SNT 2012-2019 出口食醋中苯甲酸、山梨酸的检测方法 液相色谱及液相色谱-质谱质谱法.pdf

书 书 书犐 犆犛 犆 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准犛犖犜 代替 出口食醋中苯甲酸、山梨酸的检测方法液相色谱及液相色谱质谱质谱法犇犲 狋 犲 狉犿 犻 狀 犪 狋 犻 狅 狀狅 犳犫 犲 狀 狕 狅 犻 犮犪 犮 犻 犱犪 狀 犱狊 狅 狉 犫 犻 犮犪 犮 犻 犱犻 狀狏 犻 狀 犲 犵 犪 狉犳 狅 狉犲 狓 狆 狅 狉 狋犔犆犪 狀 犱犔犆 犕犛犕犛犿犲 狋 犺 狅 犱 发布 实施中华人民共和国海关总署发 布书 书 书前言本标准是按照 给出的规则编写。本标准代替 进出口食醋中苯甲酸、山梨酸的检测方法液相色谱法，除编辑性修改外，主要变化如下：本标准增加确证法；标准名称改为出口食醋中苯甲酸山梨酸的检测方法液相色谱及液相色谱质谱法。本标准由中华人民共和国海关总署提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国太原海关、山西中医药大学。本标准主要起草人：花锦、宋欢、高媛惠、张鑫鑫、刘晓琳、郭丽丽。本标准所代替标准的历次版本发布情况为：。犛犖犜 出口食醋中苯甲酸、山梨酸的检测方法液相色谱及液相色谱质谱质谱法范围本标准规定了进出口食醋中苯甲酸、山梨酸的液相色谱检测以及液相色谱质谱质谱检测和确证方法。本标准适用于食醋中苯甲酸、山梨酸的测定和确证。规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本标准。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本标准。分析实验室用水规格和试验方法方法提要试样在酸性条件下蒸馏，馏出液采用液相色谱紫外检测器或液相色谱质谱质谱仪测定，外标峰面积法定量。试剂和材料除有特殊说明以外，所用试剂均为分析纯，水为一级水。甲醇：色谱纯。乙腈：色谱纯。柠檬酸（）。柠檬酸三钠（）。酒石酸。乙酸铵：色谱纯。氯化钠。碳酸氢钠。柠檬酸缓冲溶液（）：称取柠檬酸（）和柠檬酸三钠（）加水溶解定容至。酒石酸（）：取 酒石酸（）用水定容到 。碳酸氢钠溶液（）：称取碳酸氢钠（），加水至 ，振摇溶解。乙酸铵溶液：称取 乙酸铵（），加水至，振摇溶解。苯甲酸钠标准物质（，号：），纯度 ：或苯甲酸（，号：），纯度 ，或经国家认证并授予标准物质证书的标准物质。山梨酸钾标准物质（，号：），纯度 ；或山梨酸（，号：），纯度 ，或经国家认证并授予标准物质证书的标准物质。苯甲酸、山梨酸标准储备溶液（）：分别准确称取苯甲酸钠（）和山梨酸钾（）标犛犖犜 准物质 、（精确到 ），用水溶解并分别定容至 。于贮存。当使用苯甲酸和山梨酸标准品时，需要用甲醇溶解并定容。苯甲酸、山梨酸标准混合液：准确移取苯甲酸、山梨酸标准储备液（）各 ，移入 容量瓶中，用水定容。置于保存周。空白样品提取液：采用空白样品，按照 步骤得到的溶液。消泡剂：信越 。滤膜：，水系。滤膜：，水系。仪器和设备 天平：感量为 和。高效液相色谱仪：配紫外检测器。高效液相色谱质谱质谱仪，配有电喷雾离子源（）。