SNT 1017.6-2019 出口粮谷中叶枯酞残留量检测方法.pdf

书 书 书犐 犆犛 犆 中华人民共和国出入境检验检疫行业标准犛犖犜 代替 出口粮谷中叶枯酞残留量检测方法犕犲 狋 犺 狅 犱犳 狅 狉狋 犺 犲犱 犲 狋 犲 狉犿 犻 狀 犪 狋 犻 狅 狀狅 犳狋 犲 犮 犾 狅 犳 狋 犪 犾 犪犿狉 犲 狊 犻 犱 狌 犲犻 狀犮 犲 狉 犲 犪 犾 狊犳 狅 狉犲 狓 狆 狅 狉 狋 发布 实施中华人民共和国海关总署发 布书 书 书前言 分为以下个部分：第部分：出口粮谷中环庚草醚残留量检验方法；第部分：出口粮谷中丁胺磷残留量检验方法；第部分：出口粮谷和蔬菜中戊菌隆残留量检验方法；第部分：出口粮谷油籽中哒菌清残留量检验方法；第部分：出口粮谷油籽中快杀稗残留量检验方法；第部分：出口粮谷中叶枯酞残留量检验方法；第部分：出口粮谷中涕灭威、甲萘威、杀线威、恶虫威、抗蚜威残留量的测定；第部分：进出口粮谷中吡虫啉残留量检验方法液相色谱法；第部分：进出口粮谷中吡氟乙草灵残留量检验方法。本部分是 的第部分。本部分按照 给出的规则编写。本部分代替 出口粮谷中叶枯酞残留量检验方法。本部分与 相比，主要技术变化如下：增加了液相色谱串联质谱法作为第一法；原方法变更为第二法，并对部分表述进行修改；删去了抽样步骤。本部分由中华人民共和国海关总署提出并归口。本部分起草单位：中华人民共和国天津海关。本部分主要起草人：章骅、娄婷婷、崔颖、林安清、张靓文。本部分所代替标准的历次版本发布情况为：。犛犖犜 出口粮谷中叶枯酞残留量检测方法范围本部分规定了粮谷中叶枯酞残留量的气相色谱和液相色谱串联质谱测定方法。本部分第一法适用于出口糙米、小麦、玉米、扁豆中叶枯酞残留量的定量测定和确证；本部分第二法适用于出口糙米中叶枯酞残留量的定量测定。规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。分析实验室用水规格和试验方法第一法液相色谱质谱质谱法方法摘要试样经水浸泡，用甲醇提取叶枯酞，固相萃取净化。用液相色谱质谱质谱仪检测，外标法定量。试剂和材料除另有规定外，所用试剂均为分析纯，水为 规定的一级水。甲醇：色谱纯。甲酸：色谱纯。甲酸水溶液（）：吸取甲酸，用水定容至，混合均匀。硅藻土。叶枯酞标准物质（，号 ，）：纯度大于或等于。叶枯酞标准储备溶液：准确称取适量的叶枯酞标准物质，用甲醇配制成浓度为的标准储备溶液，冰箱中保存。叶枯酞标准中间溶液：准确吸取适量的叶枯酞标准储备溶液（），用甲醇配制成浓度为 的标准中间溶液，冰箱中保存。空白样品基质溶液：选取不含待测物的样品，按照步骤 和 操作，得到空白样品基质溶液。叶枯酞标准基质溶液：根据需要使用前吸取适量的叶枯酞标准中间溶液（），用空白样品基质溶液（）配制成适当浓度的标准基质溶液，冰箱中保存，使用前配制。仪器与设备 液相色谱串联质谱仪：配备电喷雾离子源。犛犖犜 天平：感量 和 。振荡器。食品粉碎机。固相萃取柱：（，），或相当者。使用前顺次用 甲醇，水活化。