SNT 2226-2008 进出口动物源性食品中乌洛托品残留量的检测方法 液相色谱-质谱质谱法.pdf

书书书中华人民共和国出入境检验检疫行业标准犛 犖犜 进出口动物源性食品中乌洛托品残留量的检测方法液相色谱 质谱 质谱法犇 犲 狋 犲 狉 犿 犻 狀 犪 狋 犻 狅 狀狅 犳狌 狉 狅 狋 狉 狅 狆 犻 狀 犲狉 犲 狊 犻 犱 狌 犲 犻 狀犳 狅 狅 犱 狊 狋 狌 犳 犳 狊狅 犳犪 狀 犻 犿 犪 犾 狅 狉 犻 犵 犻 狀犳 狅 狉 犻 犿 狆 狅 狉 狋 犪 狀 犱犲 狓 狆 狅 狉 狋犔 犆 犕 犛犕 犛犿 犲 狋 犺 狅 犱 发布 实施中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发 布版权所有 禁止翻制、电子传阅、发售书书书前言本标准的附录 和附录均为资料性附录。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国黑龙江出入境检验检疫局、中华人民共和国重庆出入境检验检疫局、中华人民共和国辽宁出入境检验检疫局。本标准主要起草人：刘永、杨长志、王国民、康庆贺、林维宣、李贤良、吴岩、程阳、王冰、郭伟。本标准系首次发布的出入境检验检疫行业标准。犛 犖犜 版权所有 禁止翻制、电子传阅、发售进出口动物源性食品中乌洛托品残留量的检测方法液相色谱 质谱 质谱法范围本标准规定了进出口动物源性食品中乌洛托品残留量的液相色谱 质谱质谱检测方法。本标准适用于进出口鸡肉、鸡肝脏、鸡肾脏和猪肉中乌洛托品残留量的检测和确证。规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注明日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方面研究使用这些文件的最新版本。凡是不注明日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。分析实验室用水规格和实验方法（，：，）方法提要用乙腈提取试样中的乌洛托品残留，正己烷除去脂溶性杂质，阳离子交换固相萃取柱净化，洗脱液浓缩后残渣用碱性乙腈定溶，液相色谱 质谱质谱仪测定，外标法定量。试剂和材料所有试剂除特殊注明外，所用试剂均为分析纯，水为 规定的一级水。乙腈：色谱纯。正己烷：色谱纯。甲醇：色谱纯。乙酸（）。氨水（）。盐酸（）。乙酸铵。乙酸溶液：量取 乙酸（），用水稀释至 。盐酸溶液：量取 盐酸（），用水稀释至 。乙酸铵缓冲液（）：准确称取 乙酸铵溶于 水中，用乙酸溶液（）调 值至。氨水 甲醇（，体积比）溶液：量取 氨水（），用甲醇稀释至 。乙酸乙腈（，体积比）溶液：量取 乙酸溶液（），用乙腈稀释至 。乙腈饱和的正己烷溶液：乙腈中加入 正己烷，充分振荡后，静置分层，取上层正己烷层备用。无水硫酸钠：经 灼烧，冷却后在干燥器中储存备用。乌洛托品标准物质（，分子式：）：纯度大于 。标准储备溶液：准确称取按其纯度折算为 质量的乌洛托品标准品 ，用乙腈溶解并定容至 ，浓度相当于 。储备液在冰箱避光保存，可使用个月。