蒸馏装置：参见附录。测定步骤 试样的处理准确称取 试样，加入 氯化钠（），酒石酸溶液（），滴消泡剂（），加水至约 ，混匀后，进行蒸馏（蒸馏速度约为 ），收集约 馏出液，用水定容至 。用 的滤膜过滤后，待液相色谱测定（如需质谱法确证，用 的滤膜过滤）。测定 液相色谱条件液相色谱条件如下：）色谱柱：柱（，或相当者）；）流动相：甲醇：乙腈：柠檬酸缓冲溶液（，）；）流速：；）检测波长：；）柱温：；）进样量：。高效液相色谱质谱质谱条件高效液相色谱质谱质谱条件如下：）色谱柱：柱（，或相当者）；）流动相：甲醇 乙酸铵溶液，梯度洗脱程序见表；表梯度洗脱程序时间（）乙酸铵（）甲醇（）犛犖犜 表（续）时间（）乙酸铵（）甲醇（）流速：；）柱温：；）进样量：；）离子源：电喷雾离子源；）扫描方式：负离子；）检测方式：多反应监测（）；）质谱质谱参考条件参见附录。液相色谱测定根据样液中苯甲酸和山梨酸的含量，选定浓度相近的标准混合工作液，保证样品溶液中苯甲酸、山梨酸的响应值在线性范围内，标准工作液与样液等体积参差进样进行测定。在上述色谱条件下，苯甲酸和山梨酸的参考保留时间分别约为 和 。苯甲酸、山梨酸标准溶液色谱图参见附录中。液相色谱质谱质谱测定和确证按照液相色谱质谱质谱条件测定样品和基质标准工作溶液，如果目标化合物的保留时间与标准品保留时间相差不超过，所选择的离子对均出现，且定性离子对的丰度比与浓度相当基质标准工作溶液的丰度比一致，丰度比允许偏差不超过表规定的范围，则可确定为样品中存在对应的待测分析物。苯甲酸、山梨酸标准溶液多反应监测图参见附录。表定性测定时相对离子丰度的最大允许偏差相对丰度（基峰）允许的相对偏差 到 到 空白试验除不加式样外，均按上述步骤进行。结果计算和表述用色谱数据处理软件外标法或按式（）计算，计算结果需扣除空白值：犛犖犜 犡犻犃犮犻犞 犃犛犿 （）式中：犡犻 试样中苯甲酸或山梨酸含量，单位为毫克每千克（）；犃 样液中苯甲酸或山梨酸的峰面积；犮犻 标准工作液中苯甲酸或山梨酸的浓度，单位为微克每毫升（）；犞 样液最终定容体积，单位为毫升（）；犃犛 标准工作液中苯甲酸或山梨酸的峰面积；犿 试样的质量，单位为克（）。计算结果以待测物的平行测定值的算术平均值表示。当计算结果大于等于时，保留到三位有效数字；当计算结果小于等于时，保留到两位有效数字。定量限、正确度（回收率）测定低限 测定低限液相色谱法及液相色谱质谱质谱法中苯甲酸和山梨酸的定量限均为 。回收率液相色谱及液相色谱质谱质谱法的测定回收率参见附录。犛犖犜 附录犃（资料性附录）蒸馏装置图+?图犃 蒸馏装置图犛犖犜 附录犅（资料性附录）质谱仪器参考条件犅 质谱仪器参考条件）毛细管电压：；）去溶剂气温度：氮气 ；）锥孔反吹气：氮气；）去溶剂气流速：氮气 ；）离子源温度：；）碰撞气体：氩气 。表犅 苯甲酸和山梨酸的定性、定量离子对及碰撞能量目标物名称定性离子对（）定量离子对（）碰撞气能量苯甲酸 山梨酸 为定量离子；对于不同质谱仪器，仪器参数可能存在差异，测定前应将质谱参数优化到最佳。非商业性声明：附录所列参考质谱条件是在 液质联用仪上完成的，此处列出试验用仪器型号仅为提供参考，并不涉及商业目的，鼓励标准使用者尝试不同厂家或型号的仪器。