GBT 15401-1994 水果、蔬菜及其制品 亚硝酸盐和硝酸盐含量的测定.pdf

中 华 人 民 共 和 国 国 家 标 准水 果、蔬 菜 及 其 制 品G B/r 1 5 4 0 1 一 9 4亚硝酸盐和硝酸盐含量的测定 F r u i t s,v e g e t a b l e s a n d d e r i v e d p r o d u c t s-De t e r mi n a t i o n o f ni t r i t e a n d ni t r a t e c o n t e n t本标准等效采用国际标准I S O 6 6 3 5-1 9 8 4 水果、蔬菜及其制品亚硝酸盐和硝酸盐含量的测定 1 主题内容与适用范围本标准规定了水果、蔬菜及其制品亚硝酸盐和硝酸盐含量的测定方法。本标准适用于水果、蔬菜及其制品亚硝酸盐和硝酸盐含量的测定。2 原理 在弱碱性条件下，用热水从样品中提取亚硝酸离子(N O 动和硝酸离子(N O 3)，然后用亚铁氰化钾和乙酸锌沉淀蛋白，过滤。分取两整份溶液。一份直接加磺胺和蔡乙二胺盐酸盐，在波长5 3 8 n m处测量生成的红色复合物的吸光度，计算样品中原有的亚硝酸离子(N O 动含量;另一份用金属锡还原硝酸离子(N O 力为亚硝酸离子(N 0 2-)，然后同上显色，测量样品中原有的亚硝酸离子(N O 扮和硝酸离子(N O 户还原生成的亚硝酸离子(N O 动的总量，由二者之差计算硝酸离子(N O 孙含量。3 试剂 所用试剂除注明者外，均为分析纯，水为去离子水，不含亚硝酸盐及硝酸盐。3 门饱和硼砂溶液:称取5 0 g 硼酸钠(G B 6 3 2),溶于1 0 0 0 m L温水中，冷却至室温。3.2 亚铁氰化钾溶液:0.2 5 m o l/L o称取1 0 6 g 亚铁氰化钾(G B 1 2 7 3),溶于水，定容至1 0 0 0 m L o3.3 乙酸锌溶液:1 m o l/L,称取2 2 0 g 乙 酸锌。溶于3 0 m L 冰乙 酸(G B 6 7 6)和水的混合 液中，再用水定容至1 0 0 0 m L e3.4 显色溶液3.4.1 溶液I 称取0.4 g 磺胺，放入盛有1 6 0 m L 水的2 0 0 m L 容量瓶中，在沸水浴上加热溶解。冷却后(必要时过滤)加入2 0 m L盐酸(P z o=1.1 9 g/m L,G B 6 2 2)，用水定容，避光保存。3.4.2 溶液I 称取0.1 g 蔡乙二胺盐酸盐(C,a H,N H C H,C H,N H,2 H C 1，含量9 8.5%以上)，放入1 0 0 m L容量瓶中，加水溶解后定容，避光保存。3.4.3 溶液11 量取4 4 5 m L盐酸(p z o=1.1 9 g/m L)，放人1 0 0 0 m L容量瓶中，加水定容。3.5 锌棒:长约1 5 0 m m，直径5-7 m m,3.6 硫酸锅溶液:2 0 0 g/1。称取4 0 g 硫酸%(G S 1 2 8 6)，于2 0 0 m L 容量瓶中，加水溶解后定容。3.了 锡粒 置锌棒(3.5)于盛有2 0 0 m L硫酸锡溶液(3.6)的高型烧杯中，及时用刮勺(4.4)将还原生成的 镐刮下 来，并用捣碎机(4.5)打碎，再用。.1 m o l/L 盐酸处理锡粒，然后用蒸馏水冲洗数次，保存于蒸馏水中国家技术监督局1 9 9 4 一 1 2 一 3 0 批准1 9 9 5 一 O l 一 0 1 实施G B/T 1 5 4 0 1 一 9 4备用。