SNT 2096-2008 食品中丙烯酰胺的检测方法 同位素内标法.pdf

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准犛 犖犜 食品中丙烯酰胺的检测方法同位素内标法犇 犲 狋 犲 狉 犿 犻 狀 犪 狋 犻 狅 狀狅 犳犪 犮 狉 狔 犾 犪 犿 犻 犱 犲 犻 狀犳 狅 狅 犱犐 狊 狅 狋 狅 狆 犲 犻 狀 狋 犲 狉 狀 犪 犾 狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱 发布 实施中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发 布前言本标准的附录 为资料性附录。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准由中国检验检疫科学研究院负责起草。本标准主要起草人：仲维科、李翔、李礼、刘汉霞、陈冬东、雍炜、邱月明。本标准系首次发布的出入境检验检疫行业标准。犛 犖犜 食品中丙烯酰胺的检测方法同位素内标法范围本标准规定了油炸和焙烤食品中丙烯酰胺的检测方法。本标准适用于油炸和焙烤食品中丙烯酰胺的检测。测定方法 方法提要用水提取试样中的丙烯酰胺，提取液经石墨化碳黑层析柱净化，净化液中的丙烯酰胺经溴水衍生化后，用同位素标记的内标法，气相色谱质谱联用仪（）检测。试剂和材料除另有说明，所用试剂均为分析纯，水为去离子水或相当纯度的水。正己烷：重蒸馏。乙酸乙酯：重蒸馏。丙烯酰胺标准品：纯度。（）标记的丙烯酰胺标准品：。丙烯酰胺标准溶液：准确称取适量的丙烯酰胺标准品（精确至 ），用水溶解，配制成浓度为 的标准储备溶液。根据需要用水稀释成适用浓度的标准工作溶液。（）标记的丙烯酰胺标准溶液：移取（）标记的丙烯酰胺标准品，用水配制成浓度为 的标准储备溶液。根据需要用水稀释成适用浓度的标准工作溶液。无水硫酸钠：灼烧，置于干燥器内保存。石墨化碳黑固相萃取柱：内填石墨化碳黑 ，使用前分别用 甲醇和 水活化。溴水：含溴浓度。氢溴酸：浓度 。玻璃棉。硫代硫酸钠水溶液：。仪器和设备 气相色谱 质谱仪，带 源。旋转蒸发器。振荡器。冷冻离心机。氮吹仪。固相提取装置。天平（精确到 ）。测定步骤 提取准确称取已粉碎的样品（精确至）于（）三角瓶中，加水 ，加 浓度为 同位素标记的丙烯酰胺内标，振荡 ，取上清液 于 离心管中，加入犛 犖犜 正己烷 ，振荡 ，离心（），弃去正己烷层。净化将离心管在 下，于高速冷冻离心 ，上清液用玻璃棉过滤，将滤液加入石墨化碳黑固相萃取柱中，收集流出液，再用 纯净水淋洗，合并流出液和淋洗液用于衍生化。衍生化在净化液中加入 溴化钾，用氢溴酸调节净化液至，再加 溴水，在条件下衍生过夜。滴加硫代硫酸钠溶液至黄色消失以除去残余的溴。将溶液转移到分液漏斗中，加 乙酸乙酯，振荡 ，静置分层，再分别用 乙酸乙酯提取两次，合并乙酸乙酯提取液。乙酸乙酯过无水硫酸钠后，旋转浓缩并定容至 ，供气相色谱质谱测定。测定 仪器条件）色谱柱：（内径）（膜厚），（或相当者）；）色谱柱温度：（）（）；）进样口温度：；）离子源温度：；）传输线温度：；）离子源：源；）测定方式：选择离子监测方式；）选择监测离子（）：、；）载气：氦气，纯度 ，流速 ；）进样方式：无分流进样；）进样量：；）电子能量：。色谱质谱确证和测定在上述仪器条件下经衍生化的丙烯酰胺保留时间约为 。气相色谱 质谱选择离子总离子流图参见附录 图 。符合下列条件，即可确定样品中含有丙烯酰胺：在保留时间 附近有峰出现，选定的质谱碎片离子在样品的选择离子质谱图中都能出现，样品峰的质谱图中各碎片离子的相对丰度为：，以上离子相对丰度的偏差比不超过。以 和 定量。气相色谱 质谱图参见附录 中图 和图 。空白试验除不加试样外，按上述测定步骤进行。结果计算和表示 丙烯酰胺和其同位素内标的相对校正因子，按式（）计算：犚犃犮犃犮（）式中：犚 丙烯酰胺和其同位素内标的相对校正因子；犃 丙烯酰胺标样的峰面积（峰高）；犃 同位素内标的峰面积（峰高）；犮 丙烯酰胺标样的浓度，单位为纳克每毫升（）；犮 同位素内标的浓度，单位为纳克每毫升（）。试样中丙烯酰胺的残留含量，按式（）计算（计算结果需将空白值扣除）：犡犃 犿 犃 犚犿（）犛 犖犜 式中：犡 试样中丙烯酰胺含量，单位为纳克每克（）；犚 丙烯酰胺和其同位素内标的相对校正因子；犃 实际样品丙烯酰胺衍生物的峰面积（峰高）；犃 实际测定时同位素内标的峰面积（峰高）；犿 实际测定时同位素内标的量，单位为纳克（）；犿 样品的质量，单位为克（）。测定低限、回收率、精密度 最低检出限本标准测定低限为：。回收率丙烯酰胺添加浓度在 范围，回收率为 。精密度样品添加浓度，相对标准偏差为；添加浓度 ，相对标准偏差为。犛 犖犜 附录犃（资料性附录）标准物气相色谱 质谱图图 犃 丙烯酰胺标准品衍生物气相色谱 质谱选择离子总离子流图（犜 犐 犆）图犃 丙烯酰胺衍生物标准品气相色谱全扫描质谱图犛 犖犜 图犃 丙烯酰胺和其同位素的标记的丙烯酰胺质谱图（犛 犐 犕）犛 犖犜