SN 0596-1996 出口粮谷中稀禾啶残留量检验方法.pdf

SN中华人民共和国进出口商品检验行业标准s N 0 5 9 6 一 1 9 9 6出口粮谷中稀禾咤残留量检验方法Me t h o d f o r t h e d e t e r mi n a t i o n o f s e t h o x y d i m r e s i d u e s i n c e r e a l s f o r e x p o r t1 9 9 6-1 1 一 1 5 发布1 9 9 7 一 0 5 一 0 1 实施中华人民共和国国家进出口商品检验局发 布S N 0 5 9 6 一1 9 9 6前言 本标准是根据G B/T 1.1-1 9 9 3 标准化工作导则 第1 单元:标准的 起草与表述规则 第1 部分:标准编写的基本规定 及S N/T 0 0 0 1-1 9 9 5 出口 商品中农药、兽药残留量及生物毒素检验方法标准编写的基本规定 的要求进行编写的。其中测定方法是参考国内外有关文献，经过研究、改进和验证后制定的。本标准同时制定了抽样和制样方法。测定低限是根据国际上对粮谷中稀禾吮的最高残留限量和测定方法的灵敏度制定的 本标准的附录 A是提示的附录 本标准由中 华人民 共和国国 家进出口商品 检验局 提出并归口。本标准起草单位:中华人民共和国辽宁进出口商品检验局 本标准主要起草人:王洪涛、姜伟、李永军、吴斌、张庆玉。本标准系首次发布的行业标准。中 华人民共和国 进出口商品检验行业标准出口粮谷中稀禾咤残留量检验方法s x 059 6一 1 99 6Me t h o d f o r t h e d e t e r mi n a t i o n o f s e t h o x y d i m r e s i d u e s i n c e r e a l s f o r e x p o r t范 围本标准规定了出口粮谷中稀禾咤残留量检验的抽样、制样和气相色谱测定方法。本标准适用于出口玉米中稀禾PQ残留量的检验。抽样 和制样2.1 检验批 散积玉米以 不超过2 0 0 t 为 一检验批;袋装玉米(每袋约9 o k g)以约2 2 0 0 袋为一检验批。同一检验批的商品应具有相同的特征，如包装、标记、产地、规格和等级等。2.2 抽样数量2.2.1 袋装玉米 按式(1)计算抽样袋数:。=抓 ”(1)式中:a 抽样袋数;N全批袋数。注:a值取整数.小数部分向前进位为整数。2.2.2 散积玉米 粮堆高度不超过 2m。按粮堆面积划区设点。以 5 0 m,为一个取样区，每区设中心及四角(距边线1 m处)5 个点。每增加一个取样区，增设 3 个点2.3 抽样工具2.3.1 金属双套管取样器:全长分 1 m.2 m(均包括手柄)两种。内、外管同部位分段开几个槽口，每个槽口长 1 5 2 0 c m.口宽 2.0 -2.5 c m。内管的内径为2.5-3.0 c m，取样器的探头长约 7 c m.2.3.2 取样铲。2.3.3 分样板。2.3.4 盛样器:筒或袋，可密封。2.3.5 分样布或适用铺垫物。2.4 抽样方法2.4.1 袋装抽样2.4.1.1 倒包抽样:从堆垛的各部位随机抽取 2.2.1 规定的应抽样袋数的 1 0%(每批一般不少于 3袋)，将袋口缝线全部拆开，平置于分样布或其他洁净的铺垫物上，双手紧握袋底两角，提起约成 4 5 0 倾角，倒拖约 l m，使袋内货物全部倒出。查看袋内和袋间品质是否均匀，确认情况正常后，用取样铲随机在各部位抽取样品.并立即将样品倒入盛样器内。每袋抽取样品的量应基本一致。中华人民共和国国家进出口商品检验局 1 9 9 6-1 1-1 5 批准1 9 9 7-0 5-0 1实施 1s N 05 96 一 1 99 62.4.1.2 袋内抽样:按 2.2.1 规定的应抽样袋数(扣除倒包抽样袋数)，在堆垛四周上、中、下各层以曲线形走向随机抽取。