SNT 1016.2-2001 出口肉及肉制品中甲酚残留量检验方法.pdf

SN中华人民共和国出入境检验检疫行业标准S N/T 1 0 1 6.2-2 0 0 1出口肉及肉制品中甲酚残留量 检验方法M e t h o d f o r t h e d e t e r mi n a t i o n o f c r e s o l u m r e s i d u e s i n me a t s a n d me a t p r o d u c t s f o r e x p o r t2 0 0 1 一 1 2 一 3 0发布2 0 0 2 一 0 6 一 0 1实施中华人民共和国国 家质 量 监 督 检 验 检 疫 总 局发 布S N/T 1 0 1 6.2-2 0 0 1前言 本标准是按照G B/T 1.1-1 9 9 3 标准化工作导则第 1 单元:标准的起草与表述规则第1 部分:标准编写的基本规定 及S N/T 0 0 0 1-1 9 9 5 出口商品中农药、兽药残留量及生物毒素检验方法标准编写的基本规定 的要求编写的。其中测定方法是参考国内外有关文献，经研究、改进和验证后而制定的。本标准同时制定了抽样和制样方法。测定低限是根据国际上对肉及肉制品中甲酚残留量的最高限量和测定方法的灵敏度而制定的。本标准的附录A是提示的附录。本标准由国家认证认可监督管理委员会提出并归口。本标准起草单位:中华人民共和国浙江出入境检验检疫局。本标准主要起草人:郑自强、朱宏、朱晓雨、唐红芳。本标准首次发布。中华人民共和国出入境检验检疫行业标准出口肉及肉制品中甲酚残留最 检验方法s N/T 1 0 1 6.2-2 0 0 1M e t h o d f o r t h e d e t e r m i n a t io n o f c r e s o l u m r e s i d u e s i n me a t s a n d me a t p r o d u c t s f o r e x p o r t范 围本标准规定了出口肉及肉制品中甲酚残留量检验的抽样、制样和气相色谱一 质谱检测器测定方法。本标准适用于出口冻鸡中甲酚残留量的检验。2 抽样和制样2.1 检验批 以不超过 2 5 0 0 件为一检验批。同一检验批的商品应具有相同的特征。如包装、标记、产地、规格和等级。2.2 抽样数量 批量/件最低抽样数/件 1-2 5 1 2 6-1 0 0 5 1 0 1 一 2 5 0 1 0 2 5 1-5 0 0 1 5 5 0 1-1 0 0 0 1 7 1 0 0 1 一 2 5 0 0 2 02.3 抽样方法 按 2.2 规定的抽样件数随机抽取，逐件开启。每件中割取多脂肪组织作为原始样品，混合后置于清洁容器内，作为混合原始样.混合原始样的质量不少于 3 0 0 g。加封后，标明标记，及时送交实验室。2.4 试样制备 从所取全部样品中 取出 有代表性样品约1 5 0 g，在1 0 0 下熔炼，然后通过玻璃纤维滤膜过滤，均分成两份，分别装入洁净容器内作为试样。密封并标明标记。2.5 试样保存 将试样于一1 s 以下冷冻保存。注:在抽样和制样的操作过程中，必须防止样品受到污染或发生残留物含量的变化3 测定方法3.1 方法提要 将经熔炼的脂肪溶于正己烷中，经氢氧化钠溶液提取后用乙酸酥进行衍生化反应，衍生化后用正己烷提取，提取液蒸去溶剂后用正己烷溶解，所得衍生物用气相色谱一 质谱法测定，外标法定量。中华人民共和国国家质f监督检验检疫总局2 0 0 1-1 2-3 0 批准2 0 0 2-0 6-0 1 实施 、S N/T 1 0 1 6.2-2 0 0 13.2 试剂和材料 除另有规定外，所用试剂均为分析纯。3.2.1 正己烷。3.2.2 重 蒸馏水:1 0 0 0 m L蒸馏水中加人0.5 g 高 锰酸 钾，经全玻璃蒸馏装置蒸馏。3.2.3 乙酸配:经全玻璃蒸馏装置蒸馏。3.2.4 氢 氧化钠溶液:1 m o l/L 和5 m o l/L，分别将4 0 g 和2 0 0 g 氢氧化钠溶于1 0 0 0 m L水中。3.2.5 甲酚标准品:纯度)9 5 0 0,3.2.6 甲酚 标准溶液:准确称取适量的甲 酚标准品，用1 m o l/L氢氧化钠溶液配成浓度为1 0 0 p g/m L的标准储备液，根据需要再用 1 mo l/L氢氧化钠溶液稀释储备液，配成适当浓度的标准工作液。3.3 仪器和设备3.3.1 气相色谱仪配有质谱检测器。3.3.2 离心机。3.3.3 离心管:1 0 mL,2 5 mL,3.4 测定步骤3.4，提取和净化 称取约5 g(精确至。.1 g)试徉 经熔炼的 脂肪)于2 5 m L 离心管中，加1 0 m L 正己 烷，塞上 塞子，振摇至脂肪溶解为止。加人 1 mL氢氧化钠溶液(5 mo l/L),缓缓振摇2 mi n。再加入4 m L重蒸水，缓缓振摇 1 mi n。以1 5 0 0 r/mi n离心2 m i n，吸去有机层(正己烷)。在水相中再加人 1 0 mL正己烷，旋摇离心管使溶液混匀。以 1 5 0 0 r/m i n离心 1 mi n，吸去有机层(正己烷)。3.4.2 醋化 在水相中加人 5 mL正己烷和0.3 mL乙酸醉，用力振摇 1 m i n。以1 5 0 0 r/mi n 离心 2 m i n，吸取正己烷相，转人 1 0 mL离心管中。然后在水相中再加人5 mL正己烷和 0.3 m L乙酸配，用力振摇 1 m i n.在 1 5 0 0 r/mi n离心2 mi n，正己烷相合并转入 1 0 mL离心管中。在 6 0 水浴，氮气流下将正己烷相浓缩至 约0.5 m L，加正己 烷定容至1.0 m L，供气 相色 谱一 质谱测定。3.4.3 标准物醋化 取适用浓度的标准工作溶液于 1 0 m L离心管中，加1 m o t/L氢氧化钠溶液至 5 mL，按 3.4.2 进行醋化反应。