SNT 2319-2009 进出口食品中喹氧灵残留量检测方法.pdf

书书书中华人民共和国出入境检验检疫行业标准犛 犖犜 进出口食品中喹氧灵残留量检测方法犇 犲 狋 犲 狉 犿 犻 狀 犪 狋 犻 狅 狀狅 犳狇 狌 犻 狀 狅 狓 狔 犳 犲 狀狉 犲 狊 犻 犱 狌 犲 犻 狀犳 狅 狅 犱犳 狅 狉 犻 犿 狆 狅 狉 狋 犪 狀 犱犲 狓 狆 狅 狉 狋 发布 实施中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发 布书书书前言本标准的附录、附录、附录均为资料性附录。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国福建出入境检验检疫局、中华人民共和国天津出入境检验检疫局、中华人民共和国上海出入境检验检疫局。本标准主要起草人：杨方、卢声宇、陈祥明、刘正才、林永辉、李捷、林安清、李波、蓝锦昌、江锦彬。本标准系首次发布的出入境检验检疫行业标准。犛 犖犜 进出口食品中喹氧灵残留量检测方法范围本标准规定了进出口食品中喹氧灵残留量的液相色谱与液相色谱 质谱质谱的检测方法。本标准适用于大豆、花椰菜、樱桃、木耳、葡萄酒、茶叶、蜂蜜、猪肝、鸡肉、鳗鱼中喹氧灵残留量的测定和确证。规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。分析实验室用水规格和试验方法方法提要试样中残留的喹氧灵采用乙酸乙酯振荡或饱和碳酸氢钠溶液 乙酸乙酯提取，固相萃取小柱净化或凝胶渗透色谱结合 固相萃取小柱净化，液相色谱仪或液相色谱 质谱质谱仪检测及确证，外标法定量。试剂和材料除非另有规定，所用试剂均为分析纯，水为 规定的一级水。正己烷：色谱纯。乙酸乙酯：色谱纯。乙腈：色谱纯。甲醇：色谱纯。环己烷：色谱纯。丙酮：色谱纯。碳酸氢钠。无水硫酸钠：使用前于 干燥，密封保存。环己烷 乙酸乙酯溶液：分别量取 环己烷与乙酸乙酯，混匀。丙酮 正己烷溶液：移取 丙酮于 正己烷中，混匀。乙腈水溶液：分别量取 乙腈与 水，混匀。饱和碳酸氢钠溶液：称取一定量碳酸氢钠溶于水溶液中至饱和。喹氧灵标准物质（英文名 ，分子式 ，相对分子质量 ）：纯度大于等于。喹氧灵标准贮备液（）：准确称取 喹氧灵标准物质，用甲醇溶解并定容至 ，该标准储备液于可保存个月。喹氧灵标准工作液：根据需要取适量标准贮备液，以 乙腈水溶液稀释成适当浓度的标准工作液。标准储备液于可保存个月。氨基（）固相萃取柱：，。滤膜：，有机系。犛 犖犜 仪器和设备 液相色谱仪，配紫外或二极管阵列检测器。液相色谱 质谱质谱联用仪，配电喷雾（）源。分析天平，感量分别为 与 。凝胶渗透色谱。离心机：，配有 的具塞塑料离心管。粉碎机。组织捣碎机。涡旋混合器。超声波清洗器。固相萃取装置。氮吹仪。试样制备和保存 水果蔬菜类取有代表性样品 ，将可食部分切碎后（不可水洗），用组织捣碎机将样品加工成浆状，混匀，分成两份，装入洁净容器内，密封并标识。茶叶、粮谷与坚果类取有代表性样品 ，用粉碎机粉碎并通过 圆孔筛，混匀，分成两份，装入洁净容器内，密封并标识。