GB/T18204.8-2000前协‘曰为贯彻执行《公共场所卫生管理条例》和GB9663^-9673-1996,GB16153-1996《公共场所卫生标准》,加强对公共场所卫生监督管理,特制定本标准。本标准中的方法是与GB9663-9673-1996,GB16153-1996相配套的监测检验方法。本标准为首次发布。本标准由中华人民共和国卫生部提出。本标准起草单位:北京市卫生防疫站、江苏省卫生防疫站、中国预防医学科学院环境卫生监测所。本标准主要起草人:高晖、封幼玲、周淑玉、符晓梅、韩秀媛。中华人民共和国国家标准公共场所拖鞋微生物检验方法霉菌和酵母菌测定GB/T18204.8-2000Methodsofmicrobiologicalexaminationforslippersinpublicplaces-Determinationofmoldsandyeastscount范围本标准规定了公共场所公用拖鞋霉菌和酵母菌的检验方法。本标准适用于公共场所公用拖鞋霉菌和酵母菌的测定。2定义本标准采用下列定义。霉菌和酵母菌测定determinationofmoldsandyeastscount指在一定条件培养后,50cm“面积检样中所含有的霉菌和酵母菌落数。霉菌和酵母菌主要作为判定被检样品被霉菌和酵母菌污染程度的标志,以便对被检样进行卫生学评价时提供依据。仪器和材料3.1恒温箱:25^-28"Co3.2显微镜。3.3高压蒸汽灭菌器。3.4酒精灯。3.5接种针。3.6平皿:直径9cmo3.7试管架。3.8试管。3.9玻璃珠。3.10无菌棉拭子。4培养墓和试剂4.1生理盐水氯化钠蒸馏水溶解后,分装到加玻璃珠的试管内4.2霉菌培养基成分:蛋白脉酵母浸出粉8.5g1000mL,10mL和9mL,121`C20min高压灭菌。5g2g国家质f技术监督局2000一09一30批准2001一01一01实施GB/T18204.8一2000葡萄糖20g磷酸氢二钾1g硫酸镁(MgSO*·7H_0)0.5g琼脂20g氯霉素0.1g蒸馏水1000mL制法:除葡萄糖外,取上述成分加人水内,微温溶解,调pH为6.8,煮沸,加葡萄糖溶解后,过滤调pH,使灭菌后pH为6.4士0.2}115`C20min高压灭菌。4.3虎红(孟加拉红)培养基成分:蛋白陈59葡萄糖10g磷酸二氢钾1g硫酸镁(MgS04·7H20)0.5g琼脂20g1:3000虎红水溶液100mL氯霉素。.1g蒸馏水1000mL制法:将上述各成分(除虎红外)加人蒸馏水中溶解后,再加人虎红溶液,分装后,高压灭菌121'C20min。4.4马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA)成分:马铃薯(去皮切块)300g葡萄糖20g琼脂20g蒸馏水1000mL制法:将马铃薯去皮切块,加1000mL蒸馏水,煮沸10-20min。用纱布过滤,补加蒸馏水至1000mL。加人葡萄糖和琼脂,加热溶化,分装,121C高压灭菌20min,5操作步骤5.1将无菌棉拭子蘸取无菌生理盐水,在...