SNT 0475-1995 出口商品中粪链球菌群检验方法.pdf

SN中华人民共和国进出口商品检验行业标准S N/T 0 47 5 一 9 5出口商 检品中粪链球菌群验方法E x a mi n a t i o n me t h o d s o f t h e f e c a l s t r e p t o c o c c u s g r o u p i n c o m mo d i t i e s f o r e x p o r t1 9 9 5 一 0 9 一 0 6 发布1 9 9 6-0 1 一 0 1 实施中华人民共和国国家进出口商品检验局发 布中华人民共和国 进出口商品检验行业标准出口商品中粪链球菌群检验方法E x a m i n a t i o n me t h o d s o f t h e f e c a l s t r e p t o c o c c u s g r o u p i n c o mm o d i t i e s f o r e x p o r tS N/T 0 4 7 5 一 9 5，主题内容与适用范围 本标准规定了出口 商品中 粪链球菌群的抽样、制样和多 管法、滤膜法及平板计数检验方法。本标准适用于食品中粪链球菌群的检验，也适用于羽绒制品填充料中粪链球菌群的检验。2 设备与材料2.飞 取样工具:镊子、手术剪、刮 勺、乳胶手套 等。2.2 具盖样品瓶、金属样品桶或其他容器。2.3 高压蒸汽灭菌器。2.4 天平:称 量1 0 0 0 g,感量0.0 1 g,2.5 均质器及 1 0 0 0 mL具盖均质杯。2.6 移液管:容量1 m L,1 0 m L(大口 径)。2.7 培养皿:6 0 m mX1 5 mm,9 0 m mX1 5 mm或 5 0 mm X 1 2 m m玻璃皿或塑料皿。2.8 各种规格的培养基容器。2.9 玻璃、耐高温塑料、陶瓷或不锈钢过滤器。2.1 0 滤膜:直径4 7 m m，微孔直径0.4 5 士 0.4 p m，亦可用性能相同的其他滤膜替代。2.1 1 振荡器。2.1 2 恒温培养箱:3 6 士I C,4 4.5 士0.5 C.2.1 3 恒温水浴箱:4 4.5 士。.5,C。3 培养荃3.1 叠氮化钠葡萄糖肉 汤 参见附 录A(补充件)中A l ,3.2 P f i z e r 肠球菌选择性琼脂(P S E琼脂)参见附录A(补充件)中A2 ,3.3 x F链球菌琼脂C 参见附录A(补充件)中A3 ,3.4 脑心浸液 参见附录 A(补充件)中A 4 ,3.5 脑心浸液琼脂 参见附录 A(补充件)中A5 ,抽样与制样4.1 检验批 以不超过 2 5 0 0 件(以商品包装件数计。如包、箱、袋等)为一检验批。规定的报验批为检验批。同一 批商品 应具有相同的 特征，如包装、标记、产地、规格和等级等。4.2 抽样数量中华人民 共和国国家 进出口 商品 检验局1 9 9 5-0 9-0 6 批准如另有规定，则按不同商品所1 9 9 6 一 0 1 一 0 1 实施 Is N/T 047 5一 95 在无特殊规定时，按照公式了 万/2(式中N为该批商品的总件数).遵循四舍五入规则计算抽样件数;如另有规定，则按不同商品所规定的抽样数进行 抽样。4.3 抽祥方法与样品保存 按 4.2 规定的抽样件数随机抽取，以无菌操作逐件开启。4.3.1 食品:对于有内包装 1 1 0 0注:表内所列样品量如改为1,0.1,0.0 1 g(.L)时，表内数字应相应降低1 0 倍;如改为。.0 1,0.0 0 1,0.0 0 0 1 g(m L)时，则表内数字相应增加 1 0 倍，其余可类推S N/T 047 5 一 95 附录C粪链球菌鉴定简图 (参考件)样品一m;月 旨/咫 E 凉 月 旨粉红色 菌落(带棕色 环的棕 黑色菌 落)在脑 心浸液 肉汤 内 4 5 C 培养 2 01在1 0 C 培养 5 d 的生长物，确证 为 过 氧化氢 酶阴性在4 5 和1 0 生长 仅 在4 5 C生长在 含6.5 YN e C l,P H B.0 的脑 心浸液 肉汤 内生长 牛 链球 菌和马肠 链球菌牛奶 中0.1%亚 甲基蓝 还 原试验 阳性 肠 球菌群淀 粉水解试 验 W3 Y/阴性 暂 定Q 菌(鸟 链 球菌)乳塘 发醉试验/Y.,T c(D,T I U 还原和D山仅 产酸不变狡二 k 什油醇发酵试 验淀粉 水解试验厂 介 牛链 球菌 来源于 畜禽)马 肠链球 菌9911阴性 1发 酵试验姗 球 曳 及 其 亚”明 哪解 试 气 阳性 去 非典 型粪 链球菌(来源于植 物)阴性石蕊牛 奶膝化 试验 L阿拉伯糖阳性屎 链 球 菌j广22j了 阳性 粪 链球菌液 化亚种阳 性阴性性|月类fh A fz n粪 链球菌 产 酶亚种 溶 血试验/粪链 球菌 液 化亚种 来源于 昆虫)一 肠球 菌(来源 于温 血动物)阳性，击f阴 性 十粪链球 菌产 酶 亚 种S N/T0 4 7 5 一 9 5附加说明:本标准由中华人民共和国国家进出口商品检验局提出。本标准由中 华人民 共和国 湖北进出口 商品检验局负 责起草。本标准主要起草人张宗显、王丽。