GBT 19649-2005 粮谷中405种农药多残留测定方法 气相色谱-质谱和液相色谱-串联质谱法.pdf

I C S 6 7.0 6 0C 5 3巧日中 华 人 民 共 和 国 国 家 标 准G B/T 1 9 6 4 9-2 0 0 5 粮谷中4 0 5 种农药多残留测定方法气相色谱一 质谱和液相色谱一 串联质谱法Me t h o d f o r d e t e r mi n a t i o n o f 4 0 5 p e s t i c i d e s r e s i d u e s i n g r a i n s-GC-M S a n d LC-M S-MS me t h o d2 0 0 5-0 2-0 4 发布2 0 0 5-0 8-0 1实施中华人民 共和国国 家 质量监 督检 验检 疫总局中 国 国 家 标 准 化 管 理 委 员 会发 布GB/T 1 9 6 4 9-2 0 0 5目次前言 ，工1范围 12 规范性引用文件 13原理 14 试剂和材料 .15 仪器 ，26 试样制备与保存 27 测定步骤 ，28 结果计算 49 精密度 ，5附录 A(资料性附录)4 0 5种农药中英文名称、方法检出限、分组、溶剂选择和混合标准溶液浓 度表，6附录B(资料性附录)G C-M S 测 定的3 6 2 种农药和内 标化合物的 保留时间、定量离子、定性离子 及定量离子与定性离子的丰度比值 1 9附录 C(资料性附录)G C-MS测定的 A,B,C,D四组农药选择离子监测分组表 ，3 0附录 D(资料性附录)标准物质在小麦基质中选择离子监测GC MS图 3 4附录 E(资料性附录)L C-MS-MS 测定的E组农药监测离子对、碰撞能量、去簇电压和保留时间 ，3 8附录 F(资料性附录)标准物质 L C-MS-MS总离子流图 ，4 0附录 G(资料性附录)4 0 5 种农药精密度数据表 ，4 1附录 H(资料性附录)4 0 5 种农药英文中文名称对照索引 5 3GB/T 1 9 6 4 9-2 0 0 5月 q吕本标准的附录 A、附录 B,附录G、附录D、附录 E、附录 F、附录 G、附录 H为资料性附录本标准由中华人民共和国秦皇岛出人境检验检疫局提出。本标准由中华人民共和国河北出人境检验检疫局归口。本标准起草单位:中华人民共和国秦皇岛出人境检验检疫局。本标准主要起草人:庞国芳、刘永明、范春林、张进杰、曹彦忠、李学民、吴艳萍、郭彤彤本标准系首次发布的国家标准。GB/T 1 9 6 4 9-2 0 0 5 粮谷 中 4 0 5种农药多残留测定方法气相色谱一 质谱和液相色谱一 串联质谱法范围 本标准规定了粮谷中4 0 5 种农药(参见附录 A)残留量气相色谱一 质谱和液相色谱一 串联质谱的测定方法。本标准适用于大米、小米、黑米、玉米、大麦、小麦、燕麦等粮谷中 4 0 5 种农药残留量的测定。本标准的方法检出限为0.0 0 0 2 m g/k g-0.3 0 0 0 m g/k g(参见附录 A).2规范性 引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。G B 5 4 9 1-1 9 8 5 粮食、油料检验 扦样、分样法 G B/T 6 3 7 9 测试方法的精密度通过实验室 间试验确定标准测试方法的重复性和再现性(GB/T 6 3 7 9-1 9 8 6,n e q I SO 5 7 2 5;1 9 8 1)G B/T 6 6 8 2 分析实验室用水规格和试验方法(G B/T 6 6 8 2-1 9 9 2,n e q I S O 3 6 9 6:1 9 8 7)3 原 理 试样采用加速溶剂萃取仪用乙睛提取，提取液经固相萃取柱净化后，用乙睛+甲苯(3+1)洗脱农药，根据不同检测要求用气相色谱一 质谱仪和液相色谱一 串联质谱仪检测。4试荆和材料 除另有说明外，水为 G B/T 6 6 8 2 规定的一级水。