GBT 5413.3-1997 婴幼儿配方食品和乳粉 脂肪的测定.pdf

I C S 6 5.1 0 0.1 0X 8 2中 华 人 民 共 和 国 国 家 标 准G B/T 5 4 1 3.3 一 1 9 9 7婴幼)L 配方食品和乳粉 脂肪的测定Mi l k p o w d e r a n d f o r mu l a f o o d s f o r i n f a n t a n d y o u n g c h i l d r e n-De t e r mi n a t i o n o f f a t1 9 9 7-0 5-2 8发布1 9 9 8-0 9-0 1 实施国家技术监督局发 布G B/T 5 4 1 3.3-1 9 9 7前弓 旨 二 1 本标准等同采用国际乳品联合会标准I D F 9 C:1 9 8 7 乳粉、乳清粉、酪乳粉和乳浆粉脂肪含量的测定罗兹一 哥特里重量分析法(基准法)。该方法准确度高，是测定乳、乳粉、婴幼儿配方食品中脂肪含量的基准方法。本系列标准从实施之日 起，代替G B 5 4 1 3-8 5 本标准由中国轻工 总会提出。本标准由全国乳品标准化中心归口。本标准负责起草单位:国家乳制品质量监督检验中心.本标准参加起草单位:卫生部食品卫生监督检验所、浙江省轻工业研究所、哈尔滨森永乳品有限公司、雀巢(中国)投资服务有限公司。本标准主要起草人:王芸、黄敏、张天舒。中华 人 民 共 和 国 国 家 标 准婴 幼 儿 配 方 食 品 和 乳 粉G B/T 5 4 1 3.3-1 9 9 7脂 肪 的 测 定代替 G B 5 4 1 3-8 5Mi l k p o w d e r a n d f o r m u l a f o o d s f o r i n f a n t a n d y o u n g c h i l d r e n -De t e r mi n at i o n o f f a t1 范围本标准规定了脂肪测定的基准方法。本标准适用于婴幼儿配方食 品和乳粉中脂肪的测定。2 方法提要用乙醚和石油醚抽提样品的乙醇氨溶液，通过蒸馏或蒸发去除溶剂，测定溶于醚中的抽提物的质3 试剂 所有试剂，如未注明规格，均指分析纯;所有实验用水，如未注明其他要求，均指三级水。按5.3 规定的步骤进行空白试验，检验试剂的纯度。按5.4 的操作准备一空的脂肪收集瓶用来校正环境的影响。试剂残余物含量不得大于0.5 m g(见8.1)a 如果全部试剂空白残余物大于0.5 m g，则分别蒸馏 1 0 0 m I 一 乙醚和石油醚，测定溶剂残余物的含量。用空的控制瓶测得的量和每种溶剂的残余物的含量都不应超过。.5 m g,更换不合格的试剂，或对试剂进行提纯。3.1 淀粉酶。3.2 氨溶液:质量分数约2 5 Y o I P z。约9 1 0 g/L 注:如果买不到此浓度的氨溶液，可使用已知的、更大浓度的氨溶液(见 5.5.2),3.3 乙醇或由甲醇变性的乙醇:体积分数至少为9 4%(见8.5),3.4 刚果红溶液:I g刚果红溶于水中，稀释至1 0 0 mL,注:可选择性地使用.刚果红溶 液可使溶剂和水相界 面清晰(见5.5.4)，也可使用其他能使水相染色而不影响测定 结果的溶液。3.5 乙醚:不含过氧化物(见8-3)，不含抗氧化剂，或抗氧化剂含量不大于2 m g/k g，并满足空白试验的要求(见第 3 章、8.1 和 8.4)03.6 石油醚:沸程3 0-6 0 C3.7 混合溶剂:等体积混合乙醚(3.5)和石油醚(3.6)，使用前制备。4 仪器由于测定中使用了挥发性可燃溶剂，所有电器的使用均应按照这些溶剂使用的有关规定进行。常用实验室仪器及:国家技术监督局 1 9 9 7 一 0 5 一 2 8 批准1 9 9 8 一 0 9 一 0 1 实施G B/T 5 4 1 3.3-1 9 9 7分析天平。离心机:可安放抽脂瓶或管(4.6)，转速为5 0 0 一 6 0 0 r/min，可在抽脂瓶外端产生8 0-9 0 g的重力月.