标准中间溶液：准确量取标准储备溶液（），用乙酸 乙腈溶液（）溶解并定容至犛 犖犜 版权所有 禁止翻制、电子传阅、发售 ，浓度相当于 ，在冰箱避光保存，使用前配制。标准工作溶液：根据需要用 适当浓度的标准工作溶液溶解空白样品浓缩残渣，配制成适当浓度的标准工作溶液，使用前配制。固相萃取柱（）：，或相当者。固相萃取柱使用前分别用 甲醇、水、乙酸铵溶液预处理，并保持柱体湿润。微孔滤膜：，有机相。仪器和设备 高效液相色谱 质谱质谱仪：配电喷雾离子源（）或相当者。分析天平：感量为 ，。固相萃取装置。计：测量精度 。旋转蒸发器。氮吹仪。旋涡混匀器。组织捣碎机。均质器（）。离心机（）。玻璃离心管。试样的制备与保存取样品中有代表性的约 ，用组织捣碎机捣碎，混匀，均分成两份作为试样，分别装入洁净容器，密封并做好标识，于 冰箱内保存。在抽样和制样操作过程中，应防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。测定步骤 提取准确称取试样（精确到 ）于 离心管中，加入无水硫酸钠、乙腈，用均质器以 均质 ，以 离心 ，上清液转移至 具塞离心管中，样品再用 乙腈重复上述提取、离心操作，合并两次提取的上清液，加入经乙腈饱和的正己烷溶液（），用漩涡振荡器混匀 后，以 离心 ，弃去上清液，乙腈相过无水硫酸钠，转移至浓缩瓶，浓缩近干后待净化。净化用 乙酸铵缓冲液（）溶解浓缩瓶中残渣，以 的速度过固相萃取柱（），再用 乙酸铵溶液分两次洗涤浓缩瓶，过固相萃取柱，用 水、甲醇依次淋洗固相萃取柱，弃去流出液，在 以下减压抽 使柱体干涸；用 氨水 甲醇溶液（）洗脱，洗脱液在 下用氮吹仪浓缩至近干，用 乙酸 乙腈溶液（）溶解残渣，经 滤膜过滤，供液相色谱 质谱质谱测定。测定 液相色谱条件）色谱柱：?（内径），粒径，或相当者；）流动相：乙酸 乙腈（，体积比）；）流速：或根据仪器条件优化；犛 犖犜 版权所有 禁止翻制、电子传阅、发售）柱温：；）进样量：。质谱条件）离子源：电喷雾离子源；）扫描方式：正离子；）检测方式：多反应监测（）；）其他质谱质谱参考条件参见附录 中表 。定量测定根据样液中乌洛托品残留量浓度大小，选定峰高相近的标准工作溶液，标准工作溶液和样液中乌洛托品残留的响应值均应在仪器的检测线性范围内。对标准工作溶液和样液等体积参差进样测定，在上述色谱条件下，乌洛托品的参考保留时间约为 ，标准溶液的多反应监测色谱图参见附录 中图。定性测定在相同的实验条件下，样品与标准工作液中待测物质的质量色谱峰相对保留时间在 以内，并且在扣除背景后的样品质量色谱图中，所选择的离子对均出现，同时与标准品的相对丰度允许偏差不超过表规定的范围，则可判断样品中存在对应的被测物。表使用定性液相色谱 质谱质谱时相对离子丰度最大容许误差相对离子丰度 最大允许偏差 空白试验除不加试样外，均按上述操作步骤进行。结果计算和表述用数据处理软件中的外标法，或绘制标准曲线，按照式（）计算样品中乌洛托品残留量。犡犮犞犿（）式中：犡 试样中待测组分含量，单位为微克每千克（）；犮 由标准曲线而得的样液中待测组分的浓度，单位为纳克每毫升（）；犞 样液最终定容体积，单位为毫升（）；犿 最终样液所代表的试样质量，单位为克（）。测定低限、回收率 测定低限本方法乌洛托品测定低限为。回收率回收率试验数据见表。