4.1 乙睛:色谱纯。4.2 硅藻土:优级纯。4.3 无水硫酸钠:分析纯。用前在 6 5 0 灼烧 4 h,贮于干燥器中，冷却后备用。4.4 甲苯:优级纯。4.5 丙酮:分析纯，重蒸馏。4.6 二氯甲烷:色谱纯4.7 甲醇:色谱纯。4.8 E n v i-1 8柱 :1 2 m 1-,2 g或相当者4.9 S e p-P a k A l u m i n a N柱,1 2 mL,2 g 或相当者4.1 0 E n v i-G a r b柱:6 mL,0.5 g 或相当者。4.1 1 S e p-P a k N H,柱:3 m L,0.5 g 或相当 者。1)En v i-1 8柱和 E n v i-C a r b是由S UP E L C O公司提供的产品的商品名。给出这一信息是为了方便本标准的使用者，并不表示对该产品的认可。如果其他产品能有相同的效果 则可使用这些等效的产品。2)S e p-P a k Al u min a N柱和S e p-P a k NH，柱是由Wa t e r s 公司提供的产品的商品名给出这一信息是为了方便本 标准的使用者，并不表示对该产品的认可。如果其他产品能有相同的效果，则可使用这些等效的产品GB/T 1 9 6 4 9-2 0 0 54.1 2 农药标准物质:纯度)9 5%.4.1 3 农药标准溶液4.1 3.1 标准储备溶液 准确称取 5 mg-1 0 mg(精确至。.1 mg)农药各标准物分别于 1 0 mL容量瓶中，根据标准物的溶解度和测定的需要选甲苯、甲苯+丙酮混合液、二氯甲烷、甲醇等溶剂溶解并定容至刻度(溶剂选择参见附录 A)o4.1 3.2 混合标准溶液(混合标准溶液 A,B,C,D和E)按照农药的性质和保留时间，将 4 0 5 种农药分成 A,B,C,D,E五个组，并根据每种农药在仪器上的响应灵敏度，确定其在混合标准溶液中的浓度。本标准对 4 0 5 种农药的分组及其混合标准溶液的浓度参见附录A,依据每种农药的分组号、混合标准溶液浓度及其标准储备液的浓度，移取一定量的单个农药标准储备溶 液(4.1 3.1)于1 0 0 m L 容量瓶中，A,B,C,D组农药用甲苯，E 组农药用甲醇定容至刻度。混合标准溶液避光 4 保存，可使用一个月。4.1 3.3 内标溶液 准确称取 3,5 mg 环氧七氯于 1 0 0 mL容量瓶中，用甲苯定容至刻度。4.1 3.4 基质混合标准工作溶液 A,B,C,D组农药基质混合标准工作溶液是将 4 0 I L内标溶液(4.1 3.3)和一定体积的混合标准溶液分别加到 1.0 mL的样品空白基质提取液中，混匀，配成基质混合标准工作溶液 A,B,C和D,E组农药基质混合标准工作溶液是用样品空白溶液配成不同浓度的基质混合标准工作溶液 E，用于做标准工作曲线。基质混合标准工作溶液应现用现配。5仪器5.1 气相色谱一 质谱仪:配有电子轰击源(E D.5.2 液相色谱一 串联质谱仪:配有电喷雾离子源(E S D5.3 分析天 平:感量0.1 m g 和。.0 1 g 各一台。5.4 加速溶剂萃取仪:配有 3 4 mL萃取池5.5 旋转蒸发器。5.6 氮气吹干仪。5.7 梨形瓶:2 0 0 mL.5.8 移液器:1 mL.5.9 粉碎机。6 试样制备与保存6.1 试样的制备 按G B 5 4 9 1 扦取的 粮谷样品经粉碎机 粉碎，过2 0目 筛，混 匀，密封，作为试样，标明 标记。6.2 试样的保存 试样于常温下保存。测定 步骤71 提取 称取 1 0 g 试样(精确至。.0 1 g)与 1 0 g硅藻土混合，移人加速溶剂萃取仪的3 4 mL萃取池中，在1 0.3 4 M P a 压力、8 0 条件下，加热5 m i n,静态萃取 3 m i n，循环两次，然后用池体积6 0%的乙睛GB/T 1 9 6 4 9-2 0 0 5(2 0.4 m L)冲洗萃取池，并用氮气吹扫 1 0 0 s。