肉及肉制品取有代表性样品 ，切碎后用组织捣碎机将样品加工成浆状，混匀，装入洁净容器内，分成两份，密封并标识。蜂蜜取有代表性样品 ，对于无结晶的蜂蜜样品，将其搅拌均匀。对有结晶的样品，在密闭情况下，置于不超过 的水浴中温热，振荡，待样品全部融化后搅匀，迅速冷却至室温，分成两份，装入洁净样品瓶中，密封并标识。果汁、果酒等样品将取得的全部原始样品倒入洁净的混样桶中，充分搅拌混匀，再将混匀样品分装两份，每份约 ，密封并标识。保存条件茶叶、果酒、蜂蜜、粮谷于保存，蔬菜、水果、肉及肉制品于 保存。在制样过程中，应防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。测定步骤 提取 茶叶、谷物及坚果等样品：称取（精确至 ）试样，置于 具塞塑料离心管中，加入 饱和碳酸氢钠溶液（）振摇浸泡 ，加入 乙酸乙酯（），涡动 后超声提取 ，离心 ，移出有机相，残渣再加入 乙酸乙酯重复提取次，合并提取液，经无水硫酸钠（）干燥后于 旋转蒸发至近干，加入 正己烷（），涡动 溶解残渣，按 步骤净化。蔬菜与水果样品：称取（精确至 ）试样，置于 具塞塑料离心管中，加入 犛 犖犜 乙酸乙酯，振摇均匀后超声提取 ，离心 ，移出有机相，残渣再加入 乙酸乙酯重复提取次，合并提取液，经无水硫酸钠干燥后于 旋转蒸发至近干，加入 正己烷，涡动 溶解残渣，按 步骤净化。果汁、蜂蜜、葡萄酒等：称取 （精确至 ）试样置于 具塞三角瓶中，加入 饱和碳酸氢钠溶液、乙酸乙酯，振摇均匀后超声提取 ，离心 ，移出有机相，残渣再加入 乙酸乙酯重复提取次，合并提取液，经无水硫酸钠干燥后于 旋转蒸发至近干，加入 正己烷，涡动 溶解残渣，按 步骤净化。肉及肉制品：称取 （精确至 ）试样置于 具塞塑料离心管中，加入 饱和碳酸氢钠溶液、乙酸乙酯，以均质器于 均质提取，离心 ，移出有机相，残渣再加入 乙酸乙酯重复提取次，合并提取液，经无水硫酸钠干燥后于 旋转蒸发至近干，加入 环己烷 乙酸乙酯（），涡动 溶解残渣，于 离心 ，按 与 步骤顺序净化。净化 凝胶渗透色谱对于 所得的提取液，取 通过样品环注入凝胶色谱柱，按以下条件操作：）净化柱：填料，（内径）；）流动相：环己烷 乙酸乙酯（，体积比）；）流速：。收集 的流出液，旋转蒸发至近干，加入 正己烷，待固相萃取小柱净化。注：若 样品中所含的脂肪量大于，则应调整样品提取液体积，使得注入凝胶色谱的 样液中所含的脂肪量不大于。固相萃取小柱净化使用前以 甲醇、正己烷预淋洗小柱，将样品提取液上柱，用 正己烷淋洗，弃去全部淋洗液，以 丙酮 正己烷（）洗脱，保持流速约为 ，收集洗脱液，于 氮吹至近干，以 乙腈 水溶液（）定容，过 滤膜，供高效液相色谱测定；或以 乙腈水溶液定容，过 滤膜，供液相色谱 质谱质谱测定。液相色谱测定 色谱条件）色谱柱：柱，（内径），或相当者；）流动相：乙腈 水（，体积比）；）流速：；）检测波长：；）进样量：。色谱测定以喹氧灵标准工作液进样，以峰面积为纵坐标，工作溶液浓度为横坐标绘制标准工作曲线，用标准工作曲线对样品进行定量。