SNT 2430-2010 进出口食品中罗丹明B的检测方法.pdf

书书书中华人民共和国出入境检验检疫行业标准犛 犖犜 进出口食品中罗丹明犅的检测方法犇 犲 狋 犲 狉 犿 犻 狀 犪 狋 犻 狅 狀狅 犳 狉 犺 狅 犱 犪 犿 犻 狀 犲犅犻 狀犳 狅 狅 犱 狊 犳 狅 狉 犻 犿 狆 狅 狉 狋 犪 狀 犱犲 狓 狆 狅 狉 狋 发布 实施中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发 布书书书前言本标准的附录、附录、附录、附录 和附录均为资料性附录。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准由中华人民共和国重庆出入境检验检疫局、中华人民共和国湖南出入境检验检疫局负责起草。本标准主要起草人：王国民、李贤良、张雷、王美玲、周启明、李应国、唐柏彬、魏颖、戴华。犛 犖犜 进出口食品中罗丹明犅的检测方法范围本标准规定了进出口食品中罗丹明的液相色谱检测以及液相色谱 质谱质谱检测和确证方法。本标准适用于腊鱼、腊肉、香肠、果汁、果酱、辣椒粉、辣椒油、糖果、话梅、葱头及饼干中罗丹明 的测定和确证。方法提要用乙酸乙酯 环己烷提取试样中的罗丹明，经凝胶色谱净化系统净化，用液相色谱 荧光检测器或液相色谱 质谱质谱仪测定和确证，外标峰面积法定量。试剂和材料除特殊注明外，所有试剂均为分析纯，水为二次蒸馏水。甲醇：高效液相色谱级。甲酸：高效液相色谱级。乙酸乙酯。环己烷。乙酸乙酯 环己烷（，体积比）溶液：将乙酸乙酯（）和环己烷（）等体积混合。甲酸：取 甲酸（），用水定容至 。罗丹明标准品：分子式 ，编号：，纯度大于等于 。罗丹明标准储备液：准确称取适量罗丹明标准品（），用甲醇配制成浓度为 的标准储备液。此溶液在避光保存。空白样品提取液：采用空白样品，按照 和 进行提取和净化后得到的溶液。标准工作溶液：根据需要用空白样品提取液将标准储备液稀释成 、的标准工作溶液。置于避光保存。微孔滤膜，有机系。仪器和设备 高效液相色谱仪配荧光检测器。高效液相色谱 质谱质谱仪，配电喷雾离子源（）。电子天平：感量为 和 。凝胶色谱净化系统（）。组织捣碎机。超声波清洗器。旋涡混匀器。旋转蒸发仪。离心机：转速不低于 。具塞塑料离心管：。犛 犖犜 试样的制备与保存 试样制备 腊鱼、腊肉、香肠、辣椒粉、葱头：取有代表性样约 ，腊鱼、腊肉、香肠需去皮，用组织捣碎机捣碎，装入洁净容器作为试样，密封并做好标识，于 下保存。果酱、辣椒油、饼干：取有代表性样品约 ，搅拌均匀后装入洁净容器内密封并做好标识，于下保存。话梅：取可食部分约 ，用组织捣碎机捣碎，装入洁净容器作为试样，密封并做好标识，于下保存。糖果：取约 糖果，硬糖内层用滤纸，外层用塑料纸包好，然后用锤子捶碎；软糖用剪刀剪碎后，各自混合后装入洁净容器内密封并做好标识，于下保存。果汁饮料：取有代表性样约 ，混匀后装入洁净容器内密封并做好标识，于 下保存。试样的保存制样操作过程中应防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。