P r o f e s s i o n a l S t a n d a r d o f t h e P e o p l e s R e p u b l i co f C h i n a f o r I mp o r t a n d E x p o r t C o mm o d i t y I n s p e c t i o nE x a m i n a t i o n m e t h o d s o f t h e f e c a l s t r e p t o c o c c u s s N/T 0 4 7 5 一 9 5 g r o u p i n c o m m o d i t i e s f o r e x p o r t1 S c o p e a n d f i e l d o f a p p l i c a t i o n T h is s t a n d a r d s p e c i f ie s t h e m e t h o d s o f s a mp li n g,s a mp l e p r e p a r a t i o n,m u l t i p l e-t u b e t e c h n i q u e,m e mb r a n e f i l t e r t e c h n i q u e a n d p l a t e c o u n t o f t h e f e c a l s t r e p t o c o c c u s g r o u p i n c o m mo d i t i e s fo r e x p o r t.T h i s s t a n d a r d is a p p l i c a b l e t o t h e e x a mi n a t i o n o f t h e f e c a l s t r e p t o c o c c u s g r o u p i n f o o d a n d a l s o i nf i l l e r o f f e a t h e r p r o d u c t s f o r e x p o r t.2 A p p a r a t u s a n d ma t e r i a l s2.1 S a mp l i n g t o o l s;s a mp l i n g d e v i c e s u i t a b l e f o r p r o d u c t s,s u c h a s s c i s s o r s,f o r c e p s,s c o o p a n d l a t e xg l o v e e t c.2.2 S a m p l i n g j a r s,me t a l l i c b a r r e l s o r c o n t a i n e r s wi t h s u i t a b l e c o v e r s.2.3 A u t o c l a v e.2.4 B a l a n c e,w i t h w e i g h t s,1 0 0 0 g c a p a c i t y,s e n s i t i v i t y o f 0.0 1 g.2.5 H o mo g e n i z e r,h o mo g e n i z i n g c u p o f 1 0 0 0 mL c a p a c i t y,w i t h s u i t a b l e c o v e r s.2.6 P i p e t s(l a r g e b o r e),1 a n d 1 0 m L g r a d u a t e d.2.7 P e t r i d i s h e s,6 0 m m X 1 5 mm,9 0 m m X 1 5 mm o r 5 0 m m X 1 2 mr tr,g l a s s o r p l a s t i c.2.8 Me d i u m c o n t a i n e r s wit h d if f e r e n t c a p a c i t y.2.9 F i l t e r s;g l a s s,p l a s t ic,c e r a mi c o r s t a i n l e s s s t e e l2.1 0 F i l t e r i n g me m b r a n e:4 7 m m i n d i a m e t e r,0.4 5 士0.0 4 p m i n d i a me t e r o f mi l l i p o r e o r o t h e r m e m-b r a n e e q u i v a l e n t.2.1 1 S h a k e r.2.1 2 I n c u b a t o r s m a i n t a i n e d a t 3 6 士1 C a n d 4 4.5 士0.S C r e s p e c t iv e l y.2.1 3 C o n s t a n t t e m p e r a t u r e w a t e r b a t h s ma i n t a i n e d a t 4 4.5 士0.5 0C.3 Me d ia3.1 Az i d e d e x t r o s e b r o t h r e f e r t o a p p e n d i x A(S u p p l e m e n t)A1 .3.2 P f i z e r s e l e c t iv e e n t e r o c o c c u s(P S E)a g a r r e f e r t o a p p e n d i x A(S u p p l e m e n t)A 2 .3.3 K F s t r e p t o c o c c u s a g a r r e f e r t o a p p e n d i x A(S u p p l e me n t)A3 .3.4 B r a i n-h e a r t in f u s i o n r e f e r t o a p p e n d i x A(S u p p l e me n t)A 4 .3.5 B r a i n-h e a r t i n f u s i o n a g a r r e f e r t o a p p e n d i x A(S u p p l e m e n t)A 5 A p p r o v e d b y t h e S t a t e A d mi n i s t r a t io n o f I mp o r t a n d E x p o r tC o mm o