3.4.4A定3.4.4.1 气相色谱一 质谱条件 a)色谱柱:HP-5,3 0 mX0.2 5 mm(i d)X0.2 5 W m熔融石英毛细管柱或相当的色谱柱;b)柱 温:7 0 C(1 m in)z0 C/-一一几 2 5 0-C(5 m in);c)进样口温度:2 5 0 C;d)色谱一 质谱接口温度:2 8 0 C;e)载气:氦气，纯度)”.9 9 9，流速 1 m L/mi n;f)进样量:2 FA;B)进样方式:无分流进样，I mi n 后开阀;h)电子轰击源(E I);:)电离能量;7 0e V;J)电子倍增器电压:自动调谐加 2 0 0 V;k)测定方式:选择离子监测方式(S I M);1)选择监测离子(m/z):1 0 8,1 5 0 u;m)溶剂延迟:4 mi n.S N/T 1 0 1 6.2-2 0 0 13.4-4.2 色谱一 质谱测定 根据样液中甲酚含量的情况选定峰面积相近的标准工作溶液。标准工作溶液和样液中甲酚衍生物的响应值均应在仪器检测的线性范围内。标准工作溶液和样液等体积参插进样测定。在上述色谱条件下，甲酚衍生物的保留时间约为 5 m i n,标准品的选择监测离子的总离子色谱图见附录A中图Al e3.4.5 空白试验 除不加试样外，均按上述操作步骤进行。3-4.6 结果计算和表述 用色谱数据处理机或按式(1)计算试样中甲酚的残留含量:X式中:X试样中甲酚的残留含量，p g/k g;A v侣 二匕一 A,mz ，.。.。二(1)A样液中甲酚衍生物的峰面积，mm A,标准工作液中甲酚衍生物的峰面积，mm 标准工作液中甲酚的浓度，n g/m L;v样液最终定容体积,m L;。最终样液所代表的试样量，9。注:计算结果需扣除空白值。4 测定低限和回收率4.1 测定低限 本方法的 测定低限为1.0 p g/k g,4.2 回收率 鸡脂肪中甲酚添加浓度及其回收率的试验数据:在 1.0 p g/k g添加水平时，回收率为9 3.3%;在1 0.0 p g/k g 添加水 平时，回 收率为9 7.4%;在 5 0.0 p g/k g添加水平时，回收率为 9 5.0 0 0,s N/T 1 0 1 6.2-2 0 0 1 附录A(提示的附录)标 准品色诊 圈响应值 2 4 0 0 2 2 0 0 2 0 0 0 1 8 0 1 6 0 0 1 4 0 0 1 2 0 0 1 0 0 0 8 0 0 6 0 04 002 004.2 0 4.4 0 4.6 0 4.8 0 5.0 0 5.2 0 5.4 0 5.6 0 5.8 0 6.0 0 6.2 0 6.4 0 时间!m i n图 A1甲酚标准品衍生物的选择监测离子 的总离子色谱图S N/T 1 0 1 6.2-2 0 0 1F or e wo r dT h i s s t a n d a r d wa s d r a ft e d i n a c c o r d a n c e wi t h t h e r e q u i r e me n t s o f G B/T 1.1-1 9 9 3 D i r e c t iv e s f o rt h e wo r k o f s t a n d a r d iz a t i o n-U n i t 1:D r a ft in g a n d p r e s e n t a t io n o f s t a n d a r d-P a rt 1:G e n e r a l r u le sf o r d r a ft i n g s t a n d a r d s a n d S N/T 0 0 0 1-1 9 9 5 Ge n e r a l r u l e s f o r d r a ft i n g t h e s t a n d a r d me t h o d f o rt h e d e t e r m i n a t i o n o f p e s t i c i d e,v e t e r i n a r y d r u g r e s i d u e s a n d b i o t o x i n s i n c o mm o d it i e s f o r e x p o rt T h e me t h o d o f d e t e r mi n a t i o n o f t h i s s t a n d a r d wa s d r a ft e d b y r e f e r r i n g t o r e l e v a n t d o me s t i c a n df o r e ig n l it e r a t u r e s t h r o u g h r e s e a r c h,mo d if i c a t i o n a n d v e r if ic a t io n.B e s i d e s,me t h o d s o f s a mp l i n ga n d s a mp l e p r e p a r a t i o n a r e a l s o s p e c if ie d i n t h i s s t a n d a r d.T h e l i mit o f d e t e r mi n a t ion i n t h is s t a n d a r d i s d e f i n e d o n t h e b a s e s o f t h e c u r r e n t i n t e r n a t i on a l ma xi mu m li mit f o r c r e s o l u m r e s i d u e s i n me a t s a n d me a t p r o d u c t s a n d t h e s e n s it i v it y o f t h i s me t h o d.An n e x A o f t h i s s t a n d a r d is