3.8 氨缓冲液(p H 9.6):称取3 7.4 g 氯化按(G B 6 5 8)，溶于约9 0 0 m L水中，用浓氨水(p i o=0.8 8g/m l _,G B 6 3 1)调节p H至9.6，再用水稀释至1 0 0 0 M L,3.9 亚硝酸钠标准储备溶液:称取在1 1 5 士5 C 下烘至恒重的亚硝酸钠(G B 6 3 3，基准试剂)0.1 5 0 0 g,十5 0 m l 容量瓶中，加水溶解后定容。此溶液含亚硝酸离子(N O z)2 0 0 0 m g/L,用移液管吸取亚硝酸钠标准储备溶液5 m L于1 0 0 0 ml容量瓶中，用水定容。该溶液为标准工作溶液，含亚硝酸离子(N O i)1 0 p g/m L，宜使用时现配。3.1 0 活性炭 粉末状4 仪器设备 试验中所用玻璃器皿需彻底洗净，并用蒸馏水或去离子水冲洗，以确保无硝酸离子(N O 动和亚硝酸离子(N O,-)存在。4.1 折成槽纹的滤纸:无亚硝酸离子(N O D);4.2 锥形瓶:5 0 m l，具有磨口玻璃塞;4.3 电热恒温水浴锅:温度可调;4.4 刮勺:末端用聚四氟乙烯包裹;4.5 高速组织捣碎机:1 0 0 0 0 -1 2 0 0 0 r/m i n;4.6 振荡机:2 7 5 次/m i n;4.7 大试管:5 0 M L;4.8 分光光度计;4.9 分析天平:感量0.0 0 1,0.0 0 0 1 g,5 样品的制备5.，新鲜果蔬 先将新鲜水果、蔬菜洗净，晾去表面水分，用四分法取可食部分，切碎，按比例加人一定量水(番茄、桔子等多汁样品可不加水)，用捣碎机(4.5)制成匀浆，但在称取试样时，应扣除加水量。5.2 冷冻罐头及酱制品 罐头及酱制品应全部倒出，制成匀浆备用。冷冻制品应先在密闭容器中解冻，混匀，分取一部分备用6 分析步骤6.1 试样中亚硝酸盐、硝酸盐的提取 依试样中亚硝酸盐和硝酸盐含量的大小，准确称取匀浆样2-2 0 g(精确到。.0 0 1 g)或准确量取2 2 0 m l。放入2 0 0 m l烧杯中，加入5 m L饱和硼砂溶液(3.1)和1 0 0 m L(7 0-8 0 C)热水;置沸水浴(4.3)中，加热1 5 m i n，并不断摇动。取出后冷至室温，再加入1 0 m L亚铁氰化钾溶液(3.2),1 0 m L乙酸锌溶液(3.3)和2 g 活性碳粉(3.1 0)，每次加后均充 分摇匀。然后定量转入2 0 0 m L 容量瓶中，用水定容。用折成槽纹的滤纸(4.1)过滤，得无色清亮提取液。6.2 工作曲线的绘制 用移液管吸取亚硝酸钠标准工作溶液(N O i 1 0 p g/m L)0.0,0.5,1.0,1.5,2.0,2.5,3.0 m L，分别倪入7 个5 0 m 1容量瓶中，各加水至约3 0 m L;然后加入5.0 m L溶液 1 0.4.1)3.0 m L溶液m(3.4.3)混匀，置于室温下遮光处，再加入1.0 m L溶液1(3.4.2),混匀，3 m i n 后用水定容，即得每5 0 m 1 中 分别含。,5,1 0,1 5,2 0,2 5,3 0 p g 亚硝酸离子(N O D)的系列标准工作溶液。于1 5 m i n 内，在分光光度计(4.8)上，用1 c。光径吸收池，以零管调零，于波长5 3 8 n m处测其吸光度。在方格坐标纸上以吸G B/T 1 5 4 0 1 一 9 4光度为纵坐标，5 0 m l _ 中亚硝酸离子(N O 户的质量(I,g)为横坐标，绘制工作曲线6.3 亚硝酸盐的测定 用移液管吸取提取液(6.1)1 0 mL于 5 0 ml容量瓶中，用水稀释至约3 0 m L。