玻璃抽滤瓶。锥形瓶：。试样制备与保存 试样制备取有代表性样品约 （不可用水洗涤），将其可食部分切碎后，充分混匀后放入食品粉碎机中粉碎，装入洁净容器，密封并标明标记。试样保存在制样的操作过程中，应防止样品污染或发生残留物含量的变化。试样于以下避光保存。测定步骤 提取称取 试样（精确到 ）于 锥形瓶中，加入 水，静置。加入 甲醇，震荡 。用上敷硅藻土的滤纸抽滤。再向锥形瓶中分别加入 和 甲醇，用上述上敷硅藻土的滤纸抽滤，合并滤液于 锥形瓶中。净化经上述溶液移入净化柱（）中，弃去前 流出液，收集后流出液，供液相色谱串联质谱仪测定和确证。测定 液相色谱条件液相色谱条件如下：）色谱柱：柱，或相当者；）柱温：；）进样量：；）流速：；流动相及梯度洗脱条件见表。犛犖犜 表流动相及梯度洗脱条件时间（）甲醇（）甲酸水溶液（）质谱参考条件质谱条件如下：）电离方式：电喷雾电离（）；）扫描方式：负离子扫描；）检测方式：多反应监测（）；）电喷雾电压：；）鞘气、辅助气均为高纯氮气，碰撞气为高纯氩气。使用前应调节各气体流量以使质谱灵敏度达到检测要求，参考条件参见附录。）监测离子对（）：（定量离子）、。液相色谱串联质谱检测及确证根据试样中被测样液的含量情况，选取待测物的响应值在仪器线性响应范围内的浓度进行测定，如果超出仪器线性响应范围应进行稀释。在上述色谱条件下叶枯酞的参考保留时间约为 ，标准溶液的选择性离子流图参见附录。按照液相色谱串联质谱条件测定样品和标准工作溶液，样品中待测物质的保留时间与标准溶液中待测物质的保留时间偏差在 之内。定量测定时采用标准曲线法。定性时应当与浓度相当标准工作溶液的相对丰度一致。相对丰度允许偏差不超过表规定的范围，则可以判断样品中存在对应的被测物。表定性确证时相对离子丰度的最大允许偏差相对离子丰度 允许的相对偏差 空白实验除不称取试样外，均按上述步骤进行。结果计算和表述用色谱数据处理软件或按式（）计算试样中叶枯酞残留量，计算结果需扣除空白值：犡犮犞 犿 （）犛犖犜 式中：犡 试样中叶枯酞的残留量，单位为毫克每千克（）；犮 从标准曲线上得到的叶枯酞溶液浓度，单位为微克每毫升（）；犞 最终样液的体积，单位为毫升（）；犿 最终样液所相当的试样质量，单位为克（）。注：计算结果扣除空白值。定量限和回收率 定量限本方法的定量限为 。测定浓度范围及回收率本方法添加浓度及回收率的实验数据参见表。表糙米中对叶枯酞不同添加水平回收率范围基质名称添加水平回收率范围糙米 小麦 玉米 扁豆 第二法气相色谱法 方法提要试样中的叶枯酞用丙酮提取，经液液分配净化提取后，用无水乙酸使其产生分子内脱水反应，衍生为亚氨叶枯酞，再用氯化钠水溶液和正己烷进行液液分配，硅胶柱净化。用气相色谱仪电子俘获检测器，外标法定量。试剂和材料除另有规定外，所用试剂均为分析纯，水为 规定的一级水。犛犖犜 乙腈（正己烷饱和）：色谱纯。丙酮：重蒸馏。乙酸乙酯：重蒸馏。正己烷：重蒸馏（乙腈饱和）。苯：重蒸馏。氯化钠。无水乙酸。无水硫酸钠：经 灼烧，冷却后，置干燥器内备用。硅藻土。