标准工作液和待测样液中喹氧灵的响应值均应在仪器线性响应范围内。按项下规定进行结果计算。在本方法条件下，喹氧灵的保留时间约为 。标准品色谱图参见附录 中图 。液相色谱质谱质谱法测定 色谱条件）色谱柱：柱，（内径），或相当者；）柱温：；犛 犖犜 ）流动相：乙腈 水（，体积比）；）流速：；）进样量：。质谱条件）离子源：电喷雾源（），正离子模式；）扫描方式：多反应监测（）。其他参考质谱条件参见附录中表。液相色谱 质谱质谱测定根据试样中被测物的含量情况，选取响应值适宜的标准工作液进行色谱分析。标准工作液和待测样液中喹氧灵的响应值均应在仪器线性响应范围内。按项下规定进行结果计算。在本方法条件下，喹氧灵的保留时间约为 ，在锥孔电压为 时，标准品的二级质谱图与多反应监测（）色谱图分别参见附录中图 与图。定性标准进行样品测定时，如果检出的色谱峰保留时间与标准样品一致，并且在扣除背景后的样品谱图中，各定性离子的相对丰度与浓度接近的同样条件下得到的标准溶液谱图相比，最大允许相对偏差不超过表中规定的范围，则可判断样品中存在对应的被测物。表定性确证时相对离子丰度的最大允许偏差相对离子丰度 允许的相对偏差 空白实验除不加试样外，均按上述步骤进行。结果计算和表述用数据处理软件或按式（）计算试样中喹氧灵药物的残留量，计算结果需扣除空白值：犡犮犞犿（）式中：犡 试样中喹氧灵残留量，单位为毫克每千克（）；犮 从标准工作曲线得到的喹氧灵溶液浓度，单位为毫克每升（）；犞 样品溶液最终定容体积，单位为毫升（）；犿 最终样液所代表的试样质量，单位为克（）。测定低限、回收率 测定低限液相色谱法的测定低限为 。液相色谱 质谱质谱法的测定低限为 。回收率 液相色谱法检测喹氧灵添加回收率数据见表。犛 犖犜 表液相色谱法检测喹氧灵药物残留的添加回收率数据样品名称添加浓度（）回收率大豆 花椰菜 樱桃 木耳 葡萄酒 茶叶 蜂蜜 猪肝 鳗鱼 鸡肉 犛 犖犜 液相色谱 质谱质谱法检测喹氧灵添加回收率数据见表。表液相色谱喹氧灵药物残留的添加回收率数据样品名称添加浓度（）回收率大豆 花椰菜 樱桃 木耳 葡萄酒 茶叶 蜂蜜 猪肝 鳗鱼 鸡肉 犛 犖犜 附录犃（资料性附录）喹氧灵的液相色谱图图 犃 喹氧灵的液相色谱图犛 犖犜 附录犅（资料性附录）参考质谱条件）参考质谱条件：）毛细管电压：；）源温度：；）去溶剂温度：；）锥孔气流（氮气）：；）去溶剂气流（氮气）：；）碰撞气压（氩气）：；）驻留时间：。其他质谱参数见表。表 犅 喹氧灵的主要参考质谱参数化合物母离子（）子离子（）驻留时间锥孔电压碰撞能量 喹氧灵 该离子为定量离子。注：对于不同质谱仪器，仪器参数可能存在差异，测定前应将质谱参数优化到最佳。）非商业性声明：附录所列参考质谱条件是在 型液质联用仪上完成的，此处列出试验用仪器型号仅为提供参考，并不涉及商业目的，鼓励标准使用者尝试不同厂家或型号的仪器。