加人溶液 l(3.4.1)5 m l,，再加入溶液E(3.4.3)3 ml，混匀。置于室温遮光处，再加入溶液 1(3.4.2)1 m l-,混匀，3 m i n 后用水定容于1 5 m i n 内，用1 c m吸收池，以空白 溶液调零，在波长5 3 8 n m处测其吸光度。从工作曲线上查得相应的亚硝酸离子(N O D)质量(p g),同 一 试样应做两个平行测定。同时做空白试验。6.4 硝酸盐的测定 用移液管吸取提取液(6.1)1 0 m l于5 0 m L具塞锥形瓶(4.2)中，加入5.0 0 m L蒸馏水，5.0 0 m L氨缓冲液(3.8)(使总体积为2 0 m L)和2 g 锡粒(加前用滤纸吸干福粒上的水分)，盖好瓶塞，置振荡机(4.6)振荡5 m i n。过滤，弃去部分初滤液，收集滤液于大试管(4.7)中。用移液竹吸取还原滤液 1 0 ml于5 0 m L容量瓶中，显色步骤同(6.3)，在分光光度计(4.8)上，用5 3 8 n m波长,1 c m光径吸收池，以空白 试验作参比 液调零，进行比 色测定，读取吸光度，从工作曲线上查得相应的亚硝酸离子(N O 动质量扣g)。计算硝酸离子(N O 力还原后的亚硝酸离子(N O 动总量，从中减去试样业硝酸离子(N O 动含量，再乘以1.3 4 8 即为硝酸离子(N O 孙含量。同一试样应作两个平行测定。同时做空白试验。7 分析结果的表述计算公式 样品中 亚硝酸离子(N O T)和硝 酸离子(N O T)含量以m g/k g 表示。按公 式(1),(2)计算:N O a(m g/k g)=m,X2 0 0mo 只V,(1)m一一 从工作曲线上查得的测试液中亚硝酸离子(N O T)质量，M;m匀浆样的称取量，9;V整取过滤液体积，m l。一N O T(m g/k g)=1.3 4 8m,X 2 0 0 X 2 V 2 X Mm,X 2 0 0mo X V,r n:一一从工作曲线上查得的测试液中亚硝酸离子(N O 户质量,p 9;叭 硝酸离子(N O 力还原为亚硝酸离子(N O 户后的过滤液整取体积，m l;2-硝酸离子(N O T)还原前后吸取液的体积比 值;3 4 8 亚硝酸离子(N O 扮换算为硝酸离子(N O 力的系数;1下中中又不式式。、。，,V,的含义同公式(1)07.1.2 样品中亚硝酸离子(N O z)和硝酸离子(N 0 3)含量以m g/L表示。分别按公式(3),(4)计算:N O i(m g/l-)=，X2 0 0V。一 V,(3)G B/T 1 5 4 0 1 一 9 4式中:m l 从工作曲 线上查得的测试液中亚硝酸离子(N O 动质量,p g;V。试样的吸取量,m L;V,-整取过滤液体积，m L,N O.(m g/L)=1.3 4 8m,X2 0 0 X 2Vo X V zm,X 2 0 0V X V (4)式中:m 2 从工作曲 线上查得的测试液中亚硝酸离子(N O 户质量,k g;V 2 硝酸离子(N O 孙还原为亚硝酸离子(N O 动后的过滤液整取体积，m L;2-硝酸离子(N O-)还原前后吸取液的体积比值;1.3 4 8 亚硝酸离子(N O 动换算为硝酸离子(N O 扮的系数;、V。、V，的含义同公式(3),了.2 用平行测定结果的算术平均值表示，小数点后保留两位。了.3 重复性 平行测定结果的相对误差不得大于3%,附加说明:本标准由中华人民共和国农业部提出。本标准由全国农业分析标准化技术委员会归口。本标准由陕西省农业科学院黄土高原农业测试中心负责起草。本标准主要起草人李鸿恩、周聪韧、李亚兰、田华。