SNT 0549-1996 出口蜂王浆及干粉中维生素B6检验方法.pdf

S ilL-中华人民共和国进出口商品检验行业标准S NJ T 0 5 4 9 一 1 9 9 6出 口 蜂 王 浆 及 干 粉 中维 生 素B。检 验 方 法Me t h o d f o r d e t e r mi n a t i o n o f v i t a mi n B 6i n f r e s h r o y a l j e l l y a n d l y o p h i l i z e d r o y a l j e l l y p o w d e r f o r e x p o r t1 9 9 6 一 0 7 一 1 0 发布1 9 9 6 门 2 一 0 1 实施中华人民共和国国家进出口商品检验局发 布S N/T 0 5 4 9-1 9 9 6前言 本标准 是根据G B/T 1.1-1 9 9 3 标准 化工作导则 第1 单元:标准的起草与表述规则 第1 部分:标准编写的基本规定进行编写的，同时参考了S N/T 0 0 0 1-1 9 9 5出口商品中农药、兽药残留及生物毒素检验方法编写的基本规定(以下简称 规定)。标准的起草依据日本等国对蜂王浆及干粉中添加的维生素B。含量的要求，参考国内外有关文献及 规定 内容而制定。本标准由中华人民共和国国家进出口商品检验局提出并归口。本标准起草单位:中华人民共和国浙江进出口商品检验局。本标准主要起草人:鲍晓霞、陈笑梅。中华人民共和国进出口商品检验行业标准Me t h o d f o r d e t e r mi n a t i o n o f v i t a mi n B 6 i n f r e s h r o y a l j e l l y a n d l y o p h i l i z e d r o y a l j e l l y p o wd e r f o r e x p o r ts x/T 05 49一 19 96，范围 本标准规定了出口 强化蜂王浆及干粉中维生素B s 检验的抽样、制样和液相色谱测定方法。本标准适用于出口强化蜂王浆及干粉中维生素B。的测定。2 抽样和制样2-1 检验批 鲜王浆以不超过 3 0 0 k g为一检验批。王浆冻干粉以不超过 1 0 0 k g为一检验批。同一检验批的商品应具有相同特征，如包装、产地、规格和等级等。2.2 抽样方式和数量 每批抽样不少于 3 箱，每箱取 6 0 g，若从冷库中取出鲜王浆，需经解冻，干粉需升温至室温取样，共约1 8 0 g，作为原始 样品。注:车间取样(仅限鲜蜂王浆)，以每个拼配锅为一个生产批号作为取样单位，但不得超过 3 0 0 k g，抽取样品不超过 5 0 09，充分混匀后.密封保存2.3 试样制备 从每袋原始样品中取出部分有代表 性样品，充分混匀，用四 分法缩分出 不少于5 0 g 试样。装人清洁容器内，加封后，标明标记，送实验室作检验样。2.4 样品保存 将样品于一1 8 以下冷冻保存。注:在抽样及制样过程中，必须防止样品受到污染或发生含量的变化。3 测定方法3.1 方法提要 试样用 1 0%偏磷酸提取，沉淀样品中的蛋白质，离心，取上清液，用高效液相色谱仪测定，外标法定量。3.2 试剂和材料 ，除特殊规定外，试剂均为分析纯3.2.1 乙睛:液相色谱专用。3.2.2偏磷酸(HP O,)3.2.3 1 0%偏磷酸水溶液:称 取 1 0 g 偏磷酸(H P O,)溶于水中，用水稀释定容至1 0 0 m L,中华人民共和国国家进出口商品检验局1 9 9 6-0 7-1 0 批准1 9 9 6-1 2-0 1 实施 Is N/T 0 5 4 9 一 1 9 9 63.2.4 磷酸 二 氢钾(K H,P O)。12.5 0.0 3 moll/1磷酸 二氢钾水溶液:称取4.0 8 2 4 g 磷酸二 氢钾(K H 2 P O)溶于水中，用水稀释定容至 1 0 0 ml。3.2.6 维生素B。标准品:毗哆醇，生物标准品，纯度大于 9 9%3.2.7 维生素B。标准 储备液:称取1 0 0 m g 维生素B,溶于水中，用水稀释定容至1 0 0 m L。该液1 m l,相当于 1 m g维生素B,。保存于 4 C冰箱中。3.2.8 维生素B 标准工作液:吸取维生素B。标准储备液1.0 m L，用水稀释定容至1 0 0 m l。该液1 m L 相当于1 0 P g 维生素B s。保存于4 C 冰箱中3.3 仪器和设备I11 高效液相色谱仪，配有荧光检测器。3.3.2 旋涡混匀器或超声波提取仪。3.3-3 离心机13.4 5 0 mL容量瓶。3.3.5 微量进样器，1 0 y L o3.4 测定步骤3-4-1 样品处理 准确 称取有代表性的均匀样品 约。.5 g(精确到。.0 0 0 1 g)，于5 0 m L 容量瓶中，加2 5 m L 1 0%偏磷酸，在旋涡混匀器或超声波提取器上提取5 min，用水稀释定容至刻度，摇匀。取部分溶液离心。取上清液用水稀释至适当浓度，作高效液相色谱测定用。3.4.2 液相色谱测定3.4-2.1 液相色谱条件 a、色谱柱:O D S-C 1 8 柱(4.0 mm X2 5 0 mm),b)流动相:0.0 3 m o l/L磷酸二氢钾/乙睛(8 0-2 0，以稀磷酸调至 p H2.3),c)流速:1.0 m L/m in,d)检测器:荧光检测器，E x 2 9 0 n m,E m 3 9 0 n m.3.4.2.2 维生素B。色谱图图 1 维生素B。色谱图s N/T 0 5 4 9 一 1 9 9 63.4-2.3 色谱测定 对标准工作溶液和样液等体积穿 插进样2 p L测定。在上述色谱条件下，维生素B。保留 时间 约为4.0 mi n,3-4-3 空白试验 除不加试样外，按上述测定步骤进行。3.4.4 结果计算和表述 用色谱数据处理机或按式(1)计算试样中维生素 B 含量:c H-v A入告二 二，-二 二，二，二 1 r二仇.l u u uu“.“.。:(1)式中:X维生素 B。含量，%;H,o 样液中维生素 B s 的峰高,m m;H.,标准工作溶液中维生素 B 6 的峰高，m m;c 标 准工作溶液中 维生素B。的 浓度，p g/m L;二称取的试样量，9;A稀释倍数;V称样时的定容体积，m L,注:计算结果需要扣除空白值。