SNT 0654-2019 出口水果中克菌丹残留量的检测 气相色谱法和气相色谱-质谱质谱法.pdf

中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 065420192019-12-27 发布2020-07-01 实施中 华 人 民 共 和 国 海 关 总 署发 布ICS 67.050CCS X04出口水果中克菌丹残留量的测定 气相色谱法和气相色谱-质谱/质谱法Determination of captan residues in fruits for ExportGC and GC-MS/MS method出口水果.indd 12020/1/16 20:09:19出口水果.indd 22020/1/16 20:09:19ISN/T 06542019前 言本标准按照 GB/T 1.12009 给出的规则起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些专利的责任。本标准代替 SN 06541997出口水果中克菌丹残留量检验方法。本标准与 SN 06541997出口水果中克菌丹残留量检验方法相比，主要技术变化如下：标准名称修改为出口水果中克菌丹残留量的测定 气相色谱法和气相色谱-质谱/质谱法；增加了梨、橘子、橙子、桃、桑葚、葡萄、猕猴桃、草莓、橄榄、荔枝、芒果、香蕉、火龙果、西瓜、香瓜等基质，删除了抽样环节；修改了样品前处理方法，固相萃取法改为基质分散固相萃取法；重新修订了方法的定量限：气相色谱法为 0.02 mg/kg，气相色谱-质谱/质谱联用法为0.01mg/kg；采用气相色谱法替代了原标准中的高效液相色谱法；增加了气相色谱-质谱/质谱法为确证方法。本标准由中华人民共和国海关总署提出并归口。本标准起草单位：中华人民共和国郑州海关。本标准主要起草人：张守杰、刘胜男、乔晴、华向美、孙武勇、祝伟霞、张淑霞、王素方、张玉娟、庞文月、辛莹。本标准所替代标准的历次版本发布情况为：SN 06541997。出口水果.indd 12020/1/16 20:09:19出口水果.indd 22020/1/16 20:09:191SN/T 06542019出口水果中克菌丹残留量的测定1 范围本标准规定了出口水果中克菌丹残留量的气相色谱和气相色谱-质谱/质谱检测方法。本标准适用于苹果、梨、橘子、橙子、桃、桑葚、葡萄、猕猴桃、草莓、橄榄、荔枝、芒果、香蕉、火龙果、西瓜、甜瓜等水果中克菌丹的测定。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本标准。GB 2763 食品安全国家标准 食品中农药最大残留限量GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法3方法提要试样中的克菌丹经磷酸溶液浸泡，用乙腈涡旋振荡提取，基质分散固相萃取净化后，注入气相色谱仪或气相色谱-质谱/质谱联用仪测定测定，外标法定量。4试剂除另有规定外，所有实验用试剂均为分析纯，实验用水符合 GB/T 6682 中一级水的要求。4.1正己烷：色谱纯。4.2乙腈：色谱纯。4.3键合硅固相萃取吸附剂填料伯仲胺 PSA（primary secondary amine）：粒度 40m70m。4.4键合硅固相萃取吸附剂填料十八烷基硅烷键合硅胶 C18（ostade-cylsilane）：粒度 40m 70 m。4.5石墨化碳黑填料 GCB（graphitized carbon black）：粒度 40m 70 m。4.6氯化钠。4.7无水硫酸钠：550 马弗炉内烘 4 h，200 时取出置于干燥器内冷却后装瓶备用。4.8磷酸。4.9磷酸溶液（10%）：量取 10 mL 磷酸（4.8）溶于水中并用水定容至 100 mL。4.10克菌丹标准品（Captan，C9H8Cl3NO2S，CAS NO：133-06-2）：纯度 99%。4.11克菌丹标准储备溶液：准确称取适量克菌丹标准品，用正己烷配制成浓度为 0.1 mg/mL 的标准储备液，棕色瓶中于 04 冰箱中保存。4.12克菌丹标准工作溶液：吸取适量标准储备溶液（4.11）用正己烷稀释成合适浓度的标准工作液。4.13有机相滤膜：0.22 m。5主要仪器和设备5.1气相色谱仪：带电子捕获检测器。出口水果.indd 12020/1/16 20:09:192SN/T 065420195.2气相色谱-质谱/质谱仪：配备 EI 源。5.3天平：感量为 0.1 mg 和 0.01 g。5.4氮吹仪。5.5涡旋混合器。5.6离心机：转速 5 000 r/min。5.7超声波发生器。5.8刻度离心管：15 mL。6样品制备与保存从所取全部样品中取出代表性样品约 500 g 按照 GB 2763 要求处理，用捣碎机全部磨碎混合均匀，均分成两份，分别装入洁净容器中，密封，并标明标记，于-18 以下冷冻存放。在样品制备和保存过程中，应防止样品受到污染或者发生残留物含量的变化。7测定步骤7.1提取称取 5.0 g 试样（精确至 0.01 g），置于 50 mL 离心管内。加 5 mL 10%磷酸溶液（4.9）浸泡 5 min，加入 25 mL 乙腈（4.2）和 7 g 氯化钠（4.6）剧烈涡旋振荡混匀提取 10 min，在 5 000 r/min下离心 5 min，取 10 mL 上清液于 15 mL 具塞试管内待净化。7.2净化在上述装有上清液的具塞试管内加入 100 mg PSA 填料、50 mg C18 填料和 30 mg GCB 填料，充分涡旋 1 min，5 000 r/min 离心 1 min，准确移取 5 ml 净化液至 15 mL 具塞试管内在 40 下氮吹至近干，加入 1.0 mL 正己烷（4.1）溶解残渣并超声 15 s 后加入 0.1 g 无水硫酸钠（4.7）除水，涡旋 1 min，过 0.22 m 滤膜，注入气相色谱仪或气相色谱-质谱/质谱联用仪分析。