萃取完毕后，将萃取液混匀，对含油量较小的样品取萃取液体积的二分之一(相当于 5g 试样量)，对含油量较大的样品取萃取液体积的四分之一(相当于2.5 g试样量)，待净化。7.2净化7.2.1 对 A,B,C,D组农药:将 E n v i-1 8柱放人固定架上，加样前先用 1 0 mL乙睛预洗柱，下接梨形瓶，移人上述萃取液，并用 1 5 mL乙睛洗脱，在旋转蒸发器上将洗脱液浓缩至约 1 mL，备用。7.2.2 对 E组农药:将上述萃取液在旋转蒸发器上浓缩至约 1 mL，将S e p-P a k Al u mi n a N柱放人下接梨形瓶的固定架上，加样前先用 2 0 mL乙睛预洗柱，将样品浓缩液转移至净化柱上，再用 3 X1 0mL乙睛洗涤样液瓶，并将洗涤液移人柱中，将洗脱液在旋转蒸发器上浓缩至约 1 mL，备用。7.2.3 在 E n v i-C a r b 柱中加人约 2 c m高无水硫酸钠，将该柱连接在 S e p-P a k NH:柱顶部，并将串联柱放人下接梨形瓶的固定架上。加样前先用 4 m工 _ 乙睛+甲苯(3+1)预洗柱，当液面到达硫酸钠的顶部时，迅速将样品浓缩液转移至净化柱上，再用3 X2 ml乙睛+甲苯(3+1)洗涤样液瓶，并将洗涤液移人柱中。在串联柱上加上 5 0 mL贮液器，用 2 5 mL乙睛+甲苯(3+1)洗脱农药，收集于梨形瓶中，并在4 0 水浴中旋转浓缩至约。.5 mL。对 A,B,C,D组农药，加人 2 X5 mL正己烷进行溶剂交换两次，最后使样液体积约为1 mL，加人 4 0 p L内标溶液，混匀，用于气相色谱一 质谱测定;对 E组农药，将浓缩液置于氮气吹干仪上吹干，并迅速用乙睛+水(3+2)定容 1 ML,混匀，用于液相色谱一 串联质谱测定。7.3测定7.3.1 气相色谱 一 质谱法7.3.1.1 条 件 a)色谱柱:D B-1 7 0 1(3 0 mX0.2 5 mm X0.2 5 p m)石英毛细管柱或相当者;b)色谱柱温度:4 0 保持 l m i n，然后以 3 0 C/mi n程序升温至 1 3 0 0C，再以 5 0C/mi n升温至 2 5 0 0C，再以1 0 0C/min升温至 3 0 0 0C，保持5 mi n;c)载气:氦气，纯度)9 9.9 9 9%,流速为 1.2 mL/m i n;d)进样 口温度:2 9 0 0C;e)进样量:1 K I;f)进样方式:无分流进样，1.5 mi n 后打开分流阀和隔垫吹扫阀;B)电子轰击源,7 0 e V;h)离子源温度:2 3 0 C;i)GC-MS接 口温度:2 8 0 0C;J)选择离子监测:每种化合物分别选择一个定量离子，2个3个定性离子。每组所有需要检测 的离子按照出峰顺序，分时段分别检测。每种化合物的保留时间、定量离子、定性离子及定量 离子与定性离子丰度的比值参见附录 B。每组检测离子的开始时间和住留时间参见附录 C e7.3.1.2 定性测定 进行样品测定时，如果检出的色谱峰的保留时间与标准样品相一致，并且在扣除背景后的样品质谱图中，所选择的离子均出现，而且所选择的离子丰度比与标准样品的离子丰度比相一致，则可判断样品中存在这种农药化合物如果不能确证，应重新进样，以扫描方式(有足够灵敏度)或采用增加其他确证离子的方式或用其他灵敏度更高的分析仪器来确证。7.3.1.3定量测定 本方法采用内标法单离子定量测定。内标物为环氧七氯。为减少基质的影响，定量用标准应采用基质混合标准工作溶液标准溶液的浓度应与待测化合物的浓度相近。本方法的 A,B,C,D四组标准物质在粮谷基质中选择离子监测 G C-MS图参见附录 D7.3.2 液相色谱一 串联质谱法7.1 2.1务 件GB/T 1 9 6 4 9-2 0 0 5色谱柱:At l a n t i S T d C,a,3 ls m,1 5 0 mmX 2.1 mm或相当者;流动相及流速见表 1;柱温:4 0 0C;进样量:2