门产04.4.场 往:可选择性使用。4.3 蒸馏器或蒸发器:可在不超过1 0 0 情况下，蒸馏除掉脂肪收集瓶中的溶剂和乙醇，或蒸发除掉烧杯或平皿中的溶剂和乙醇(见5.5.1 0.5.5.1 4).4.4 烘箱:电热的，通风口完全打开，工作区域温度可控制在1 0 2 士2 0C.配有适当的温度计.4.5 水浴:温度可控制在“士5 C4.6 毛氏抽脂瓶:抽脂瓶(或管，见注)应带有适当的优质软木塞或其他不影响溶剂使用的瓶塞(如硅胶或聚四氟乙烯)。软木塞应先浸于乙醚中(3.5)，后放入6 0 或6 0 以上的水中保持至少1 5 m i n，然后在水中冷却，使用时木塞已饱和。不用时要一直浸泡在水中，浸泡用水每天更换一次。注:也可使用 带虹吸管或洗瓶的抽脂管(或烧 瓶)，但操作步骤有所不同，见附录A中规定。接头的内 部长支管下端 可成 勺状。4.7 支架:放置抽脂瓶(或管)。4.8 洗瓶:适合装混合溶剂(3.7)。不能使用塑料洗瓶。4.9 脂肪收集瓶:例如:容量为1 2 5-2 5 0 m L可加热烧瓶(平底烧瓶),2 5 0 mL锥形瓶或金属皿。若使用金属皿，最好为不锈钢、平底、有溢流口 的，直径为8 0 -1 0 0 m m，高约5 0 m m.4.1 0 沸石:无脂肪、无气孔的瓷片或碳化硅或玻璃珠(用金属皿的情况下)。4.1 1 堂筒:5 m L和 2 5 mL.4.1 2 吸量管:带刻度的，1 0 m L,4.1 3 金属夹钳:用于夹烧瓶、烧杯或皿。4.1 4 毛氏抽脂瓶摇混器:可夹放毛氏抽脂瓶，摆动频率为1 0 0 士1 0 次/m i n,5 操作步骤5.1 样品的制备 反复转动样品容器，使样品充分混合(必要时，将实验样品全部移入大的密闭容器中之后，再进行此操作)。5.2 样品部分 轻轻搅拌或转动样品容器，以便混合实验样品(5.1)，立即取样，直接放在抽脂瓶(4-6)或其他容器中，精确至 1 m g，取样量如下:a)高脂乳粉、全脂乳粉、全脂加糖乳粉和配方乳粉:约1 g,b)部分脱脂乳粉:约 1.5 g,c)脱脂乳粉:约 1.5 g,d)乳清粉:约1.5 g,e)酪乳粉:约1.5 g,f)含乳婴儿谷物(配方)食品:约 1.5 g,5.3 空白试验 空白试验与样品检验同时进行，使用相同步骤和相同试剂，但用1 0 m L水(见8-2)代替已稀释的样品(5.5.1)。5.4 月 旨 肪收集瓶的准备 于干燥的收集瓶(4.9)中加入几粒沸石(4.1 0)，放入烘箱(4.4)中干燥l h。使收集瓶冷却(防尘)至天平室的温度(玻璃收集瓶至少需要l h，金属皿至少0.5 h),GB/T 5 4 1 3.3-1 9 9 7 注 1 在去除溶剂过程中，特别是使用玻璃收集瓶时，沸石可以使沸腾均匀.用金属皿时，也可选择地使用沸石。2 收集瓶不可放入干燥器中，避免冷却不充分或冷却时间过长。用夹钳(4.1 3)(为避免温度的变化)将收集瓶放到天平上称量，精确至0.1 m g,5.5测定5.5.1 样品处理5.5 门.1 不含淀粉样品 加入l O mL 6 5 士5 的水，将试样洗入抽脂瓶的小球中，充分混合，直到样品完全分散，放入流动水中冷却。5.5.1.2 含淀粉样品 将样品放入毛氏抽脂瓶中，加入约 0.l g 的淀粉酶和一小磁性搅拌棒，混合均匀后，加入8 1 0 m L4 5 的蒸馏水，注意液面不要太高。盖上瓶塞于搅拌状态下，置 6 5 C 水浴中2 h，每隔 l O mi n 摇混一次。检验淀粉是否水解完全;加入两滴约。.l mo l/L的碘溶液，无蓝色出现，水解完全，否则将抽脂瓶重新置于水浴中，直至无蓝色产生。冷却毛氏抽脂瓶。5.5.2 加入2 m L氨溶液(3.2)或同体积的浓氨溶液(见3.2 注)，在小球中与已溶解的样品充分混合。加入氨水后，应马上进行下一步骤。5.5.3 将抽脂瓶放入“士5 C的水浴(4-5)中，加热1 5 -2 0 m i n，时而振荡一次，取出，冷却至室温。