犛 犖犜 附录犆（资料性附录）喹氧灵的二级质谱图与多反应监测（犕犚犕）离子色谱图图 犆 喹氧灵的二级质谱图图犆 喹氧灵的多反应监测（）离子色谱图犛 犖犜 犉 狅 狉 犲 狑 狅 狉 犱犃 狀 狀 犲 狓犃，犃 狀 狀 犲 狓犅，犃 狀 狀 犲 狓犆狅 犳 狋 犺 犻 狊狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱犪 狉 犲 犻 狀 犳 狅 狉 犿 犪 狋 犻 狏 犲犪 狀 狀 犲 狓 犲 狊 犜 犺 犻 狊狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱 犻 狊狆 狉 狅 狆 狅 狊 犲 犱犫 狔犪 狀 犱 犻 狊狌 狀 犱 犲 狉 狋 犺 犲犮 犺 犪 狉 犵 犲狅 犳 狋 犺 犲犆 犲 狉 狋 犻 犳 犻 犮 犪 狋 犻 狅 狀犪 狀 犱犃 犮 犮 狉 犲 犱 犻 狋 犪 狋 犻 狅 狀犪 犱 犿 犻 狀 犻 狊 狋 狉 犪 狋 犻 狅 狀狅 犳 狋 犺 犲犘 犲 狅 狆 犾 犲狊犚 犲 狆 狌 犫 犾 犻 犮狅 犳犆 犺 犻 狀 犪 犜 犺 犻 狊狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱 犻 狊犱 狉 犪 犳 狋 犲 犱犫 狔犉 狌 犼 犻 犪 狀犈 狀 狋 狉 狔 犈 狓 犻 狋 犐 狀 狊 狆 犲 犮 狋 犻 狅 狀犪 狀 犱犙 狌 犪 狉 犪 狀 狋 犻 狀 犲犅 狌 狉 犲 犪 狌狅 犳狋 犺 犲犘 犲 狅 狆 犾 犲狊犚 犲 狆 狌 犫 犾 犻 犮狅 犳犆 犺 犻 狀 犪，犜 犻 犪 狀 犼 犻 狀犈 狀 狋 狉 狔 犈 狓 犻 狋 犐 狀 狊 狆 犲 犮 狋 犻 狅 狀犪 狀 犱犙 狌 犪 狉 犪 狀 狋 犻 狀 犲犅 狌 狉 犲 犪 狌狅 犳 狋 犺 犲犘 犲 狅 狆 犾 犲狊犚 犲 狆 狌 犫 犾 犻 犮狅 犳犆 犺 犻 狀 犪，犛 犺 犪 狀 犵 犺 犪 犻犈 狀 狋 狉 狔 犈 狓 犻 狋 犐 狀 狊 狆 犲 犮 狋 犻 狅 狀犪 狀 犱犙 狌 犪 狉 犪 狀 狋 犻 狀 犲犅 狌 狉 犲 犪 狌狅 犳 狋 犺 犲犘 犲 狅 狆 犾 犲狊犚 犲 狆 狌 犫 犾 犻 犮狅 犳犆 犺 犻 狀 犪 犜 犺 犲犿 犪 犻 狀犱 狉 犪 犳 狋 犲 狉 狊狅 犳狋 犺 犻 狊狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱犪 狉 犲犢 犪 狀 犵犉 犪 狀 犵，犔 狌犛 犺 犲 狀 犵 狔 狌，犆 犺 犲 狀犡 犻 犪 狀 犵 犿 犻 狀 犵，犔 犻 狌犣 犺 犲 狀 犵 犮 犪 犻，犔 犻 狀犢 狅 狀 犵 犺 狌 犻，犔 犻 犑 犻 犲，犔 犻 狀犃 狀 狇 犻 狀 犵，犔 犻犅 狅，犔 犪 狀犑 犻 狀 犮 犪 狀 犵，犑 犻 犪 狀 犵犑 犻 狀 犫 犻 狀 犜 犺 犻 狊狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱 犻 狊犪狆 狉 狅 犳 犲 狊 狊 犻 狅 狀 犪 犾 狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱犳 狅 狉犲 狀 狋 狉 狔 犲 狓 犻 狋 犻 狀 狊 狆 犲 犮 狋 犻 狅 狀犪 狀 犱狇 狌 犪 狉 犪 狀