硅胶：层析用，目 目。使用前于 烘约。置于干燥器中保存一周。叶枯酞标准品：纯度。叶枯酞标准溶液：准确称取适量叶枯酞标准品，用乙酸乙酯配制成浓度为 的标准储备液。仪器与设备 气相色谱仪：带有电子俘获检测器。天平：感量 和 。硅胶净化柱：（）玻璃柱，依次装入硅胶和无水硫酸钠。使用前用 正己烷淋洗层析柱。旋转蒸发器：配有 梨形蒸发瓶。微量注射器：。试样制备与保存 试样制备将样品按四分法缩分至，全部磨碎并通过 目筛，混匀，均分成两份，分别装入洁净的容器内作为试样，密封并标明标记。试样保存将试样于以下避光保存。注：在抽样和制样的操作过程中，防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。测定步骤 提取称取试样约（精确到 ）于 锥形瓶中，加 水，静置。加入 丙酮，振荡 。用上敷硅藻土的滤纸抽滤。再向锥形瓶加 丙酮，用上述上敷硅藻土的滤纸抽滤，合并滤液于 梨形瓶，于 水浴旋转浓缩至约。分别用 氯化钠水溶液及 乙酸乙酯将上述溶液洗入 分液漏斗中，振荡，静置分层，乙酸乙酯层转移另一个 锥形瓶。再用 乙酸乙酯进行同样操作。合并滤液并加入 无水硫酸钠振摇后，过滤于 梨形瓶中。用 乙酸乙酯洗涤锥形瓶和滤纸犛犖犜 上的残渣，合并洗液于梨形瓶中，于 水浴中旋转浓缩至近干。用 正己烷（）及 乙腈（）将上述残渣洗入 分液漏斗，振荡，静置分层，保留乙腈层。向正己烷层中加入 乙腈（），重复上述操作，合并乙腈层于 分液漏斗中。加入 正己烷，振荡 乙腈层转移至 梨形瓶中，于 水浴中旋转浓缩至近干，残渣用乙酸乙酯溶解。脱水向上述溶液中加入无水乙酸，加塞。于 水浴中加热，冷却后用 正己烷及 氯化钠溶液洗入 分液漏斗中，振荡，静置分层，转移正己烷层于 锥形瓶。加入 无水硫酸钠，振摇 ，过滤于 梨形瓶。用 正己烷洗涤三角瓶和滤纸上的残渣，合并洗涤液于梨形瓶，于 水浴旋转浓缩至近干，加入 正己烷溶解残渣。净化将上述溶液移入净化柱（）中，用 苯正己烷（）混和液洗脱，收集流出液于 梨形瓶中。于 水浴旋转浓缩至近干。用 正己烷溶解残渣，溶液供气相色谱测定。标准物的脱水取 的叶枯酞标准溶液，在室温下用氮气吹干溶剂。残渣用乙酸乙酯溶解，之后按（）同样操作。此溶液根据需要再用正己烷稀释成适当浓度的标准工作溶液。测定 色谱条件色谱条件如下：）色谱柱：（）（膜厚），或相当色谱柱；）柱温：；）进洋口温度：；）检测器温度：；）载气：氮气纯度 ，流量：；）尾吹气：氮气纯度 ，流量：；）进样量：。色谱测定对标准工作溶液和样液等体积穿插进样测定，在上述色谱条件下，亚胺叶枯酞保留时间约为 。标准品的色谱图见附录中图。空白试验除不加试样外，均按上述步骤进行。结果计算和表述用色谱数据处理机或按式（）计算试样中叶枯酞残留含量：犡犺犮犞犺犿（）犛犖犜 式中：犡 试样中叶枯酞残留量，单位为毫克每千克（）；犺 样液中亚胺叶枯酞峰高，单位为毫米（）；犺狊 标准工作溶液中亚胺叶枯酞的峰高，单位为毫米（）；犮 标准工作溶液中叶枯酞的浓度，单位为微克每毫升（）犞 最终样液定容的体积，单位为毫升（）；犿 最终样液所相当的试样量，单位为克（）。