表乌洛托品添加回收率（狀）食品名称添加浓度（）平均测定值（）回收率相对标准偏差鸡肉 犛 犖犜 版权所有 禁止翻制、电子传阅、发售表（续）食品名称添加浓度（）平均测定值（）回收率相对标准偏差鸡肝 鸡肾 猪肉 犛 犖犜 版权所有 禁止翻制、电子传阅、发售附录犃（资料性附录）串联质谱条件）串联质谱条件：）非商业性声明：附录表 所列参数是在 质谱仪上完成的，此处列出试验用仪器型号仅是为了提供参考，并不涉及商业目的，鼓励标准使用者尝试采用不同厂家或型号的仪器。）电离方式：；）毛细管电压：；）源温度：；）去溶剂温度：；）锥孔气流：；）去溶剂气流：；）碰撞气：氩气，碰撞气压 ；）监测模式：多反应监测条件见表 。表 犃 多反应监测条件化合物母离子子离子驻留时间锥孔电压碰撞能量乌洛托品 离子用于定量。犛 犖犜 版权所有 禁止翻制、电子传阅、发售附录犅（资料性附录）标准样品色谱图）图 犅 乌洛托品高效液相色谱 质谱质色谱图犛 犖犜 版权所有 禁止翻制、电子传阅、发售犉 狅 狉 犲 狑 狅 狉 犱犃 狀 狀 犲 狓犃犪 狀 犱犃 狀 狀 犲 狓犅狅 犳 狋 犺 犻 狊狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱 犻 狊 犻 狀 犳 狅 狉 犿 犪 狋 犻 狏 犲犪 狀 狀 犲 狓 犲 狊 犜 犺 犻 狊狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱狑 犪 狊狆 狉 狅 狆 狅 狊 犲 犱犫 狔犪 狀 犱 犻 狊狌 狀 犱 犲 狉 狋 犺 犲犮 犺 犪 狉 犵 犲狅 犳犆 犺 犻 狀 犪犖 犪 狋 犻 狅 狀 犪 犾 犚 犲 犵 狌 犾 犪 狋 狅 狉 狔犆 狅 犿犿 犻 狊 狊 犻 狅 狀犳 狅 狉犆 犲 狉 狋 犻 犳 犻 犮 犪 狋 犻 狅 狀犪 狀 犱犃 犮 犮 狉 犲 犱 犻 狋 犪 狋 犻 狅 狀 犜 犺 犲狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱狑 犪 狊犱 狉 犪 犳 狋 犲 犱犫 狔犎 犲 犻 犾 狅 狀 犵 犼 犻 犪 狀 犵犈 狀 狋 狉 狔 犈 狓 犻 狋 犐 狀 狊 狆 犲 犮 狋 犻 狅 狀犪 狀 犱犙 狌 犪 狉 犪 狀 狋 犻 狀 犲犅 狌 狉 犲 犪 狌狅 犳狋 犺 犲犘 犲 狅 狆 犾 犲狊犚 犲 狆 狌 犫 犾 犻 犮狅 犳犆 犺 犻 狀 犪，犆 犺 狅 狀 犵 狇 犻 狀 犵犈 狀 狋 狉 狔 犈 狓 犻 狋 犐 狀 狊 狆 犲 犮 狋 犻 狅 狀犪 狀 犱犙 狌 犪 狉 犪 狀 狋 犻 狀 犲犅 狌 狉 犲 犪 狌狅 犳 狋 犺 犲犘 犲 狅 狆 犾 犲狊犚 犲 狆 狌 犫 犾 犻 犮狅 犳犆 犺 犻 狀 犪，犔 犻 犪 狅 狀 犻 狀 犵犈 狀 狋 狉 狔 犈 狓 犻 狋 犐 狀 狊 狆 犲 犮 狋 犻 狅 狀犪 狀 犱犙 狌 犪 狉 犪 狀 狋 犻 狀 犲犅 狌 狉 犲 犪 狌狅 犳 狋 犺 犲犘 犲 狅 狆 犾 犲狊犚 犲 狆 狌 犫 犾 犻 犮狅 犳犆 犺 犻 狀 犪 犜 犺 犲犿 犪 犻 狀犱 狉 犪 犳 狋 犲 狉 狊狅 犳狋 犺 犻 