测定步骤 提取 腊鱼、腊肉、香肠、果汁、果酱、葱头、糖果、话梅、辣椒粉及饼干称取 样品（精确至 ）于 离心管中，准确加入 乙酸乙酯 环己烷溶液（），于旋涡混匀器上混合提取 ，再超声提取 后，于 离心 ，上清液过 微孔滤膜后作待净化液。辣椒油称取 样品（精确至 ）于 容量瓶中，加入 乙酸乙酯 环己烷溶液（），超声提取 后，用乙酸乙酯 环己烷溶液（）定容。取 溶液过 微孔滤膜后作待净化液。净化取 待净化液于 样品管中，用于 进行净化（参考条件参见附录 中第 章），收集洗脱液，于 下旋转蒸发至干。残渣用 甲醇溶解后，过 微孔滤膜，供 荧光测定，或用 甲醇水定容，过 微孔滤膜，供 测定或确证。测定 液相色谱 荧光检测条件）色谱柱：柱，（内径），或相当者；）流动相：甲醇 水，梯度洗脱程序见表；表流动相梯度洗脱程序时间 甲醇水 犛 犖犜 ）流速：；）柱温：；）进样量：；）激发波长（），发射波长（）。液相色谱 质谱质谱条件）色谱柱：柱，（内径），或相当者；）流动相：甲醇 甲酸，梯度洗脱程序见表；表流动相梯度洗脱程序时间 甲醇 甲酸 ）流速：；）柱温：；）进样量：；）离子源：电喷雾离子源；）扫描方式：正离子；）检测方式：多反应监测（）；）质谱质谱参考条件参见附录。液相色谱测定按照 液相色谱 荧光检测条件对标准工作溶液及样液等体积参插进样测定，样品中待测物含量应在标准曲线范围之内，如果含量超出标准曲线范围，应进行适当稀释后测定。在该条件下，罗丹明的保留时间约为 。液相色谱 荧光色谱图参见附录中图。液相色谱 质谱质谱测定和确证按照 液相色谱 质谱质谱条件测定样液和标准工作溶液，外标标准曲线法测定样液中的罗丹明含量。样品中待测物含量应在标准曲线范围之内，如果含量超出标准曲线范围，应用空白样品提取液进行适当稀释。在上述色谱条件下，罗丹明 的质量色谱峰保留时间约为 。标准品的多反应监测离子色谱图参见附录 中图 。在相同试验条件下，样品与标准工作液中待测物质的质量色谱峰相对保留时间在 以内，并且在扣除背景后的样品质量色谱图中，所选择的离子对均出现，同时与标准品的相对丰度允许偏差不超过表规定的范围，则可判断样品中存在对应的被测物。表使用液相色谱质谱质谱定性时相对离子丰度最大允许误差相对丰度（基峰）相对离子丰度最大允许误差 大于 至小于等于 大于 至小于等于 小于等于 空白试验空白样品按上述测定步骤进行。犛 犖犜 结果计算和表述用数据处理软件中的外标法，或绘制标准曲线，按照式（）计算试样中罗丹明的含量。犡犮犮（）犞犿 （）式中：犡 试样中罗丹明的含量，单位为毫克每千克（）；犮 由标准曲线得到的样液中罗丹明的浓度，单位为纳克每毫升（）；犮 由标准曲线得到的空白试验中罗丹明的浓度，单位为纳克每毫升（）；犞 样液最终定容体积，单位为毫升（）；犿 最终样液所代表的试样质量，单位为克（）。测定低限、回收率 测定低限液相色谱 荧光法及液相色谱 质谱质谱法的测定低限均为 。液相色谱 荧光及液相色谱 质谱质谱法测定的回收率液相色谱 荧光及液相色谱 质谱质谱法的测定参见附录。犛 犖犜 附录犃（资料性附录）犌 犘 犆参考条件）参考条件：）凝胶色谱净化系统 （）；）凝胶柱规格 （内径）；）色谱柱填料 （）；）流动相：乙酸乙酯 环己烷（，体积比）；）流速：；）收集时间：。）