7.3测定7.3.1仪器条件7.3.1.1 气相色谱参考条件如下：a）色谱柱：HP-5，柱长 30 m，内径 0.32 mm，膜厚 0.25 m 或同等性能的色谱柱；b）柱温度程序：初始温度 50 保持 1 min，以 8/min 升温至 180，保持 1 min，再以20/min 升温至 300，保持 2 min；c）进样口温度：240；d）检测器温度：300 ；e）载气：氮气（纯度 99.999%），1.0 mL/min；f）尾吹气：氮气（纯度 99.999%），30 mL/min；g）进样方式：不分流进样；h）进样量：1.0 L。7.3.1.2 气相色谱-质谱/质谱参考条件如下：a）色谱柱：HP-5 MS，柱长 30 m，内径 0.25 mm，膜厚 0.25 m 或同等性能的色谱柱；出口水果.indd 22020/1/16 20:09:193SN/T 06542019b）柱温度程序：初始温度 50 保持 1 min，以 10/min 升温至 200，保持 1.5 min，再以20/min 升温至 300，保持 2 min；c）进样口温度：260；d）色谱-质谱接口温度：280；e）离子源温度：180；f）载气：氦气（纯度 99.999%），1.0 mL/min；g）离子源：电子轰击源（EI 源）h）进样方式：不分流进样，1.5 min 开阀；i）进样量：1.0 L；j）溶剂延迟：5 min；k）扫描方式：多反应离子监测模式（SRM）；其母离子 m/z 147.97，子离子 m/z 分别为104.87*、78.97、69.93。a7.3.2气相色谱法测定根据样液中待测物含量情况，选定含量相近的标准系列工作溶液。标准工作溶液和样液中待测农药的相应值均应在仪器的线性范围内。标准工作溶液和样液等体积参插进样测定。在上述色谱条件下，克菌丹保留时间约为 18.81 min，标准品的色谱图参见附录 A 中图 A.1。7.3.3气相色谱-质谱/质谱法测定及确证根据样液中被测物的含量情况，选定浓度相近的标准工作溶液。标准工作溶液和样液中克菌丹的响应值均应在仪器检测线性范围内。对标准工作溶液和样液等体积参插进样测定。如果样液与标准工作溶液的选择离子色谱图中，在相同保留时间处有色谱峰出现，并且在扣除背景后的样品质量色谱图中，所选离子均出现，所选择离子的丰度比与标准品对应离子的丰度比，其值在允许范围内（允许范围见表 1），则可确定样品中存在对应的被测物。在 7.3.1.2 条件下，克菌丹的保留时间为18.94 min，其气相色谱-质谱/质谱 MRM 图见附录 A 中图 A.2。表 1 定性确证时相对离子丰度的最大允许偏差相对离子丰度/%50 2050 1020 10允许的相对偏差/%202530507.3.4 空白试验除不称取试样外，均按上述测定条件和步骤进行。8结果计算与表述用 GC 或 GC-MS/MS 数据处理系统或按式（1）计算试样中克菌丹的残留量：mAVcAXs=（1）式中：X 试样中克菌丹的含量，单位为毫克每千克（mg/kg）；*为定量离子。出口水果.indd 32020/1/16 20:09:194SN/T 06542019A 样品中克菌丹的峰面积；c 标准工作溶液中克菌丹的浓度，单位为微克每毫升（g/mL）；V 样品最终定容体积，单位为毫升（mL）；As标准工作溶液中克菌丹的峰面积；m最终样液所代表的试样质量，单位为克（g）。注：计算结果需将空白值扣除。9测定低限与回收率9.1测定低限本方法的测定低限气相色谱法为 0.02 mg/kg，气相色谱-质谱/质谱联用法为 0.01 mg/kg。9.2回收率样品的添加浓度及回收率的实验数据见表 2、表 3。表 2 不同基质的添加浓度、回收率（GC-ECD）基质添加水平（mg/kg）回收率/%苹果0.0279.0101.04.080.5100.525.080.0102.0橘子0.0271.097.54.081.896.525.080.385.2梨0.0281.099.04.082.099.525.085.2102.4橙子0.0278.592.04.080.591.825.087.691.2猕猴桃0.0270.195.6580.196.92080.7106.9西瓜0.0271.2100.3582.6102.51081.0104.5出口水果.indd 42020/1/16 20:09:195SN/T 06542019基质添加水平（mg/kg）回收率/%香蕉0.0271.098.9582.499.61080.9101.2甜瓜0.0271.698.6582.6104.91085.7103.6桃0.0274.8103.2580.0100.82081.2106.5桑葚0.0275.699.5579.9106.91081.6101.1葡萄0.0271.298.5382.6102.4580.199.5草莓0.0272.5100.2581.0104.280.2103.7橄榄0.0269.891.2578.9100.41080.5101.9荔枝0.0270.095.2579.9102.31081.2106.1芒果0.0270.298.3580.1100.51081.6106.2火龙果0.0271.299.5581.2100.91082.1104.2续表出口水果.indd 52020/1/16 20:09:196SN/T 06542019表 3 不同基质的添加浓度、回收率（GC-MS/MS）基质添加水平（mg/kg）回收率/%苹果0.0179.0102.04.080.797.525.084.098.4橘子0.0171.092.04.081.087.025.080.086.0梨0.0184.0103.04.082.596.025.089.6108.4橙子0.0175.087.04.081.597.525.081.694.4猕猴桃0.0169.595.1571.2102.32081.6103.5西瓜0.0171.599.1580.6105.21080.9105.6香蕉0.0172.099.6580.5100.71082.7103.1甜瓜0.0