将取样器(2.3.1)槽口关闭，从每袋一角依斜对角方向插入袋内，然后旋转内管以开启 槽口，待样品流满内 管后，再旋转内 管以关闭槽口。抽出取样器，立即将样品倒入盛样器内，每 袋抽取样品的量应与 2.4.1.1 基本一致 每批所抽取的样品总量应不少于4 k g2.4.2 散积抽样:按 2.2.2 规定的取样点，逐点抽取祥品。将取样器(2.3.1)槽口关闭，以倾斜 4 5。角度擂入粮堆至相应深度，旋转取样器内管以开启槽口，待样品流满内管后，再旋转内管以关闭槽口。抽出取样器，立即将样品倒入盛样器内。从各点所抽取的样品量应基本一致 每批所抽取的样品总量应不少于4 k g。2.4.3 大样缩分2.4.3.1 袋装样品:合并从袋内和倒包抽样所取全部样品，倒于分样布上，用分样板按四分法缩分样品至不少于2 k g,盛于盛样器内，加 封后标明 标记，并及时送交实验室2.4-3.2 散积样品:将抽取的全部样品，倒于分样布上，以下按上述袋装样品方法进行。2.5 试样制备 将样品 按四 分法缩分至I k g，全 部磨碎并通 过2 0 目 筛。混匀，均分成两份 作为 试样，分装入洁净的盛样器内，密封，标明标记。2.6 试样保存 试样于一5 以下避光保存。注:在抽样和制样的操作过程中，必须防止样品受到污染或发生残留物含量的变化.3 测定方法3.1 方法提要 玉米中残留的稀禾吮及其代谢物采用甲醇提取，经氧化及甲酷化处理后，采用硅胶层析柱净化，用配有火焰光度检测器(硫滤光片)的气相色谱仪测定，标准曲线法定量。测定结果包括稀禾咤及其代谢物，均以稀禾咤含量计。3.2 试剂和材料 除另有规定外，试剂均为分析纯，水为蒸馏水。3.2.了 甲醉:重蒸馏。3.2.2 二抓甲烷:重蒸馏。3.2.3 正己烷:用5A分子筛脱水 2 4 h，重蒸馏。3.2.4 丙酮:经加高锰酸钾回流 1h后，重蒸馏。3.2.5 氢氧化钙。3.2.6 过氧化氢溶液;3 0%。3.2.7 冰乙酸。3.2.8 氯化钠。3.2.9 硫酸:P 约1.8 4 g/m L.3.2.1 0 甲醉一 水溶液(1 十1).3.2.1 1 盐酸榕液:1 2 m o l/L a3.2.1 2 氢氧化钡溶液:1%水溶液(，/二)。3.2.1 3 硫酸一 甲醇溶液(1+2 0),3.2.1 4 饱和碳酸氢钠水溶液。3.2.1 5 硅藻土.3.2.1 6 硅胶:层析用，6 0 -1 0。目，1 3 0 0C 供 4 h,贮于干操器内备用。s N 05 96 一 19 963.2.1 7 稀禾R$标准品:纯度)9 9 y 0.3.2 门8 稀禾陡标准溶液:a)稀禾吮标准储备液:准确称取。l o g(准确至。.0 0 0 1 g)的稀禾陡标准品于1 0 0 m L的容量瓶中，用少量的甲 醇溶解，然后 再用甲醇稀释至刻度，混匀。配制成浓度为1.0 0 m g/m L的储备液。b)稀禾咤标准工作液:根据需要准确移取适量的标准储备液，用甲醇稀释成适当浓度的标准工作液。须每周配制一次。根据需要移取一定量标准工作液，按测定步骤 3.4.2-3.4.4 进行氧化、酪化及净化后制成标准工作液的试液。3.3 仪器和设备3.3.1 气相色谱仪并配有火 焰光度检测器，带有硫滤光片(3 9 4 n m),3.3.2 回流装置3.3.3 玻璃层析柱:3 0 c m X 1.2 c m(内径)，具 5 0 mL贮液斗。3.3.4 离心机。3.3.5 振荡器。3.3.6 旋转蒸发器。3.3.7 微量注射器:1 0 I L,3.4测定步骤3.4.1 提取 称取约2 0 g 试样(精确至。.1 g)，置于2 5 0 m L锥 形瓶中，加入1 0 0 m L甲 醇，振荡3 0 m i n，静置，倾取上清液。于残余物中加入5 0 mL甲醇，重复上述步骤。合并上清液于 5 0 0 mL锥形瓶中，加入 1 5 0 m L水、4g 氢氧化钙，振摇 1 mi n，静置用上敷 1 c m厚硅藻土的滤纸抽滤。用 3 0 mL甲醉一 水(1+1)洗涤容器及残渣，抽滤，合并滤液。