非商业性声明：附录所列 参考条件是在美国 公司的仪器上完成的，此处列出试验用仪器型号仅为提供参考，并不涉及商业目的，鼓励标准使用者尝试不同厂家或型号的仪器。犛 犖犜 附录犅（资料性附录）质谱参考条件）质谱参考条件：）毛细管电压：；）离子源温度：；）脱溶剂气温度：；）锥孔气流量（氮气）：；）脱溶剂气流量（氮气）：；）碰撞气流速（氩气）：；）碰撞室压力（氩气）：（）；）定性离子对、定量离子对、锥孔电压、碰撞能量、驻留时间见表。表 犅 待测物定性离子对、定量离子对、锥孔电压、碰撞能量、驻留时间化合物母离子（）子离子（）锥孔电压碰撞能量 驻留时间罗丹明 离子为定量离子；对于不同质谱仪器，仪器参数可能存在差异，测定前应将质谱参数优化到最佳。）非商业性声明：附录所列参考质谱条件是在 型液质联用仪上完成的，此处列出试验用仪器型号仅为提供参考，并不涉及商业目的，鼓励标准使用者尝试不同厂家或型号的仪器。犛 犖犜 附录犆（资料性附录）罗丹明犅的液相色谱 荧光色谱图图 犆 罗丹明犅标准溶液的液相色谱 荧光色谱图犛 犖犜 附录犇（资料性附录）罗丹明犅的多反应监测（犕犚犕）离子色谱图）图 犇 罗丹明犅标准溶液的多反应监测离子色谱图犛 犖犜 附录犈（资料性附录）回收率表 犈 液相色谱 荧光和液相色谱 质谱质谱法的回收率基质种类添加水平（）回收率液相色谱荧光法液相色谱质谱质谱法腊鱼 腊肉 香肠 辣椒粉 辣椒油 果酱 果汁饮料 饼干 糖果 话梅 葱头 犛 犖犜 犉 狅 狉 犲 狑 狅 狉 犱犃 狀 狀 犲 狓犃 犅 犆 犇犪 狀 犱犈狅 犳 狋 犺 犻 狊狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱犪 狉 犲 犻 狀 犳 狅 狉 犿 犪 狋 犻 狏 犲犪 狀 狀 犲 狓 犲 狊 犜 犺 犻 狊狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱狑 犪 狊狆 狉 狅 狆 狅 狊 犲 犱犫 狔犖 犪 狋 犻 狅 狀 犪 犾 犚 犲 犵 狌 犾 犪 狋 狅 狉 狔犆 狅 犿犿 犻 狊 狊 犻 狅 狀犳 狅 狉犆 犲 狉 狋 犻 犳 犻 犮 犪 狋 犻 狅 狀犪 狀 犱犃 犮 犮 狉 犲 犱 犻 狋 犪 狋 犻 狅 狀 犜 犺 犻 狊狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱狑 犪 狊狌 狀 犱 犲 狉 狋 犺 犲犮 犺 犪 狉 犵 犲狅 犳狀 犪 狋 犻 狅 狀 犪 犾 狋 犲 犮 犺 狀 犻 犮 犪 犾犛 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱 犻 狕 犪 狋 犻 狅 狀犆 狅 犿犿 犻 狋 狋 犲 犲狅 狀犳 狅 狅 犱狊 犪 犳 犲 狋 狔犱 犲 狋 犲 犮 狋 犻 狅 狀犳 狅 狉 犻 犿 狆 狅 狉 狋犪 狀 犱犲 狓 狆 狅 狉 狋 犜 犺 犲狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱狑 犪 狊犱 狉 犪 犳 狋 犲 犱犫 狔犆 犺 狅 狀 犵 狇 犻 狀 犵犈 狀 狋 狉 狔 犈 狓 犻 狋 犐 狀 狊 