犛犖犜 附录犆（资料性附录）标准品液相色谱图及多反应监测（犕犚犕）色谱图图犆 苯甲酸、山梨酸标准品液相色谱图注：图中各峰分别为：苯甲酸、：山梨酸图犆 苯甲酸标准物质多反应监测（犕犚犕）色谱图图犆 山梨酸标准物质多反应监测（犕犚犕）色谱图犛犖犜 附录犇（资料性附录）正确度（回收率）表犇 液相色谱和液相色谱质谱质谱法的回收率名称添加水平（）液相色谱法液相色谱串联质谱法苯甲酸 山梨酸 犛犖犜 犉 狅 狉 犲狑狅 狉 犱犜犺 犻 狊狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱犻 狊犪 犮 犮 狅 狉 犱 犪 狀 犮 犲 犱狑 犻 狋 犺犌犅犜 犜犺 犻 狊狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱狑犪 狊狆 狉 狅狆 狅 狊 犲 犱犫 狔犪 狀 犱犻 狊狌 狀 犱 犲 狉狋 犺 犲犮 犺 犪 狉 犵 犲狅 犳狋 犺 犲犌犲 狀 犲 狉 犪 犾犃犱犿 犻 狀 犻 狊 狋 狉 犪 狋 狅狅 狀狅 犳犆狌 狊 狋 狅犿狊狅 犳狋 犺 犲犘 犲 狅狆 犾 犲 狊犚 犲 狆 狌 犾 犫 犻 犮狅 犳犆犺 犻 狀 犪犜犺 犻 狊狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱狑犪 狊犱 狉 犪 犳 狋 犲 犱犫 狔狋 犺 犲犜 犪 犻犢狌 犪 狀犆狌 狊 狋 狅犿狊犇 犻 狊 狋 狉 犻 犮 狋狅 犳狋 犺 犲犘 犲 狅狆 犾 犲 狊犚 犲 狆 狌 犫 犾 犻 犮狅 犳犆犺 犻 狀 犪，犛犺 犪 狀 狓 犻狌 狀 犻 狏 犲 狉 狊 犻 狋 狔狅 犳狋 狉 犪 犱 犻 狋 犻 狅 狀 犪 犾犆犺 犻 狀 犲 狊 犲犿犲 犱 犻 犮 犻 狀 犲犜犺 犻 狊犿犪 犻 狀犱 狉 犪 犳 狋 犲 狉 狊狅 犳狋 犺 犻 狊狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱犪 狉 犱犎狌 犪犑 犻 狀，犛狅 狀 犵犎狌 犪 狀，犌犪 狅犢狌 犪 狀 犺 狌 犻，犣犺 犪 狀 犵犡 犻 狀 狓 犻 狀，犔 犻 狌犡 犻 犪 狅犾 犻 狀，犌狌 狅犔 犻犾 犻犖狅 狋 犲：犜犺 犻 狊犈 狀 犵 犾 犻 狊 犺狏 犲 狉 狊 犻 狅 狀，犪狋 狉 犪 狀 狊 犾 犪 狋 犻 狅 狀犳 狉 狅犿狋 犺 犲犆犺 犻 狀 犲 狊 犲狋 犲 狓 狋，犻 狊狊 狅 犾 犲 犾 狔犳 狅 狉犵 狌 犻 犱 犪 狀 犮 犲犛犖犜 犇犲 狋 犲 狉犿 犻 狀 犪 狋 犻 狅 狀狅 犳犫 犲 狀 狕 狅 犻 犮犪 犮 犻 犱犪 狀 犱狊 狅 狉 犫 犻 犮犪 犮 犻 犱犻 狀狏 犻 狀 犲 犵 犪 狉犳 狅 狉犲 狓狆狅 狉 狋犔犆犪 狀 犱犔犆 犕犛犕犛犿犲 狋 犺 狅 犱犛犮 狅狆 犲犜犺 犻 狊狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱狊 狆 犲 犮 犻 犳 犻 犲 狊狋 犺 犲犿犲 狋 犺 狅 犱狅 犳狊 犪犿狆 犾 犲犱 犲 狋 犲 狉犿 犻 狀 犪 狋 犻 狅 狀犪 狀 犱犮 狅 狀 犳 犻 狉犿犪 狋 犻 狅 狀狅 犳犫 犲 