中华人民共和国出入境检验检疫行业标准犛犖／犜２４７４—２０１０大豆疫霉病菌实时荧光犘犆犚检测方法犇犲狋犲犮狋犻狅狀狅犳犘犺狔狋狅狆犺狋犺狅狉犪狊狅犼犪犲狑犻狋犺狉犲犪犾狋犻犿犲犘犆犚２０１００１１０发布２０１００７１６实施中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布前言请注意本文件的某些内容可能涉及专利，本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国深圳出入境检验检疫局、南京农业大学、中华人民共和国辽宁出入境检验检疫局、中国检验检疫科学研究院、中华人民共和国上海出入境检验检疫局、中华人民共和国黑龙江出入境检验检疫局、中国农业大学。本标准主要起草人：章桂明、王源超、吴际云、彭金火、严进、程颖慧、王颖、易建平、崔澍、杨伟东、杨立群、聂文革、缪建锟。本标准为首次发布的出入境检验检疫行业标准。Ⅰ犛犖／犜２４７４—２０１０大豆疫霉病菌实时荧光犘犆犚检测方法１范围本标准规定了大豆疫霉病菌（犘犺狔狋狅狆犺狋犺狅狉犪狊狅犼犪犲Ｋａｕｆｍａｎｎ＆Ｇｅｒｄｅｍａｎｎ）的实时荧光ＰＣＲ检测鉴定方法。本标准适用于大豆夹杂的土壤传带大豆疫霉病菌的检测。２规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。ＧＢ／Ｔ６６８２分析实验室用水规格和试验方法ＳＮ／Ｔ１１３１大豆疫霉病菌检疫鉴定方法３原理３．１分类学地位学名：犘犺狔狋狅狆犺狋犺狅狉犪狊狅犼犪犲Ｋａｕｆｍａｎｎ＆Ｇｅｒｄｅｍａｎｎ病害名称：大豆疫霉病菌；常用英文名：Ｓｏｙｂｅａｎ犘犺狔狋狅狆犺狋犺狅狉犪ＲｏｏｔＲｏｔ分类地位：藻菌界Ｃｈｒｏｍｉｓｔａ，卵菌门Ｏｏｍｙｃｏｔａ，腐霉目Ｐｙｔｈｉａ１ｅｓ，腐霉科Ｐｙｔｈｉａｃｅａｅ，疫霉属犘犺狔狋狅狆犺狋犺狅狉犪３．２实时荧光犘犆犚利用荧光信号伴随着ＰＣＲ产物的增加而增强的原理，在ＰＣＲ扩增过程中，连续不断地检测反应体系中荧光信号的变化，根据荧光信号基线的平均值和平均标准差，得出大于平均值的荧光值即阈值，收集荧光信号增强到预定阈值时的ＰＣＲ循环次数，即Ｃｔ值。根据Ｃｔ值判断样品是否带有大豆疫霉病菌。...
