中华人民共和国国家标准GB5413.16—2010中华人民共和国卫生部发布2010-03-26发布2010-06-01实施食品安全国家标准婴幼儿食品和乳品中叶酸（叶酸盐活性）的测定NationalfoodsafetystandardDeterminationoffolicacid(folateactivity)infoodsforinfantsandyoungchildren,milkandmilkproductsGB5413.16—2010I前言本标准代替GB/T5413.16-1997《婴幼儿配方食品和乳粉叶酸（叶酸盐活性）测定》。本标准与GB/T5413.16-1997相比，主要变化如下：——对磷酸盐缓冲液作了调整；——增加了米粉的处理方法；——增加了光密度法测定步骤。本标准所代替标准的历次版本发布情况为：——GB5413-1985、GB/T5413.16-1997。GB5413.16—20101食品安全国家标准婴幼儿食品和乳品中叶酸（叶酸盐活性）的测定1范围本标准规定了婴幼儿食品和乳品中叶酸（叶酸盐活性）的测定方法。本标准适用于婴幼儿食品和乳品中叶酸（叶酸盐活性）的测定。2规范性引用文件本标准中引用的文件对于本标准的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本标准。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本标准。3原理利用干酪乳杆菌（Lactobacilluscasei）ATCC7469对叶酸的特异性，在含有叶酸的样品中生长产生的酸度和形成的光密度来测定叶酸的含量。4试剂和材料除非另有规定，本方法所用试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的二级水。4.1鸡胰腺：称取100mg干燥的鸡胰腺，加20mL蒸馏水，搅拌15min，离心10min（3000转/分钟），取上清液，临用前配制。4.20.9%生理盐水：称取9.0g氯化钠溶解于1000mL水中，分装于具塞试管中，每管10mL，121℃灭菌15min。每周准备一次。4.3磷酸盐缓冲液4.3.1磷酸盐缓冲液Ⅰ（0.05mol/L）：称取5.85g磷酸二氢钾，1.22g磷酸氢二钾，用1000mL水溶解。临用前按0.5g/100mL加入抗坏血酸。4.3.2磷酸盐缓冲液Ⅱ（用于谷物及谷物制品前处理）：称取14.2g磷酸氢二钠，用1000mL水溶解。临用前按1.0g/100mL加入抗坏血酸，用氢氧化钠溶液A（4.16）调pH至7.8±0.1。4.3.3磷酸盐缓冲液III（用于谷物及谷物制品测试）：称取14.2g磷酸氢二钠，用1000mL水溶解。临用前按1.0g/100mL加入抗坏血酸，用氢氧化钠溶液A（4.16）调pH至6.8±0.1。4.3.4磷酸盐缓冲液Ⅳ（0.1mol/L）（用于谷物及谷物制品标准溶液制备）：溶解13.61g磷酸二氢钾于水中稀释到1000mL。用氢氧化钾溶液（4.10）调pH至7.0±0.1。4.4叶酸标准品。4.5氨水（10.8%）。4.6甲苯（C7H8...