含淀粉样品不需水浴，静止 3 0 s 后即可进行下面的步骤。5.5.4 加入 1 0 m L乙醇(3.3)，轻轻地使内容物在小球和柱体间来回流动，和缓但彻底地进行混合，避免液体太接近瓶颈。如果需要，可加入2 滴刚果红溶液(3.4),5.5.5 加入 2 5 mL乙醚(3.5)，塞上被水饱和的软木塞(见4.6)，或用水浸湿的其他瓶塞，将抽脂瓶保持在水平位置，小球的延伸部分朝上夹到摇混器上，按约 1 0 0 次/min振荡烧瓶l m i n，不要过度(避免形成持久乳化液)。在此期间，使液体由大球冲入小球。必要时将抽脂瓶放在流水中冷却，然后小心地打开塞子，用少量的混合溶剂(3-7)冲洗塞子和瓶颈 冲洗时使用洗瓶(4.8)J，使冲洗液流入抽脂瓶或已准备好的脂肪收集瓶中(见5.4)05.5.6 加入 2 5 mL石油醚(3.6)，塞上重新润湿的塞子(浸入水中)，接 5.5.5 所述，轻轻振荡 3 0 s.5.5.7 将加塞的抽脂瓶放入离心机(4.2)中，在5 0 0-6 0 0 r/m i n下离心1 -5 m i n。如果没有离心机，则将抽脂瓶放到支架上(4.7)，静止至少3 0 m i n，直到上层液澄清，并明显与水相分离。必要时，放在流水中冷却抽脂瓶。5 5.8 小心地打开软木塞或瓶塞，用少量的混合溶剂冲洗塞子和瓶颈内壁，使冲洗液流入抽脂瓶或脂肪收集瓶中。如果两相界面低于小球与瓶身相接处，则沿瓶壁边缘慢慢地加入水，使液面高于小球和瓶身相接处(见图1)，以便于倾倒。5.5.9 持抽脂瓶的小球部，小心地将上层液尽可能地倒入已准备好的含有沸石的脂肪收集瓶中(也可选用金属皿)，避免倒出水层(见图2).G B/T 5 4 1 3.3-1 9 9 7醚层第二次和第三次抽提后界面界面薪而衷 后水层水层 图 1 倾倒醚层前图 2 倾倒醚层后 (5.5.8，5.5-1 2，5.5.1 3)(5.5.9，5.5-1 2，5.5-1 3)5.5.1 0 用少量混合溶剂冲洗瓶颈外部，冲洗液收集在脂肪收集瓶中。要小心操作，以防溶剂溅到抽脂瓶的外面。最好按 5.5.1 4 所述，采用蒸馏或蒸发的方法，去除脂肪收集瓶中的溶剂或部分溶剂。5.5.1 1 向抽脂瓶中加入 5 m L乙醇(3.3)，用乙醇冲洗瓶颈 内壁，按 5.5.4 所述进行混合.5.5.1 2 重复5.5.5.5.5.1 0 操作，进行第二次抽提，但只用1 5 m L乙醚(3.5)和1 5 m L石油醚(3.6),用混合溶剂(3.7)冲洗瓶颈 内壁。5.5.1 3 重复 5.5.5 5.5.9 操作，进行第三次抽提，但只用 1 5 m L乙醚(3.5)和 1 5 m L石油醚(3.6),用混合溶剂(3.7)冲洗瓶颈内壁。注:如果产品中脂肪的质量分数低于 5%，可省略第三次抽提。5.5.1 4 采用蒸馏的方法除去收集瓶中的溶剂(包括乙醇)，对烧杯或皿可用蒸发(4.3)来除掉溶剂。蒸馏前用少量混合溶剂(3.7)冲洗瓶颈内部。5.5.1 5 将脂肪收集瓶放入1 0 2 C土2 的烘箱(4.4)中加热 l h，取出收集瓶，冷却至天平室的温度(不要放入干燥器中，但要防尘，玻璃容器冷却至少l h，金属容器冷却至少0.5 h)。称量，精确至0.1 m g。称量前不要擦收集瓶。用夹钳将收集瓶放到天平上(避免温度变化)。5.5.1 6 重复5.5.1 5 操作，直到脂肪收集瓶两次连续称量不超过0.5 mg，记录收集瓶和抽提物的最低质量。5.5.1 7 为验证抽提物是否全部溶解，向脂肪收集瓶中加入2 5 mL石油醚，微热，振摇，直到脂肪全部溶解。如果抽提物全部溶于石油醚中，则含抽提物的收集瓶的最终质量(见5.5.1 6)和最初质量(见 5.4)之差，即为脂肪含量。5.5.1 8 若抽提物未全部溶于石油醚中，或怀疑抽提物是否全部为脂肪，则用热的石油醚洗提。允许微量的不溶物质沉淀。小心地倒出石油醚，不要倒出任何不溶物，重复此操作3 次以上，再用石油醚冲洗收集瓶口的内部。最后，用混合溶剂冲洗收集