中华人民共和国国家标准饲料中维生素B:测定方法MethodforthedeterminationofVitaminB2infeedsGB/T14701一931主题内容与适用范围本标准规定了饲料中维生素Bz测定方法。本标准适用于饲料原料、配合饲料、浓缩饲料、维生素预混料中维生素B:的测定。待测液中维生素B,检测浓度为。05^0.2pg/mL.2引用标准GB6682实验室用水规格3方法原理维生素B2(即核黄素CuHzoN,06)在440nm紫外光激发下产生绿色荧光,在一定浓度范围内其荧光强度与核黄素浓度成正比。用连二亚硫酸钠还原核黄素成无荧光物质,由还原前后荧光强度之差与内标荧光强度的比值计算祥品核黄素的含最。4试剂和溶液除特殊规定外,本标准所用试剂均为分析纯,水为蒸馏水或相应纯度的水。4.1盐酸溶液,0.1mol/L:将8.5mL盐酸(GB622)用水稀释至1000mL4.2盐酸溶液,1mol/Lo4.3氢氧化钠(GB629)溶液,1mol/L,4.4冰乙酸(GB676)4.5冰乙酸溶液,0.02mol/L:将1.8mL冰乙酸用水稀释至1000m1。4.6高锰酸钾(GB643)溶液,40g/L,4.7过氧化氢(HG3-1082)溶液,100mL/L。现用现配。4.8核酸素标准溶液4.8.1核黄素贮备液工核黄素(中国药典参照标准),于五氧化二磷千燥器中干燥24h,称取0.0500g,溶解于。02mol/1乙酸溶液(4.5)中,在蒸汽浴上恒速搅动直至溶解,冷却后稀释至500mLe盛入棕色瓶滴加甲苯覆盖,低温(40C)保存。该溶液每毫升含。.1mg核黄素。4.8.2核黄素贮备液II:取核黄素贮备液1(4.8.1)10mL用。.02mol/L乙酸溶液稀释至100mL,盛于棕色瓶中滴加甲苯覆盖,低温(4C)保存该溶液每毫升中含10Ig核黄素。4.8.3核黄素标准工作液:取核黄素贮备液1(4.8.2)10mL,用水稀释至100mL。现用现配该溶液每毫升中含1Fig核黄素。一.~一一一一一--户一,一~一,.一-州一种一一.一一月一一一-~-国家技术监督局1993一11一06批准1994一06一01实施GB/T14701一934.9荧光素标准溶液4.9.1荧光素贮备液:称取荧光素(Q/HG22-786)0.0500g,用水稀释至1000mL,盛于棕色瓶中,低温(4C)保存该溶液每毫升中含50pg荧光素。4.9.2荧光素标准工作液:取荧光素贮备液(4.9.1)1mL,用水定容至1000mL,盛入棕色瓶中,低温保存。该溶液每毫升中含。.05pg荧讹素。4.10澳钾酚绿pH指示剂:取澳钾酚绿(HGB3386)0.1g,加氢氧化钠溶液(0.05mot/L)2.8mL使之溶解,再加水稀释至200mL。变色范围pH3.6^5.2,4.11连二亚硫酸钠(Na,S,O,)(Q/HG2-001),防止吸潮。仪器、设备荧光分光光度计。分析天平:感量0.0001go电热恒温水浴。具塞玻璃刻度试管,15mLe51525354试样的制备采集具...