SNT 0800.3-1999 进出口粮食、饲料粗蛋白质检验方法.pdf

SN中华人民共和国出人境检验检疫行业标准 S N/T 0 8 0 0.3-1 9 9 9料法饲方 、验食检粮质口白出蛋进粗C e r e a l s a n d f e e d s t u f f s f o r i m p o r t a n d e x p o r t-Me t h o d f o r t h e d e t e r mi n a t i o n o f c r u d e p r o t e i n1 9 9 9 一 1 2 一 0 1 发布2 0 0 0 一 0 5 一 0 1 实施中华人民共和国国家出人境检验检疫局 发 布S N/T 0 8 0 0.3-1 9 9 9前言 本标准是依据G B/T 1.1-1 9 9 3 标准化工作导则 第1 单元:标准的 起草与表述规则 第1 部分:标准编写的 墓本规定N 的 要求编写的。本标准参考了国际标准I S O 1 8 7 1-1 9 7 5 农产食品凯氏法测定氮含量的一般性说明、I S O 3 0 9 9-1 9 7 4 油籽渣总含氮量的测定,I S O 5 9 8 3-1 9 7 9 动物饲料 含氮量的测定和粗蛋白 计算 和国 家标准G B/T 5 5 1 1-1 9 8 5粮食、油料检验 粗蛋白 质测定法,G B/T 1 4 4 8 9.2-1 9 9 3 油料粗蛋白 质测 定方法,G B/T 6 4 3 2-1 9 9 4 饲料粗蛋白 测定方法,G B/T 9 8 2 3-1 9 8 8 油料饼粕总含氮量 的测定法,G B/T 5 0 0 9.5-1 9 8 5 食品中蛋白质的测定方法 后，对原 Z B X1 4 0 1 9-1 9 9 0 出口油籽饼粕粗蛋白 质含量测定 方法 在内 容和文字上进行了 修订。本标准增加了前言、抽样和 制样方法、仪器方法和附录A的内 容，扩大了K值和商品 适用范围，重新规定了允许差。本标准从实施之日 起，同时代替Z B X 1 4 0 1 9-1 9 9 0,本标准附录 A是提示的附录。本标准由中华人民共和国国家出入境检验检疫局提出并归口。本标准起草单位:中华人民 共和国 黑龙江出 入境检验检疫局。本标准主要起草人:亲凤侠、唐国利。中华人民共和国出人境检验检疫行业标准S N/T 0 8 0 0.3-1 9 9 9代替Z B X 1 4 0 1 9-1 9 9 0料法饲方 、验食检粮质口白出蛋进粗C e r e a l s a n d f e e d s t u f f s f o r i m p o r t a n d e x p o r t-Me t h o d f o r t h e d e t e r mi n a t i o n o r c r u d e p r o t e i n1 范围 本标准 规定了 进出口 粮食、饲料粗蛋白 质检验方法。本标准适用于进出口粮食、饲料粗蛋白质检验。2 引用标准 下列标准 所包含的 条文，通过在本标准中引 用而构成为本标准的 条文。本标准出 版时，所示版本均为有效。所有 标准都会被修 订，使用本标准的各方应探讨使用下列标准最新 版本的 可能 性。G B/T 6 0 1-1 9 8 8 化学试剂 滴定 分析(容量分析)用标准 溶液的制备 S N/T 0 7 9 8-1 9 9 9 进出口粮油、饲料检验 检验名词术语 S N/T 0 7 9 9-1 9 9 9 进出口 粮油、饲料检验 检验一般规则 S N/T 0 8 0 0.1-1 9 9 9 进出口 粮油、饲料检验 抽样和制样方法 S N/T 0 8 0 0.1 9-1 9 9 9 进出口 粮食、饲料 水分及挥发物检验方法定义本标准采用S N/T 0 7 9 8 中的定 义。抽样和制样本标准按照S N/T 0 8 0 0.1 的规定执行。5 检验方法5.1 方法原理 在催化剂存在下，用硫酸分解蛋白 质，用硼酸吸 收氨，以盐酸标准 溶液滴定释放的氨，测定含氮量，乘以 相应的氮与蛋白质换算系数即为粗蛋白 质含量。5.2 试剂 全部试剂应是不含氮的化合物。52.1 硫酸钠(硫酸钾)。5.2.2 硫酸铜。5.2.3 硫酸p z o=1.8 4 g/m L5.2.4 氢氧化钠 4 0 0 0 溶液。中华人民共和国国家出人境检验检疫局1 9 9 9-1 2-0 1 批准2 0 0 0-0 5-0，实施S N/T 0 8 0 0.3-1 9 9 95.2.5 硼酸 4%溶液。5.2.6 盐酸0.1 m o l/L标准滴定溶液，按G B/T 6 0 1 配制。5.2.7 混合指示剂:甲 基红。.1 0 0(9 5%乙醇)溶液、澳甲酚绿0.5%乙醇溶液，两溶液按 1+1(v+v)混合。有效期三个月。5.2.8 蔗糖。