狊狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱犪 狉 犲犔 犻 狌犢 狅 狀 犵，犢 犪 狀 犵犆 犺 犪 狀 犵 狕 犺 犻，犠 犪 狀 犵犌 狌 狅 犿 犻 狀，犓 犪 狀 犵犙 犻 狀 犵 犺 犲，犔 犻 狀犠犲 犻 狓 狌 犪 狀，犔 犻犡 犻 犪 狀 犾 犻 犪 狀 犵，犠狌犢 犪 狀，犆 犺 犲 狀 犵犢 犪 狀 犵，犠 犪 狀 犵犅 犻 狀 犵，犌 狌 狅犠 犲 犻 犜 犺 犻 狊狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱 犻 狊犪狆 狉 狅 犳 犲 狊 狊 犻 狅 狀 犪 犾 狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱犳 狅 狉犲 狀 狋 狉 狔 犲 狓 犻 狋 犻 狀 狊 狆 犲 犮 狋 犻 狅 狀犪 狀 犱狇 狌 犪 狉 犪 狀 狋 犻 狀 犲狆 狉 狅 犿 狌 犾 犵 犪 狋 犲 犱犳 狅 狉 狋 犺 犲犳 犻 狉 狊 狋 狋 犻 犿 犲 犖 狅 狋 犲：犜 犺 犻 狊犈 狀 犵 犾 犻 狊 犺狏 犲 狉 狊 犻 狅 狀，犪狋 狉 犪 狀 狊 犾 犪 狋 犻 狅 狀犳 狉 狅 犿狋 犺 犲犆 犺 犻 狀 犲 狊 犲狋 犲 狓 狋，犻 狊狊 狅 犾 犲 犾 狔犳 狅 狉犵 狌 犻 犱 犪 狀 犮 犲 犛 犖犜 版权所有 禁止翻制、电子传阅、发售犇 犲 狋 犲 狉 犿 犻 狀 犪 狋 犻 狅 狀狅 犳 狌 狉 狅 狋 狉 狅 狆 犻 狀 犲 狉 犲 狊 犻 犱 狌 犲 犐 狀 犳 狅 狅 犱 狊 狋 狌 犳 犳 狊狅 犳犪 狀 犻 犿 犪 犾 狅 狉 犻 犵 犻 狀 犳 狅 狉 犻 犿 狆 狅 狉 狋 犪 狀 犱犲 狓 狆 狅 狉 狋犔 犆 犕 犛犕 犛犿 犲 狋 犺 狅 犱犛 犮 狅 狆 犲犜 犺 犻 狊狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱狊 狆 犲 犮 犻 犳 犻 犲 狊狋 犺 犲犿 犲 狋 犺 狅 犱 狊狅 犳 狊 犪 犿 狆 犾 犲狆 狉 犲 狆 犪 狉 犪 狋 犻 狅 狀犪 狀 犱犱 犲 狋 犲 狉 犿 犻 狀 犪 狋 犻 狅 狀犫 狔 犾 犻 狇 狌 犻 犱犮 犺 狉 狅 犿 犪 狋 狅 犵 狉 犪 狆 犺 狔犿 犪 狊 狊狊 狆 犲 犮 狋 狉 狅 犿 犲 狋 狉 狔狅 犳犝 狉 狅 狋 狉 狅 狆 犻 狀 犲狉 犲 狊 犻 犱 狌 犲 狊 犻 狀犳 狅 狅 犱 狊 狋 狌 犳 犳 狊狅 犳犪 狀 犻 犿 犪 犾 狅 狉 犻 犵 犻 狀 犜 犺 犻 狊狊 狋 犪 狀 犱 犪 狉 犱 犻 狊犪 狆 狆 犾 犻 犮 犪 犫 犾 犲狋 狅狋 犺 犲犱 犲 狋 犲 狉 犿 犻 狀 犪 狋 犻 狅 狀犪 狀 犱狇 狌 犪 犾 犻 犳 犻 犮 犪 狋 犻 狅 狀狅 犳犝 狉 狅 狋 狉 狅 狆 犻 狀 犲狉 犲 狊 犻 犱 狌 犲 犻 狀犪 狀 犻 犿 犪 犾 犱 犲 狉 犻 狏 犲 犱犳 狅 狅 犱 狊 犻 狀 犮 犾 狌 犱 犻 狀 犵狆 狅 狉 犽，狆 狅 狌 犾 狋 狉 狔犪 狀 犱狋 犺 犲 犻 狉 犾 犻 狏 犲