注：计算结果扣除空白值。定量限和回收率 定量限本方法的定量限为 。测定浓度范围及回收率本方法添加浓度及回收率的实验数据参见表。表糙米中对叶枯酞不同添加水平回收率范围基质名称添加水平回收率范围糙米 犛犖犜 附录犃（资料性附录）犔犆 犕犛 犕犛参考条件监测离子对及电压参数：）电离方式：电喷雾电离（）；）电喷雾电压：；）鞘气压力：；）辅助气压力：；）离子源温度：；）碰撞气压力：；）扫描方式：负离子扫描；）检测方式：多反应监测（）；）定性离子对、定量离子对、透镜补偿电压及碰撞能量等参数见表。表犃 定性离子对、定量离子对、透镜补偿电压及碰撞能量被测物名称母离子（）子离子（）透镜补偿电压碰撞能量叶枯酞 定量离子）非商业性声明：附录中所列参数是在 液相色谱串联质谱仪上完成的。此处列出实验用仪器型号仅是为了提供参考，并不涉及商业目的，鼓励标准使用者尝试不同厂家和型号的仪器。犛犖犜 附录犅（资料性附录）叶枯酞标准品多反应监测色谱图图犅 叶枯酞标准品色谱图（保留时间：犿 犻 狀）犛犖犜 附录犆（资料性附录）叶枯酞标准品衍生物亚氨叶枯酞气相色谱图图犆 叶枯酞标准品衍生物亚氨叶枯酞气相色谱图 犛犖犜 犉狅 狉 犲狑狅 狉 犱犜犺 犻 狊狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱犻 狊犻 狀 狊 狋 犲 犪 犱狅 犳犛犖犜 犿犲 狋 犺 狅 犱犳 狅 狉狋 犺 犲犱 犲 狋 犲 狉犿 犻 狀 犪 狋 犻 狅 狀狅 犳狋 犲 犮 犾 狅 犳 狋 犪 犾 犪犿狉 犲 狊 犻 犱 狌 犲犻 狀犮 犲 狉 犲 犪 犾 狊犳 狅 狉犲 狓狆 狅 狉 狋 犜犺 犻 狊狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱犮 狅犿狆 犪 狉 犲 狊狑 犻 狋 犺犛犖犜 ，犿犪 犻 狀狋 犲 犮 犺 狀 狅 犾 狅 犵 狔犮 犺 犪 狀 犵 犲 狊犪 狊犳 狅 犾 犾 狅狑狊：犪 犱 犱犾 犻 狇 狌 犻 犱犮 犺 狉 狅犿犪 狋 狅犵 狉 犪 狆 犺 狔 狋 犪 狀 犱 犲犿犿犪 狊 狊狊 狆 犲 犮 狋 狉 狅犿犲 狋 狉 狔犿犲 狋 犺 狅 犱犳 狅 狉狋 犺 犲犳 犻 狉 狊 狋犿犲 狋 犺 狅 犱；犜犺 犲狅 狉 犻 犵 犻 狀 犪 犾犿犲 狋 犺 狅 犱犻 狊犮 犺 犪 狀 犵 犲 犱狋 狅狋 犺 犲狊 犲 犮 狅 狀 犱犿犲 狋 犺 狅 犱，犪 狀 犱狉 犲 狏 犻 狊 犲狆 犪 狉 狋狅 犳狋 犺 犲犲 狓狆 狉 犲 狊 狊 犻 狅 狀；犃犾 犻 狇 狌 犻 犱犮 犺 狉 狅犿犪 狋 狅犵 狉 犪 狆 犺 狔 狋 犪 狀 犱 犲犿犿犪 狊 狊狊 狆 犲 犮 狋 狉 狅犿犲 狋 狉 狔犿犲 狋 犺 狅 犱狑犪 狊犱 犲 狏 犲 犾 狅狆 犲 犱；犗犿 犻 狋 狋 犻 狀 犵狋 犺 犲犿犲 狋 犺 狅 犱狅 犳狊 犪犿狆 犾 犻 狀 犵。