5.3 仪器5.3.1 分析天平:感量。.1 m g,5.3.2 粉碎机:内装孔径 1.0 mm的筛板。5.3.3 研钵。5.3.4 可调电 炉:1 0 0 0 w,5.3.5 凯氏 烧瓶:5 0 0 m L,5.3.6 三角瓶:4 0 0 m L 53.7 蒸馏装置:冷凝管、单球管。5.3.8 滴定管:2 5 m L或 5 0 mL，最小刻度 0.1 mL,5.3.9 玻璃球:直径(5 -7)mm，须经盐酸中洗涤。5.4 操作步骤5.4.1 样品制备 按S N/T 0 8 0 0.1 取试验样品不少于1 0 0 g，用粉碎机或研钵磨碎样品，全部通过1.0 m m筛孔，混匀，放入密闭瓶中备用。5.4.2 测定方法一 凯氏定氮法 根据不同品 种含氮量确定试样的 称重质量。粮谷类(0-8-2)粉油籽饼粕类(0.3 1.5)g;饲料为(0.5 2)g(称重试样精确至0.1 m g)，试样含氮量大约 在(0.0 2 -0.1)g 之间。把称取试样放入凯氏烧瓶内，加入硫酸钠(硫酸钾)1 0 g,硫酸铜。.5 g，再加入浓硫酸(2。一2 5)mL,摇匀，使试样完全浸湿。将凯氏烧瓶加盖漏斗，置于电炉上加热，开始时低温加热，摇匀，碳化至泡沫消 失。再升高温度，保持微沸，待溶液消化至澄清且蓝绿色后，再继续加热至少(0.5-2)h，取出，冷却消化液加水 2 0 0 mL，摇匀，加入 4 -5 粒玻璃球。将盛有 5 0 mL硼酸溶液和 1 0 滴混合指示剂的三角瓶放在冷凝管下。冷凝管末端浸人三角瓶液面1 c m以下。沿凯氏烧瓶壁快速加入4 0 氢氧化钠溶液(8 0 9 0)mL，使消化液呈碱性，防止氨气泄漏。立即把凯氏烧瓶和蒸馏装置连接起来，打开冷凝水，摇匀，加热，开始并蒸馏。收集约1 5 0 mL馏出物。用石蕊试纸检查冷凝管末端馏出物p H值，如呈中 性，蒸馏即可结束，立即将冷凝管移出三角瓶内液面，用蒸馏水冲洗冷凝管 口，洗液并入三角瓶中。用。.1 m o l/L盐酸标准滴定溶液滴定收集液，至溶液的颜色恰好从蓝绿色变为酒红色为止。注 1 用硫酸铜做催化剂时不可用锌粒替代玻璃球。2 流出物的温度不超 2 5 尽快进行滴定，避免氨的损失。空白试验:用约。.5 g 蔗糖，按上述操作方法做空白 试验。消耗。.1 m o l/L盐酸标准滴定溶液不得超过。.2 m L e5.4.3 测定方法二仪器法 可采用能测得与基准方法相同结果的仪器方法。5.5 结果计算5.5.1 试样中的粗蛋白质含量按式(1)进行计算。粗蛋白质含量(干态%)=(v，一 vo)XcX 0.0 1 4X K X 1 o om X(1 0 0一 M)X 1 0 0S N/T 0 8 0 0.3-1 9 9 9式中:V,滴定时所消耗盐酸标准溶液体积，m L;Vo 空白试验所消耗盐酸标准溶液体积，m L;盐酸标准滴定溶液浓度，m o l/L;0.0 1 4 每毫摩尔质量氮的克数;m 试样的质量，9;M 按照S N/T 0 8 0 0.1 9 测定试样的水分及挥发物含量，%;K-氮换算成蛋白 质的系数(小米、大麦、燕麦、裸麦5.8 3;大米5.9 5;玉米、高粱6.2 4;小麦、面 粉 5.7 0;其他谷类、豆类、油籽饼粕、饲料为 6.2 5).注:检验结果应标明K值。取平行试验结果的 算术平均值作为检验结果，保留 小数点后第二位。5.5.2 平行试验允许差 蛋白 质含量在2 0%以下为。.2 0 0 0;蛋白 质含量在2 0 0 o-4 0%为。.2 0%一。.4 0 0 0;蛋白质含量在 4 0%以上为。.4 0 0 0,S N/T 0 8 0 0.3-1 9 9 9 附录A(提示的附录)检验注意事项A 1 对比试验 加0.5 g 蔗糖，测定标准试剂乙酞苯胺或色氨酸的含氮量作为对比 试验。对比 试验基质的选择与待测样品的可消解温度有关。乙酸 苯胺容易消解，而色氨酸难以消解。色氨酸使用 前需干燥。A 2 校证试验(按程序进行)A 2.1 燕 馏装置的 检验 放已 知量的。1 m o l/L 1 0 m L 硫酸按溶液于蒸馏装置中，加碱、滴定。若结果 偏低，是由 于蒸馏不完全或装置漏气。A 2.2 没有任何有机物条件下检验 将硫酸馁放入凯氏 烧瓶中，并按标准5.4.2 条款规定程序进行测定。若结果偏低则是由 于燕馏以 前的操作如含氮化合物溅出或挥发等造成损失。A 2.3 分解有机物的检验 测定色氨酸含氮量。若结果偏低，说明除以上A2.1,A2.2 所述原因外，也可能是由于有机物分解不完全(如加热不够或是选用催化剂不合适)。A 3 标准试剂A 3.1 乙酸苯胺 熔点 1 1 4 C;含氮量(N)1 0.3 7 Y./.A 3.2 色氨酸 熔点2 8 2 c;含氮量(N)1 3.3 7 0 o m/m ,A 4 硫酸按:分析纯，干燥。