用1 2 m o l/L 盐酸调节滤液至p H小于 1，加入约5 0 g 抓化钠，摇匀。用1 0 0 m L 二氯甲 烷分三次(5 0,3 0,2 0 m l)提取，合并提取液，于4 0 水浴中蒸 干。3.4.2 氧化 在上述残渣中加入 1 0 0 mL氢氧化钡溶液(1%)，接回流冷凝器，缓缓加热回流。当开始出现回流时，从侧管加入 1 0 m L过氧化氢溶液(3 0%),回流 1 0 m i n，再加入 1 0 mL过氧化氢溶液(3 0%).继续回流 1 5 m i n。将溶液冷却至室温.用1 2 m o l 几 盐酸溶液调节p H小于1，加入2 0 g 氮化钠，用二抓甲 烷提取两次，每次用 8 0 mL。合并提取液，于 4 0 C水浴中蒸干。加 5 m工冰乙酸酸化，于 7 0 水浴中用旋转蒸发器蒸干。3.4.3 醋化 加入5 0 m L硫酸一 甲醇(1+2 0)溶液，加热回 流3 0 m i n。冷却至室温后，用饱和碳酸氢钠溶液调节p H至中 性(略大于7)。用1 0 0 m L 二氯甲 烷分两次提取，合并提取液。于4 0 C 水浴中蒸发至约5 m L，加入 2 9硅胶，继续蒸发至干。3.4.4 净化 将8 g 硅胶加入适量正己 烷一 丙酮(8 5+1 5)中，搅匀，装入层析柱中。将3.4.3 中已 蒸干的2 g 硅胶装入柱中，用 5 m L丙酮洗涤容器，移入层析柱中。用 7 5 m L正己烷一 丙酮(8 5+1 5)溶液淋洗层析柱，弃去淋洗液。用2 0 0 mL的正己烷一 丙酮一 甲醇(8 5+1 0 十5)淋洗层析柱，收集淋洗液。于4 0 C 水浴中蒸发至约3 m L，移入离心管，以3 0 0 0 r/m i n 离心1 0 m i n。取上清液，用5 m L丙酮洗涤沉淀物，搅匀，离心，取上清液。合并上清液于心形瓶中，于 4 0 水浴中蒸干，用丙酮溶解并定容至 1 m L，供气相色谱测定。3.4.5 测定3.4.5.1 气相色谱条件 。)色谱柱:石英毛细管往 2 5 in X0.3 2 min(id)，膜厚 0.5 2 K m,5%苯甲基硅氧烷;b)载气:氢 气，1 m L/m i n;c)尾吹 气:氮气，纯度)9 9.9 9%,4 0 m L/m i n,S N 059 6一 19 96 d)燃烧气:氢气，5 0 m L/m i n;。)助嫌气:空气，6 0 m L/m i n;f)进样口温度:2 5 0 C;g)检测器温度:2 3 5 C;h)柱温:程序升温，初温 6 0 C，保持 1 m i n，以4 0 C/m i n速度升至2 2 0 C，保持 1 0 mi n;i)进样方式:不分流进样，1 m二后打开清扫阀。3.4-5.2 气相色谱测定3.4-5.2 门标准曲线的制备 根据试样中被测农药含量情况，按 3.4.5.1 规定的色谱条件，分别等体积地注入5个不同适当浓度的，经氧化、酷化及净化的稀禾吮标准工作液系列。测量其峰面积(或峰高)，绘制峰面积(或峰高)对稀禾咙浓度的双对数标准曲线。在上述色谱条件下被测物的保留时间约为 1 0.2 m i n.稀禾陡标准品的色谱图见附录A中图A1,3.4-5-2.2 样液测定 准确注入与上述标准工作液等体积的样液，用所得峰面积(或峰高)在标准曲线上求得样液中被测物稀禾吮的浓度.3.4.6 空白试验 除不称取试样外，均按上述测定步骤进行。3.5 结果计算与表述 用色谱数据处理机或按式(2)计算试样中稀禾绽的残留量。X_竺 二.-.(2)刀;式中:X 试样中 稀禾咤含 量,m g/k g;c 从标准曲 线上求得的 样液中稀 禾吮的 浓度，p g/m l;V 样液最终定容体积.mL;。最终样液所代表的试样量.g.注:计算结果需将空白值扣除.测定低限、回收率4.1 测定低限 本方法的测定 低限为0.0 4 m g/k g.4.2 回收率 回收率的实验数据:稀禾rk的添加 浓度在。.0 4 m g/k g 时，回收率为8 5.3 0/a;稀禾陡的添加浓度在。.2 0 m g/