫传多面体病毒属（犖犲狆狅狏犻狉狌狊）。其他资料参见附录Ａ。３．２粒体形态番茄环斑病毒粒体为等轴对称二十面体，直径２８ｎｍ。３．３基因组基因组由两条单链正义ＲＮＡ组成，ＲＮＡ１为８．２ｋｂ，ＲＮＡ２为７．３ｋｂ。多个分离物的基因组已被测序，各分离物之间序列同源性较低，根据依赖于ＲＮＡ的ＲＮＡ聚合酶编码区序列设计ＰＣＲ引物可检测烟草株系（Ｔｏｂａｃｃｏｓｔｒａｉｎ）、桃黄芽花叶株系（Ｐｅａｃｈｙｅｌｌｏｗｂｕｄｍｏｓａｉｃｓｔｒａｉｎ）、葡萄黄脉株系（Ｇｒａｐｅｙｅｌｌｏｗｖｅｉｎｓｔｒａｉｎ）及多个ＴｏＲＳＶ分离物。４仪器设备、用具及试剂４．１仪器设备酶联检测仪、天平（感量，１／１００００ｇ）、ＰＣＲ仪、电泳仪、电泳槽、凝胶成像系统、隔离温室、组织捣碎机、恒温水浴、低温冰箱等。４．２用具微量移液器（２．５μＬ、１０μＬ、２０μＬ、１００μＬ、２００μＬ、１０００μＬ）、酶联板、研钵等。１犛犖／犜２６７０—２０１０４．３试剂酶联免疫吸附测定试剂（见附录Ｂ）...
