SNT 2160-2008 动物源食品中氢化泼尼松残留量检测方法 气相色谱-质谱质谱法.pdf

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准犛 犖犜 动物源食品中氢化泼尼松残留量检测方法气相色谱 质谱 质谱法犇 犲 狋 犲 狉 犿 犻 狀 犪 狋 犻 狅 狀狅 犳狆 狉 犲 犱 狀 犻 狊 狅 犾 狅 狀 犲 狉 犲 狊 犻 犱 狌 犲 狊 犻 狀犪 狀 犻 犿 犪 犾 犳 狅 狅 犱犌 犆 犕 犛犕 犛犿 犲 狋 犺 狅 犱 发布 实施中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发 布前言本标准的附录 为资料性附录。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准由中国检验检疫科学研究院负责起草。本标准主要起草人：仲维科、丁罡斗、李翔、李礼、刘汉霞、张垚、孙毅之。本标准系首次发布的出入境检验检疫行业标准。犛 犖犜 动物源食品中氢化泼尼松残留量检测方法气相色谱质谱 质谱法范围本标准规定了动物源食品中氢化泼尼松残留量的检测方法。本标准适用于动物源食品中氢化泼尼松残留量的检测。测定方法 方法提要样品用乙腈提取，经 固相萃取柱净化，净化后的氢化泼尼松在酸性条件下用 快速氧化衍生，气相色谱二级质谱法（）检测，外标法定量。试剂与材料 甲醇（色谱纯）。乙腈（色谱纯）。丙酮（色谱纯）。正己烷（色谱纯）。二氯甲烷（色谱纯）。乙酸乙酯（色谱纯）。乙醇（色谱纯）。氢化泼尼松标准品（，：，分子式 ）：纯度。氢化泼尼松标准储备溶液：无水甲醇。乙酸乙酸钠缓冲溶液（，在 乙酸钠溶液中加入 乙酸）。酸性 溶液（取 水，加入 浓硫酸，再加 ）。酶解汁（含葡萄糖醛苷酶和磺酯酶，大于 ）。固相萃取柱（，）。碳酸氢钠溶液（）。仪器和设备 气相色谱 离子质谱（源）。氮吹仪。高速离心机。振荡器。涡旋振荡器。固相萃取装置。超声清洗器。测定步骤 提取称取 组织样品（猪肉、猪肝和猪肾）于组织捣碎器中粉碎成浆状，置于 离心管内，加入 的乙酸乙酸钠缓冲溶液，再加入 酶解汁，振荡 、超声 后于 水浴中加热。冷却后加入 乙腈并振荡 ，以 离心分离 ，将上层乙腈犛 犖犜 转移至另一离心管内，加入 正己烷、二氯甲烷后振荡，再以 离心 ，然后移取中间层至比色管内并在 条件下氮气吹干。将吹干后的残渣用 乙醇涡旋溶解，再加入 水混匀，备过 柱。净化 小柱分别用 甲醇和 水活化，乙醇 水（体积比）平衡，加入上述乙醇上样溶液后，依次用 水、丙酮水（体积比）、甲醇水（体积比）淋洗并抽干，再用 正己烷淋洗，最后用 乙酸乙酯洗脱，收集洗脱液并用氮气吹干。衍生化将上述残渣用 乙腈复溶，加 酸性 氧化液并混匀，于 水浴中加热 ，冷却后依次加入 碳酸钠溶液、去离子水、二氯甲烷，超声提取 后于 离心 。将下层有机相转移、氮气吹干，加乙酸乙酯定容至 ，用于 测定。测定 仪器条件）色谱柱：或其他性能相当的柱子（）；）色谱柱温度：（保持 ），以 升温至 （保持 ），再以 升温至 （保持 ）；）进样口温度：；）离子源温度：；）传输线温度：；）离子源：电子轰击电离源；）测定方式：二级质谱监测模式检测（）；）监测离子：氢化泼泥松母离子 ，子离子 、；）载气：高纯 ，纯度 ；）进样方式：不分流进样；）进样量：；）电离能量：；）载气流量：；）碰撞诱导解离（）电压为：。色谱质谱确证和测定在上述仪器条件下（）经氧化衍生的氢化泼尼松保留时间约为 。气相色谱 二级质谱监测模式检测的总离子流图见附录图，采用氢化泼尼松的二级碎片离子为定量离子，其为 。符合下列条件，即可确定样品中含有氢化泼尼松：在保留时间 附近有峰出现，选定的质谱碎片离子在样品的二级质谱监测图中都能出现，样品峰的质谱图中母离子与子离子丰度比 之间。气相色谱 质谱图参见附录 图 和图 。空白试验除不加试样外，按上述测定步骤进行。结果计算计算见式（）：犡犃犮犞犃犿（）式中：犡 试样中氢化泼尼松残留含量，单位为微克每克（）；犛 犖犜 犃 样液中氢化泼尼松的峰面积；犃 标准工作溶液中氢化泼尼松的峰面积；犮 标准工作溶液中氢化泼尼松浓度，单位为微克每毫升（）；犞 样液最终定容体积，单位为毫升（）；犿 试样的质量，单位为克（）。注：计算结果需将空白值扣除。检出限、线性范围、精密度及回收率 检出限本标准检出限为：。线性范围氢化泼尼松标准品浓度在 时线性相关系数大于 。精密度和回收率氢化泼尼松添加浓度在 时，相对标准偏差为，平均回收率为 （见表）。表回收率和精密度试验结果（狀）添加浓度（）猪肝猪肾猪肉回收率均值相对标准偏差回收率均值相对标准偏差回收率均值相对标准偏差 犛 犖犜 附录犃（资料性附录）标准物衍生化后的气相色谱 质谱图图 犃 氢化泼尼松标准品衍生物气相色谱 二级质谱监测模式的总离子流图犛 犖犜 图犃 氢化泼尼松标准品衍生物气相色谱 全扫描质谱图图 犃 氢化泼尼松标准品衍生物气相色谱二级质谱监测模式的质谱图（犕 犛犕 犛）犛 犖犜 犜犖犛中华人民共和国出入境检验检疫行业标准动物源食品中氢化泼尼松残留量检测方法气相色谱 质谱质谱法 中 国 标 准 出 版 社 出 版北京复兴门外三里河北街 号邮政编码：网址 电话：中国标准出版社秦皇岛印刷厂印刷开本 印张 字数 千字 年 月第一版 年 月第一次印刷印数 书号：定价 元