狆 犲 犮 狋 犻 狅 狀犪 狀 犱犙 狌 犪 狉 犪 狀 狋 犻 狀 犲犅 狌 狉 犲 犪 狌狅 犳 狋 犺 犲犘 犲 狅 狆 犾 犲狊犚 犲 狆 狌 犫 犾 犻 犮狅 犳犆 犺 犻 狀 犪 犎 狌 狀 犪 狀犈 狀 狋 狉 狔 犈 狓 犻 狋犐 狀 狊 狆 犲 犮 狋 犻 狅 狀犪 狀 犱犙 狌 犪 狉 犪 狀 狋 犻 狀 犲犅 狌 狉 犲 犪 狌狅 犳狋 犺 犲犘 犲 狅 狆 犾 犲狊犚 犲 狆 狌 犫 犾 犻 犮狅 犳犆 犺 犻 狀 犪 犜 犺 犻 狊狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱 狑 犪 狊犿 犪 犻 狀 犾 狔犱 狉 犪 犳 狋 犲 犱犫 狔 犠 犪 狀 犵犌 狌 狅 犿 犻 狀 犵，犔 犻犡 犻 犪 狀 犾 犻 犪 狀 犵，犣 犺 犪 狀 犵犔 犲 犻，犠 犪 狀 犵 犕 犲 犻 犾 犻 狀 犵，犣 犺 狅 狌犙 犻 犿 犻 狀 犵，犔 犻犢 犻 狀 犵 犵 狌 狅，犜 犪 狀 犵犅 犪 犻 犫 犻 狀，犠 犲 犻 狔 犻 狀 犵犪 狀 犱犇 犪 犻 犺 狌 犪 犛 犖犜 犇 犲 狋 犲 狉 犿 犻 狀 犪 狋 犻 狅 狀狅 犳 狉 犺 狅 犱 犪 犿 犻 狀 犲犅犻 狀犳 狅 狅 犱 狊犳 狅 狉犻 犿 狆 狅 狉 狋犪 狀 犱犲 狓 狆 狅 狉 狋犛 犮 狅 狆 犲犜 犺 犻 狊狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱狊 狆 犲 犮 犻 犳 犻 犲 狊狋 犺 犲犿 犲 狋 犺 狅 犱 狊狅 犳狊 犪 犿 狆 犾 犲狆 狉 犲 狆 犪 狉 犪 狋 犻 狅 狀犪 狀 犱狇 狌 犪 犾 犻 犳 犻 犲 犱犫 狔犾 犻 狇 狌 犻 犱犮 犺 狉 狅 犿 犪 狋 狅 犵 狉 犪 狆 犺 狔 犳 犾 狌 狅 狉 犲 狊 犮 犲 狀 犮 犲狊 狆 犲 犮 狋 狉 狅 犿 犲 狋 狉 狔犪 狀 犱狇 狌 犪 狀 狋 犻 犳 犻 犲 犱犱 犲 狋 犲 狉 犿 犻 狀 犪 狋 犻 狅 狀犫 狔犾 犻 狇 狌 犻 犱犮 犺 狉 狅 犿 犪 狋 狅 犵 狉 犪 狆 犺 狔 犿 犪 狊 狊狊 狆 犲 犮 狋 狉 狅 犿 犲 狋 狉 狔狅 犳 狉 犺 狅 犱 犪 犿 犻 狀 犲犅犻 狀犳 狅 狅 犱 狊犳 狅 狉 犻 犿 狆 狅 狉 狋犪 狀 犱犲 狓 狆 狅 狉 狋 犜 犺 犻 狊狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱 犻 狊犪 狆 狆 犾 犻 犮 犪 犫 犾 犲狋 狅狋 犺 犲犱 犲 狋 犲 狉 犿 犻 狀 犪 狋 犻 狅 狀狅 犳 狉 犺 狅 犱 犪 犿 犻 狀 犲犅犻 狀狊 犿 狅 犽 犲 犱犳 犻 狊 犺，犫 犪 犮 狅 狀，狊 犪 狌 狊 犪 犵 犲，犳 狉 狌 犻 狋犼 狌 犻 犮 犲，犼 犪 犿，犮 犺 犻 犾 犾 犻 狆 狅 狑 犱 犲 狉，犮 犺 犻 犾 犾 犻 狅 犻 犾，犮 犪 狀 犱 狔，狆 狉 犲 狊 犲 狉 狏 犲 犱犪 狉 犫 狌 狋 狌 狊，犫 狌 犾 犫狅 狀 犻 狅 狀 狊犪 狀 犱犮 狅 狅 犽 犻 犲 狊 犘 狉 犻 狀 犮 犻