狀 狕 狅 犻 犮犪 犮 犻 犱犪 狀 犱狊 狅 狉 犫 犻 犮犪 犮 犻 犱犻 狀狏 犻 狀 犲 犵 犪 狉犳 狅 狉犲 狓狆 狅 狉 狋犫 狔犾 犻 狇 狌 犻 犱犮 犺 狉 狅犿犪 狋 狅犵 狉 犪 狆 犺 狔 狋 犪 狀 犱 犲犿犿犪 狊 狊狊 狆 犲 犮 狋 狉 狅犿犲 狋 狉 狔犜犺 犻 狊狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱犻 狊犪 狆 狆 犾 犻 犮 犪 犫 犾 犲狋 狅狋 犺 犲犱 犲 狋 犲 狉犿 犻 狀 犪 狋 犻 狅 狀狅 犳犫 犲 狀 狕 狅 犻 犮犪 犮 犻 犱犪 狀 犱狊 狅 狉 犫 犻 犮犪 犮 犻 犱犻 狀狏 犻 狀 犲 犵 犪 狉犖狅 狉犿犪 狋 犻 狏犲狉 犲 犳 犲 狉 犲狀犮 犲犜犺 犲犳 狅 犾 犾 狅狑 犻 狀 犵狀 狅 狉犿犪 狋 犻 狏 犲犱 狅 犮 狌犿犲 狀 狋 狊犮 狅 狀 狋 犪 犻 狀狆 狉 狅狏 犻 狊 犻 狅 狀 狊狑犺 犻 犮 犺，狋 犺 狉 狅 狌 犵 犺狉 犲 犳 犲 狉 犲 狀 犮 犲犻 狀狋 犺 犻 狊狋 犲 狓 狋，犮 狅 狀 狊 狋 犻 狋 狌 狋 犲狆 狉 狅狏 犻 狊 犻 狅 狀 狊狅 犳狋 犺 犻 狊狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱 犉狅 狉犱 犪 狋 犲 犱狉 犲 犳 犲 狉 犲 狀 犮 犲 狊，狊 狌 犫 狊 犲 狇 狌 犲 狀 狋犪犿犲 狀 犱犿犲 狀 狋 狊狋 狅，狅 狉狉 犲 狏 犻 狊 犻 狅 狀 狊狅 犳犪 狀 狔狅 犳狋 犺 犲 狊 犲狆 狌 犫 犾 犻 犮 犪 狋 犻 狅 狀 狊犱 狅狀 狅 狋犪 狆 狆 犾 狔 犎狅狑犲 狏 犲 狉狆 犪 狉 狋 犻 犲 狊狋 狅犪 犵 狉 犲 犲犿犲 狀 狋 狊犫 犪 狊 犲 犱狅 狀狋 犺 犻 狊狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱犪 狉 犲犲 狀 犮 狅 狌 狉 犪 犵 犲 犱狋 狅犻 狀 狏 犲 狊 狋 犻 犵 犪 狋 犲狋 犺 犲狆 狅 狊 狊 犻 犫 犻 犾 犻 狋 狔狅 犳犪 狆 狆 犾 狔 犻 狀 犵狋 犺 犲犿狅 狊 狋狉 犲 犮 犲 狀 狋犲 犱 犻 狋 犻 狅 狀 狊狅 犳狋 犺 犲狀 狅 狉犿犪 狋 犻 狏 犲犱 狅 犮 狌 犿犲 狀 狋 狊犻 狀 犱 犻 犮 犪 狋 犲 犱犫 犲 犾 狅狑 犉狅 狉狌 狀 犱 犪 狋 犲 犱狉 犲 犳 犲 狉 犲 狀 犮 犲 狊，狋 犺 犲犾 犪 狋 犲 狊 狋犲 犱 犻 狋 犻 狅 狀狅 犳狋 犺 犲狀 狅 狉犿犪 狋 犻 狏 犲犱 狅 犮 狌犿犲 狀 狋狉 犲 犳 犲 狉 狉 犲 犱狋 狅犪 狆 狆 犾 犻 犲 狊犌犅犜 犠犪 狋 犲 狉犳 狅 狉犪 狀 犪 犾 狔 狋 犻 犮 犪 犾犾 犪 犫 狅 狉 犪 狋 狅 狉 狔狌 狊 犲 犛狆 犲 犮 犻 犳 犻 犮 犪 狋 犻 狅 狀犪 狀 犱狋 犲 狊 狋犿犲 狋 犺 狅 犱 狊犘 狉 犻 狀 犮 犻 狆 犾 犲犜犺 犲狋 犲 狊 狋狊 犪犿狆 犾 犲犻 狊犱 犻 狊 狋 犻 犾 犾 犲 犱犻 狀犪 犮 犻 犱犮 狅 狀